本發明涉及甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥的一種新用途，具體涉及一種甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥在制備治療和/或預防肺部疾病的藥物中的應用。

背景技術：

生存環境中空氣中的微生物居群、室內和室外空氣污染、包括抽煙，均可直接導致肺病易感人群肺組織損傷，引起病變，可引起炎癥、急性肺損傷、肺纖維化、肺癌等多種疾病。更令人關注的是，隨著我國經濟突飛猛進的發展，環境污染日益嚴重，特別是當前的霧霾形勢嚴峻。如此惡劣的空氣環境勢必威脅廣大民眾的肺臟，呼吸道病人將急劇增加。據預警，五到六年后將是肺部疾病高發期，預計將持續二十年，這將帶來極大的社會問題。

目前，大部分治療肺部疾病的藥物通過全身體循環給與，通過口服或者皮下注射，但這些治療效果有限，嚴重副作用顯著(包括免疫抑制、后續感染、急性加重期疾病和大量出血)，還存在輕微副作用(包括胃腸并發癥，比如腹瀉和惡心)，這些副作用嚴重影響了病人的生活質量。因此，有必要提供一種新的治療肺部疾病的藥物。

激素衍生物是在多種基本代謝轉化中扮演重要生物角色的一類化合物。在所述化合物中，甲狀腺激素例如甲狀腺素((s)-2-氨基-3-[4-(4-羥基-3,5-二碘苯氧基)-3,5-二碘苯基]丙酸，經常簡寫為t4)，和三碘甲狀腺原氨酸(簡寫為t3)，代表重要的關鍵分子，涉及在體內控制多種代謝過程的速率。甲狀腺激素被廣泛用于涉及甲狀腺障礙的數種病變的治療。然而，迄今為止尚未見有關甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥用于治療和/或預防肺部疾病的報道。

技術實現要素：

為解決上述問題，本發明提供了一種甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥的新用途，即在制備治療和/或預防肺部疾病的藥物中的應用。

本發明第一方面提供了甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥在制備治療和/或預防肺部疾病的藥物中的應用。

其中，所述肺部疾病包括急性肺損傷、肺纖維化、氣管炎或肺癌。

其中，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥包括甲狀腺激素t3和/或t4及其藥學上可接受的鹽或前藥。

其中，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥作為單一活性成分或與其他藥學上可接受的活性成分構成組合物以制備所述藥物。

其中，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥與藥學上可接受的載體構成組合物以制備所述藥物。

其中，所述藥物與其他活性藥劑聯合使用，所述其他活性藥劑包括吡非尼酮和尼達尼布中的至少一種。

其中，所述藥物的給藥方式包括局部給藥、消化道給藥或非消化道給藥。

其中，所述藥物的給藥方式包括霧化吸入。

其中，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥的用量為每天0.1-1000微克/公斤體重。

本發明第一方面提供了一種甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥的新用途，甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥可以有效地保護肺泡上皮細胞，調節肺泡上皮細胞表面蛋白合成、儲存和分布，促進肺泡上皮細胞成熟、分化和細胞完整性，有利于肺內積液的清除，促進肺泡上皮細胞內受損線粒體恢復，增強線粒體生物合成，從而有利于受損肺組織修復，阻止和逆轉肺纖維化，調節免疫反應，改變癌化環境，達到防治肺部疾病、改善氣體交換等肺功能，達到治療效果。

