本發明涉及天然藥物的技術領域，尤其涉及一種治療急性軟組織損傷的藥物組合物。

背景技術：

小檗堿是一種異喹啉生物堿，分子式C20H18NO4，分子量是235.32，存在于小檗科等4科10屬的許多植物中。研究表明，小檗堿抗菌譜廣，體外對多種革蘭陽性及陰性菌均具抑菌作用，其中對溶血性鏈球菌、金葡菌、霍亂弧菌、腦膜炎球菌、志賀痢疾桿菌、傷寒桿菌、白喉桿菌等有較強的抑制作用，低濃度時抑菌，高濃度時殺菌。對流感病毒、阿米巴原蟲、鉤端螺旋體、某些皮膚真菌也有一定抑制作用。小檗堿的鹽酸鹽(俗稱鹽酸黃連素)已廣泛用于治療胃腸炎、細菌性痢疾等，對肺結核、猩紅熱、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定療效。另外，小檗堿具有良好的抗炎作用，對遲發型超敏反應(DTH)、實驗性潰瘍性結腸炎及實驗性自身免疫性腎小管間質腎炎有明顯抑制作用。無論口服或是皮下注射,都能起到抗急性炎癥的作用，能夠有效抑制二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹，對角叉菜膠引起的大鼠足趾腫脹、慢性棉球肉芽腫也有明顯的抑制作用，對組胺引起的大鼠皮膚毛細血管通透性增加有抑制作用。

梔子苷是一種環烯醚萜苷類化合物，分子式C17H24O11，分子量是388.36，主要來源于茜草科植物梔子的果實。研究表明，梔子苷具有緩瀉、鎮痛、利膽、抗炎、治療軟組織損傷以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用。梔子苷對具有小鼠鎮痛作用，能延長熱刺激所致小鼠痛覺反應時間，顯著抑制醋酸引起的小鼠的扭體次。另外，梔子苷還具有抗炎作用，對小鼠的耳廓腫脹有明顯的抑制作用，可降低由醋酸引起的小鼠毛細血管通透性的增加，對急性炎癥滲出也有明顯的抑制作用。

急性軟組織扭傷，是指軀體中的筋膜、韌帶或肌腱等運動系統的組織，因扭切力而造成的致傷。根據受傷組織的類型，可分為皮下筋膜扭傷，韌帶扭挫傷，肌筋膜撕裂傷等。急性踝關節扭傷、急性腰扭傷或肩關節拉傷等，是臨床常見的軟組織扭傷。通常致傷部位無骨折征象。影像學觀察軀干部位的軟組織扭傷，多無異常征象；而關節軟組織扭傷，可見軟組織腫脹影。患部腫脹和疼痛是急性軟組織損傷最常見的癥狀。傷后12小時內，最佳和最有效止痛的方法，是采用局部冷敷治療。傷部冷敷不僅可有效減少組織液的滲出量和出血量，從而減輕組織的腫脹；而且能減低末梢神經的敏感性，從而減輕疼痛。而組織扭傷24小時后，則可選用“中藥浸泡”或“定向透藥療法”。尤其對于軀干深層軟組織或伴有關節囊扭傷者，應及早采用“定向透藥療法”，該療法能使藥物透入體內深層，加速組織水腫的吸收和致傷組織的修復。

目前，尚無文獻報道小檗堿和梔子苷的藥物組合物可用于治療急性軟組織損傷。經檢索，沒有公開小檗堿和梔子苷的藥物組合物用于治療急性軟組織損傷的專利文獻，也沒有將小檗堿和梔子苷的藥物組合物作為治療急性軟組織損傷藥物使用的制劑上市。