本發明第二方面提供了一種試劑盒，包括說明書和如上述第一方面所述的藥物。

附圖說明

圖1為使用microarray平臺所做的基因表達分析圖；

圖2為經定量實時pcr分析dio2mrna表達水平圖；

圖3為dio2蛋白表達通過免疫印記的灰度分析圖(a)和定量分析圖(b)；

圖4為dio2酶切活性在特發性肺纖維化病人(ipf表示)和正常以及肺腫瘤組織(ctrl表示)的比較圖；

圖5為代表性的正常肺部組織(c)和代表性的特發性肺纖維化病人肺部組織(d和e)免疫組化圖片；

圖6為dio2基因敲除對羥脯氨酸含量影響的直方圖(a)和對應的梅森三色(masson)染色組化分析圖(b)；

圖7為抑制甲狀腺素對羥脯氨酸含量影響的直方圖(c)和對應的梅森三色染色(masson)組化分析圖(d)；

圖8為小鼠給與博來霉素后第3天腹腔注射t4的羥脯氨酸含量直方圖(a)和膠原蛋白基因表達分析圖(b)；

圖9為小鼠給與博來霉素后第7天腹腔注射t4的羥脯氨酸含量直方圖(c)和膠原蛋白基因表達分析圖(d)；

圖10為全身給與t4后血清中t3含量變化圖(e)和t3在血清含量和羥脯氨酸在小鼠肺中含量的相對關系直方圖(f)；

圖11為腹腔注射t4后肺部組織的梅森三色染色組化分析圖；

圖12為博來霉素誘導后不同藥物治療后肺組織梅森三色染色組化分析圖(a、b、c、d、e)和不同處理條件下羥脯氨酸的含量直方圖(f)；

圖13為不同處理條件下對小鼠成活率的影響；

圖14為血清中t3含量變化圖；

圖15為t3處理對肺泡積液清除的影響圖；

圖16為肺洗液中蛋白含量變化圖(c、e)和肺洗液中炎癥細胞數量變化圖(d、f)；

圖17為霧化吸入甲狀腺激素對肺功能影響圖。

具體實施方式

以下所述是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也視為本發明的保護范圍。

除非特殊聲明，所有本文中的技術性和科學名詞在該發明中和普遍使用的含義相同。盡管有些方法和材料的敘述可以用于本發明的描述。

本文中，“一”用于指一個或多于一個(比如至少一個)。舉例說明，“一種成分”的含義是一種成分或多于一種成分。

本文中，測量值表達方法，比如數量，持續時間，而類似是指包括±20％或±10％的變量，或者更為精確的±5％或者±1％，更精確能在某些特定數值達到±0.1％，這些變量更適合文章所描述的方法。

疾病或者紊亂“減輕”指的是患者該問題癥狀的嚴重程度，發病頻率有所下降，或兩者都有。

“共同給與”一方面的含義是同時給與實驗者試驗藥物或者鹽水對照(參照組)跟另外一種藥物一起治療，本文中，共同給與實際操作時候是分開給藥的，只是在該治療中藥物為聯合使用。共同給與的藥物可以是各種形態或混合物，比如固體、液體、凝膠或者溶液。

本文中，“組合”或者“藥物組合”指的是本發明中所使用的一種以上藥物的混合，使用藥物學上可接受的載體。藥物組合幫助藥物更容易到達病人或實驗動物病灶。條款中描述多種技術包括，并不局限于，靜脈給藥、口服、氣霧吸入、腸胃外、眼部、鼻腔、肺部和局部給藥。

本文中，“dio2”指的是二型碘甲腺氨酸脫碘酶，碘甲腺原氨酸5'-脫碘酶或碘甲腺原氨酸5'-單脫碘酶。dio2脫去甲狀腺素前體激素(t4)激活甲狀腺素外環上的碘而生成具有生物活性的3,3’,5-三碘甲狀腺原氨酸(t3)。

本文中“疾病”指的是實驗動物的健康狀態不能維持穩態，所以在本文中疾病不改善，動物的健康狀態持續惡化。

本文中“紊亂”指的是實驗動物的健康狀態能夠維持穩態，但是如果實驗動物的健康狀態比沒有“紊亂”的動物要差。如果不予以治療，“紊亂”并不一定會導致實驗動物發展成疾病狀態。

本文中“有效劑量”，“藥物學有效劑量”和“治療有效劑量”指非毒理性但足夠劑量能夠引起所需的生物學結果。這些結果包括減少或減輕疾病的特征，癥狀，疾病的原因，或者其它生物學系統的良好方向發展。針對個體合適的治療劑量可根據常規實驗數據正常范圍得出。

本文中，“纖維性肺部疾病”或者“肺纖維化”或者“肺疤痕”指的是特征為在肺部形成或逐漸發展成過多纖維結締組織(纖維化)的一組疾病。肺纖維化的癥狀主要有：呼吸局促，特別是用力時；長期干咳；乏力和虛弱；胸腔不適；還有食欲下降和快速體重減輕。肺纖維化可能是其它疾病導致的，大多數情況被歸類為間質性肺病，比如自身免疫疾病，病毒感染或者肺部的微觀損傷。肺纖維化的發生可以沒有已知原因(“特發性”)。特發性肺纖維化的診斷是排除一系列常規間質性肺炎的組織學/病理學特征。

能導致肺纖維化的疾病和情況包括：吸入環境和職業中等污染物(石棉肺，硅肺和氣體暴露)；超敏性肺炎，大多數情況是吸入塵埃中含有細菌，真菌或者動物產品；吸煙；結締組織疾病比如風濕性關節炎，系統性紅斑狼瘡(sle)；藥物導致比如胺碘酮，博來霉素(平陽霉素)，白消安，甲氨蝶呤，阿撲嗎啡和呋喃妥因；以及胸腔的放療。

本文中“病人”，“實驗對象”，“個體”可以相互轉化使用，對于實驗動物和實驗細胞而言也是如此，體內和體外都一樣。在沒有限制的實施例中，病人，實驗對象和個體指的是人。

本文中，“藥物學可接受的”指的是一種材料，比如載體或者稀釋劑，他們本身不影響藥物的生物學活性，而且相對是無毒的，比如該材料可以注入個體體內而不會引起不好的生物學反應或和其攜帶的藥物發生嚴重的反應。

本文中，“藥物學可接受的載體”指的是藥學上可接受的材料，組和或者載體，比如液體，固體填料，穩定劑，分散劑，懸浮劑，稀釋劑，賦形劑，增稠劑，溶劑或包封材料，他們的作用是運輸本發明中的有效成分，使其在患者體能發揮應有的作用。一般而言，運輸是從一個器官，或者身體的某一部分到達另外一個器官或者身體的另外一個部分。每一個載體必須和各個配方成分相兼容，包括發明中的有效成分，使其對患者不產生負面影響。這些材料在藥物學上可接受的載體包括：糖類，比如乳糖，葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素，以及其藥學上可接受的鹽或前藥，比如羧甲基纖維素鈉，乙基纖維素和乙酸纖維素；粉末黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，例如可可脂和栓劑蠟；油，例如花生油，棉籽油，紅花油，芝麻油，橄欖油，玉米油和大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油，山梨醇，甘露醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，例如氫氧化鎂和氫氧化鋁；表面活性劑；藻酸；無熱原水；等滲鹽水；林格氏溶液；乙醇；磷酸鹽緩沖溶液；以及其它無毒在藥物學上配方相容物質。

本文中，“藥物學上可接受的載體”也包括所有的表面涂料，抗菌和抗真菌制劑，吸收延遲劑，和與本發明中有用的化合物的活性相容的類似物，這些在生理學上能被病人所接受。

補充的活性化合物也可以摻入有效成分組合中。

“藥物學上可接受的載體”也可以進一步包括發明中在藥物學上可接受的有效鹽成分。其它成分也包括制藥學上的成分組成，在條例中描述和使用的該項發明，比如在remington制藥學科學((genaro,ed.,mackpublishingco.,1985,easton,pa),在此引用作為參考。