技術實現要素：

目前治療急性軟組織損傷西藥治療多用抗炎藥物鎮痛，但臨床上內服藥物刺激性較大，且藥效難以達病所，副作用較多，且易引起胃腸道反應和腎損害。除此之外，治療急性軟組織損傷還有較多方法，諸如中藥湯丸內服，油膏劑外敷或封閉理療等等，但湯劑須煎，丸劑用量大，理療較為費時。本發明的目的在于針對現有技術中的不足之處，提供一種治療急性軟組織損傷的藥物組合物。小檗堿和梔子苷的藥物組合物在治療急性軟組織方面具有起效快、療效高的特點。

為達此目的，本發明采用以下技術方案：

一種治療急性軟組織損傷的藥物組合物，由以下原料藥物制成：小檗堿和梔子苷。所述小檗堿的分子式為C20H18NO4，分子量是235.32，CAS登錄號為2086-83-1。本發明所述的小檗堿可以從黃連、黃柏中提取得到，也可以由合成或其他方法制得。小檗堿可以通過商業購買獲得，其提取或合成方法也有大量的文獻報道。本發明所述的黃連來源于毛茛科植物黃連、三角葉黃連或云連的干燥根莖，以上三種分別習稱“味連”、“雅連”、“云連”；所述的黃柏來源于蕓香科植物黃皮樹的干燥樹皮，習稱“川黃柏”；蕓香科植物黃檗的干燥樹皮，習稱“關黃柏”。本發明所述的小檗堿、梔子苷可以通過商業購買獲得，其提取或合成方法也有大量的文獻報道。急性軟組織損傷的主要臨床表現為疼痛、腫脹，尚無有關小檗堿和梔子苷作為藥物組合物用于治療急性軟組織損傷的文獻報道。

小檗堿和梔子苷具有良好的抗炎消腫作用，可以有效的減少急性軟組織損傷患者的炎癥滲出液，緩解疼痛癥狀，針對于急性軟組織損傷有很好的治療效果，不含任何有毒有害成分，既安全又有效。

更進一步地說明，所述的小檗堿和梔子苷的重量配比為(1～100):1。所述藥物組合物中的小檗堿和梔子苷的重量配比為(1～100):1，其余為藥學上可以接受的輔料；輔料可為防腐劑、溶劑、乳化劑或促滲劑等常規輔助物質。

更進一步地說明，所述的小檗堿和梔子苷的重量配比為(1～50):1。此重量配比為較優的重量配比，采用該重量配比所制備成的藥物組合物在急性軟組織損傷具有更優異的治療效果。。

更進一步地說明，所述的小檗堿和梔子苷的重量配比為(1～20):1。此重量配比為較優的重量配比，采用該重量配比所制備成的藥物組合物在急性軟組織損傷具有更優異的治療效果。

更進一步地說明，所述的藥物是常規制藥設備可以制得的劑型。

更進一步地說明，所述的劑型為洗劑、噴霧劑、軟膏劑和凝膠劑。同一藥物，劑型不同，適用于疾病的發生發展階段不同，不同劑型可根據疾病不同時期的癥狀和特點正確選用，如皮膚病，一般急性期局部有紅腫、水皰、糜爛時，多選用溶液劑濕敷，可起到消炎作用；有滲液者，先用溶液劑濕敷，后用油劑；皮損處于亞急性期時，紅腫減輕，滲液減少，可酌情選用洗劑，以發揮其消炎、止癢、收斂和保護作用。慢性期皮損增厚，多用軟膏劑或凝膠劑，其穿透力強，作用持久，且有潤滑護膚作用。

更進一步地說明，所述的藥物組合物用于治療急性軟組織損傷，治療效果顯著。

本發明的有益效果：小檗堿具有抗微生物、抗心律失常、降血脂、降血糖、抗炎、抗腫瘤、鎮靜催眠等多種藥理作用；梔子苷具有緩瀉、鎮痛、利膽、抗炎、治療軟組織損傷以及抑制胃液分泌和降低胰淀粉酶等作用；由小檗堿和梔子苷組成的藥物組合物可有效緩解急性軟組織損傷相關癥狀。本發明為急性軟組織損傷提供一種由中藥單體成分組成的藥物組合物，其功能明確、無毒副作用，同時拓寬了小檗堿和梔子苷防治疾病的范圍。

附圖說明

圖1為各組大鼠軟組織損傷示例照片；

圖2為各組大鼠給藥3d的軟組織病理圖片(HE染色，×200)；

圖3為各組大鼠給藥5d的軟組織病理圖片(HE染色，×200)；

圖4為PGE2標準曲線圖；

圖5為IL-1β標準曲線圖。

具體實施方式

下面通過結合附圖和具體實施例來對本發明方案進行詳細說明。本領域技術人員應當理解，下列實施為優選實施例，其僅對本發明方案進行解釋說明，而且其中可能會有對公知技術的適當省略，本領域技術人員應結合公知技術與實施例的說明，對本發明進行理解。

實施例1-洗劑的制備

配方：鹽酸小檗堿(活性成分)5kg，梔子苷(活性成分)5kg，羥苯乙酯(防腐劑)1kg，苯甲酸鈉(防腐劑)2kg，蒸餾水適量(溶劑)。

制備方法：將活性成分和其它輔料溶解于蒸餾水中，定容至1000L，分裝，滅菌，即得。

使用方法：紗布或棉簽蘸取藥液，清洗或濕敷患處，一日2次。

實施例2-洗劑的制備

配方：鹽酸小檗堿(活性成分)100kg，梔子苷(活性成分)5kg，羥苯乙酯(防腐劑)1kg，苯甲酸鈉(防腐劑)2kg，蒸餾水適量(溶劑)。

制備方法：將活性成分和其它輔料溶解于蒸餾水中，定容至1000L，分裝，滅菌，即得。

使用方法：紗布或棉簽蘸取藥液，清洗或濕敷患處，一日2次。

實施例3-洗劑的制備

配方：鹽酸小檗堿(活性成分)250kg，梔子苷(活性成分)5kg，羥苯乙酯(防腐劑)1kg，苯甲酸鈉(防腐劑)2kg，蒸餾水適量(溶劑)。

制備方法：將活性成分和其它輔料溶解于蒸餾水中，定容至1000L，分裝，滅菌，即得。

使用方法：紗布或棉簽蘸取藥液，清洗或濕敷患處，一日2次。

實施例4-洗劑的制備

配方：鹽酸小檗堿(活性成分)500kg，梔子苷(活性成分)5kg，羥苯乙酯(防腐劑)1kg，苯甲酸鈉(防腐劑)2kg，蒸餾水適量(溶劑)。

制備方法：將活性成分和其它輔料溶解于蒸餾水中，定容至1000L，分裝，滅菌，即得。

使用方法：紗布或棉簽蘸取藥液，清洗或濕敷患處，一日2次。

實施例5-噴霧劑的制備

配方：鹽酸小檗堿(活性成分)5kg，梔子苷(活性成分)5kg，冰片(促滲劑)1kg，蒸餾水(溶劑)適量。

制備方法：將活性成分和其它輔料溶解于蒸餾水中，定容至1000L，分裝至噴霧器，滅菌，即得。

使用方法：均勻噴敷患處，一日2次。

實施例6-軟膏劑的制備

配方：鹽酸小檗堿(活性成分)0.5kg，梔子苷(活性成分)0.5kg，硬脂酸(基質)2.4kg，單硬脂酸甘油脂(基質)1.4kg，白凡士林(基質)0.2kg，羊毛脂(基質)1.0kg，液體石蠟(基質)1.2kg，吐溫(乳化劑)80 0.08kg，蒸餾水(溶劑)適量。