本文中，詞語“藥物學上可接受的鹽”指的是由藥物學上可接受的無毒酸制備的化合物的鹽，可給與病人，包括無機酸，有機酸，溶劑化物，水合物或籠形物。

本文中，“預防”含義為在給與了藥物后未發病的實驗者能避免或者延遲和疾病或狀況相關的癥狀發生。

本文中，“t3”指的是(s)-三碘甲狀腺原氨酸，碘甲腺氨酸，(s)-2-氨基-3-[4-(4-羥基-3-碘苯氧基)-3,5-二碘苯基]丙酸或其鹽或溶劑合物。具體地，t3的化學式如下式(ⅰ)所示。

本文中，“t4”(s)-甲狀腺素，(s)-2-氨基-3-[4-(4-羥基-3,5-二碘苯氧基)-3,5-二碘苯基]丙酸或其鹽或溶劑合物。具體地，t4的化學式如下式(ⅱ)所示。

“治療上的”指的是對于已經顯現出了病變特征的實驗個體進行的治療，為了達到減輕或者消除癥狀的目的。

本文中“治療”或者“治療過程”定義為使用治療上的藥物，比如本發明中的化合物(單獨使用或者跟其它藥物聯合使用)，用在病人，或者用在病人身體提取分離的組織或者細胞系(比如為了診斷和體外培養)。該病人其具有本文考慮的病癥，病癥的癥狀或能發展成本文考慮的病癥的可能性，為了治愈，治療，減輕，改變，減弱，提高或者影響本文考慮的病癥和或者發展出該病癥狀的可能性。這些治療可以根據不同藥物基因組學的最新知識在適當情況下量體裁衣。

貫穿于本公開文件，本發明的各個方面可以以一定范圍的格式呈現。值得注意的是，范圍格式中的描述僅為了方便和簡潔，并不是本發明應用范圍不靈活的限制。相應的，范圍描述應被認為已經詳細公開了全部可能的子范圍和范圍內的單個數值。例如，諸如1至6的范圍的描述應當被認為已經具體公開了子范圍，例如1至3，1至4，1至5，2至4，2至6，從3到6等，以及在該范圍內的單個數字，例如1,2,2.7,3,4,5,5.1,5.3,5.5和6。這適用于該范圍的寬度。

本發明實施方式第一方面提供了一種甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥在制備治療和/或預防肺疾病的藥物中的應用。

本發明實施方式中，所述肺疾病包括急性肺損傷、肺纖維化、氣管炎或肺癌。

本發明實施方式中，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥包括甲狀腺激素t3和/或t4及其藥學上可接受的鹽或前藥。可選地，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥包括甲狀腺激素t3和/或t4的鈉鹽。具體地，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥包括甲狀腺素鈉。

本發明實施方式中，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥作為單一活性成分或與其他藥學上可接受的活性成分構成組合物以制備所述藥物。

本發明實施方式中，所述甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥可與藥物學上可接受的載體構成組合物以制備所述藥物。在一個實施例中，本發明的藥物組成使用包括本發明中藥物的有效治療劑量和一個藥學上的合理載體。載體可以是含有例如水，乙醇，多元醇(例如甘油，丙二醇和液體聚乙二醇等)，其合適的混合物和植物油的溶劑或分散介質。可通過使用如卵磷脂包裹，通過在分散體的情況下維持所需的粒度和通過使用表面活性劑來保持適當的流動性。防止微生物的作用可以通過各種抗菌劑和抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯，氯丁醇，苯酚，抗壞血酸，硫柳汞等實現。在許多情況下，優選在組合物中包含等滲物質，例如糖，氯化鈉或多元醇如甘露醇和山梨醇。

在一個實施例中，本發明的藥物直接和藥物學組成包裝在了一起，包括一個含有治療有效劑量藥物的容器，單獨使用或者和另外一個藥物學物質共同使用；本發明在的說明描述了用藥物治療，預防或者減輕疾病或紊亂的癥狀的使用方法。

制劑可以與常規賦形劑，即適合于本領域已知的任何合適的給藥方式的藥物學上合適的有機或無機載體物質的混合物使用。藥物學準備工作可無菌處理，如果需要可與輔助劑混合，例如潤滑劑，防腐劑，穩定劑，潤濕劑，乳化劑，影響滲透壓緩沖劑的鹽，著色劑，調味劑和/或芳香物質等。也可以根據需要與其它活性成分組合使用，例如止痛劑。