制備方法：取硬脂酸、單硬脂酸甘油脂、白凡士林和液體石蠟置小燒杯中，于水浴上加熱至80℃左右，攪拌使熔化。另取吐溫80和計算量蒸餾水置另一個小燒杯，于水浴上加熱至約80℃，攪拌均勻。在同溫下，將水相以細流加到油相中，并于水浴上不斷順方向攪拌成乳白色半固體狀，再在室溫下攪拌至近冷凝。取活性成分置于軟膏板上和研缽中，分次加入制得的O/W型乳化劑基質，研勻即得。

使用方法：均勻涂抹患處，一日2次。

實施例7-凝膠劑的制備

配方：鹽酸小檗堿(活性成分)0.5kg，梔子苷(活性成分)0.5kg，羥甲基纖維素鈉(基質)1.2kg，甘油(保濕劑)2.0kg，苯甲酸鈉(防腐劑)0.1kg，蒸餾水適量。

制備方法：取羥甲基纖維素鈉置于置于研磨中，加入甘油研勻，然后邊研勻邊加入溶有苯甲酸鈉和活性成分的水溶液，待溶脹后研勻，即得。

使用方法：均勻涂抹患處，一日2次。

本部分實驗對本發明的藥物進行藥效學研究。通過建立大鼠急性軟組織損傷模型，考察小檗堿和梔子苷組成的藥物組合物對軟組織損傷程度、局部病理形態、血液流變學和炎癥因子的影響。

1、實驗材料和方法：大鼠急性軟組織損傷模型試驗

SD大鼠在實驗前一天雙腿去毛，當天用3％戊巴比妥鈉麻醉后，將大鼠固定，將100g的砝碼自高處垂直自由落在大鼠小腿后側，踝關節上2.5cm處，連續打擊15次，60min后可見打擊局部出現散在出血點，皮下瘀腫創面，但皮膚完整無破損且無骨折的急性軟組織損傷動物模型。

把造模大鼠按損傷程度隨機分成5組：模型對照組，扶他林陽性對照組，試驗高濃度組(1.38g/ml)、中濃度組(0.69g/ml)、低濃度組(0.35g/ml)，每組15只。除模型組外，其它給藥組每天外敷給藥1次，連續給藥5天。另設一組正常大鼠(空白對照組)。造模期間主要觀察各組大鼠損傷癥候指數變化，末次給藥后取局部組織觀察病理組織學及炎癥因子的變化，取血檢測血液流變學指標的變化。

2、實驗結果

2.1、對軟組織損傷程度的影響

正常大鼠后肢肌肉及皮下組織表現正常，無瘀血、腫脹現象。大鼠造模后，各組大鼠局部組織均出現散在出血點，皮下呈青紫或瘀腫的臨床癥狀。從皮下瘀血，肌肉腫脹及肌肉顏色、疼痛反應4方面每天觀察患肢的癥候表現，在李敏等的評分標準基礎上進行改進評分：1)皮下瘀血：瘀血面積在1-2cm2計2分，瘀血面積在0-1cm2計1分，無瘀血計0分；2)肌肉腫脹：明顯腫脹計2分，稍有腫脹計1分，無腫脹計0分；3)皮膚顏色：紫暗色計2分，暗紅色淺計1分，色澤正常計0分；4)觸之疼痛反應明顯2分，觸之疼痛反應輕1分，觸之無疼痛反應0分。每天觀察一次，計算總分，結果見表1和圖1。

表1各組大鼠軟組織損傷程度評分的比較(n＝15)

注：與空白對照組比較，^#P<0.05，^##P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

除空白對照組外，造模當天(1d)按損傷程度隨機分組后，各組損傷程度經統計分析沒有明顯差別。給藥后，各組損傷程度逐漸恢復，尤其是試驗高劑量組，在2-5d與模型組比較，損傷程度評分均有顯著差異，試驗中劑量組在3-5d與模型組比較，損傷程度評分也有顯著差異，低劑量組的損失程度與模型組比較也有所減輕，但統計學上沒有顯著差異。此外，扶他林組在3-5d與模型組比較，損傷程度評分也有顯著差異。上述結果提示試驗組和扶他林均可有效治療急性大鼠軟組織損傷。

2.2對軟組織局部病理形態的影響

于造模給藥后3d、5d分別取大鼠局部軟組織，置于10％福爾馬林溶液中浸泡固定，酒精分級脫水，石蠟包埋切片，HE染色，在光鏡下觀察病理形態的改變。空白對照組大鼠后肢軟組織形態學一直表現正常。造模給藥后3d，除正常組外，各組大鼠軟組織有不同程度的損傷，尤以模型對照組比較明顯，肌纖維腫脹伴有透明變性，肌纖維明顯壞死，肌纖維中伴有嚴重瘀血、水腫、出血；而試驗高、中劑量組軟組織損傷明顯減輕，肌纖維腫脹、肌組織內瘀血、水腫、出血灶明顯減輕或部分消失。造模給藥后5d，各組大鼠軟組織損傷均有所恢復，但模型組個別大鼠損傷仍然較重，試驗高、中劑量組和扶他林組的大部分軟組織恢復程度接近正常。

2.3對大鼠血液流變學的影響

于給藥后第3、5d分2批處死大鼠。麻醉大鼠，腹主動脈取血，肝素抗凝，采用血液流變儀測定全血黏度及血漿黏度。結果表明，在給藥后第3天，造模大鼠的全血黏度和血漿粘度都有變化，其中模型對照組和空白對照組比較有顯著差異，而試驗高、中劑量組和扶他林組與模型組比較，全血黏度和血漿粘度都有明顯改善。但給藥后第5天后各組全血黏度和血漿粘度變化經統計分析差異不明顯，結果見表2、表3、圖2和圖3。

表2各組大鼠給藥3d全血黏度及血漿黏度的比較(n＝15)

注：與空白對照組比較，^#P<0.05，^##P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

表3各組大鼠給藥5d全血黏度及血漿黏度的比較(n＝15)

注：與空白對照組比較，^#P<0.05，^##P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

2.4對大鼠局部軟組織的炎癥因子的影響

大鼠處死后，手術切取局部軟組織，以生理鹽水制備10％組織勻漿液，離心取上清，凍存備用，擇日采用ELISA法檢測組織中PGE2、IL-1β的含量。具體操作步驟嚴格按照試劑盒操作說明完成。

首先，根據試劑盒提供的標準品稀釋成一系列的濃度，分別測得相對應的OD450值，通過CurveExpert1.3軟件分析作出PGE2、IL-1β的標準曲線圖(如下圖4、5所示)，并得到其方程式。然后根據酶標儀檢測得到樣品的吸光值，利用標準曲線的方程式計算得出待檢樣品中PGE2、IL-1β的濃度(pg/ml)。

實驗結果表明，試驗組對急性軟組織損傷大鼠局部組織的PGE2、IL-1β釋放有一定的影響，其中尤以給藥后3d對局部組織的IL-1β釋放有明顯抑制作用(P<0.05)，給藥后5d對局部組織的PGE2釋放有明顯抑制作用(P<0.05)，結果見表4、圖4和圖5。

表4各組大鼠軟組織損傷PGE2、IL-1β含量的比較(n＝15)

注：與空白對照組比較，^#P<0.05，^##P<0.01；與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

3結論

小檗堿和梔子苷組成的藥物組合物，可以減輕大鼠急性軟組織損傷模型的損傷程度，改善血液流變學，減少炎癥因子的釋放，說明具有治療急性軟組織損傷的作用。

上述的對實施例的描述是為便于該技術領域的普通技術人員能理解和使用發明。熟悉本領域技術的人員顯然可以容易地對這些實施例做出各種修改，并把在此說明的一般原理應用到其他實施例中而不必經過創造性的勞動。因此，本發明不限于上述實施例，本領域技術人員根據本發明的揭示，不脫離本發明范疇所做出的改進和修改都應該在本發明的保護范圍之內。