本發明實施方式中，本發明中的藥物聯合至少一種其它藥物對于治療和預防纖維性肺病效果更好。其它藥物可能是發明中所包含的，或者比如可以買到的，已知的可以預防或減輕纖維性肺病癥狀的藥物。所述藥物與其他活性藥劑聯合使用，所述其他活性藥劑包括吡非尼酮(5-甲基-1-苯基吡啶-2-酮或其鹽或溶劑化物，pirfenidone)和尼達尼布(3z)-3-{[(4-{甲基[(4-甲基哌嗪-1-基)乙酰基]氨基}苯基)氨基](苯基)亞甲基}-2-氧代-2,3-二氫-1h-吲哚-6-羧酸甲酯，或其鹽或溶劑合物，nintedanib)中的至少一種。

協調效用可以根據以下方法計算得出，sigmoid-emax公式(holford&scheiner,19981,clin.pharmacokinet.6:429-453),loewe加性公式(loewe&muischnek,1926,arch.exp.patholpharmacol.114:313-326)和中位數效應公式(chou&talalay,1984,adv.enzymeregul.22:27-55).以上公式都可根據實驗數據生成相應的圖表，來評估聯合用藥的效果。每一個和公式相關的相應圖表分別為濃度效果曲線，等值線曲線和組合指數曲線。

本發明實施方式中，所述藥物還可以與其他方式進行聯合治療，如本發明藥物的施用可與吸氧相結合。

本發明實施方式中，所述藥物的給藥方式包括局部給藥、消化道給藥或非消化道給藥。局部給藥是指直接用藥于要影響的身體部位，包括：表皮給藥，吸入給藥，灌腸給藥，眼部給藥，鼻腔給藥。消化道給藥，包括口服、肛門給藥。非消化道給藥包括經動脈注射、靜脈注射、肌肉注射、心內注射、皮下注射、骨髓腔內注射、皮內注射、顱內植入或透皮給藥。可選地，所述藥物的給藥方式包括口服、注射或霧化吸入。具體地，以上藥物給與方式包括霧化吸入氣管內、肺內和支氣管內。

甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥通過吸入器直接進入肺部。這一方法有利于甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥直接進入肺部及特定損傷部位或區域，使得治療效果最大化并讓全身給藥的潛在副作用最小化。

合適的組成和給與藥物形式包括例如分散體，懸浮液，溶液，糖漿，顆粒，珠，粉末，丸劑，用于鼻或口服的液體噴霧劑，用于吸入的干粉或氣霧化制劑等。值得注意的是應用于本發明的制藥方式和組成并不局限于本文中描述某種特定的方法和組成。

本發明的藥物制劑的粉末和顆粒制劑可以使用已知的方法準備。這樣的制劑可以直接給與于實驗對象，用于例如該材料適合某一實驗對象。每一種制劑中還可以包含一種或多種分散劑或潤濕劑，懸浮劑和防腐劑。制劑成分還可以包括另外的賦形劑，例如填充劑和甜味劑，調味劑或著色劑。

本發明的藥物組合可以通過口腔以適于肺部給藥的制劑準備，包裝或銷售。制劑方法可以包括干粉顆粒，其中包含有藥物活性成分，直徑約0.5到7納米，最適應為約1到6納米。為方便使用，這種組合物為干粉形式，可使用包括干粉儲存器的裝置進行施用，其中可以根據說明推進劑流動以分散粉末，或者使用自行推進溶劑/粉末分配容器，例如包括活性成分溶解或懸浮在密封容器中的低沸點推進劑中。理想情況下，這種粉末包括的顆粒質量中至少98％直徑大于0.5納米，數量上至少95％顆粒直徑小于7納米。更理想的是，粉末包括的顆粒質量中至少95％直徑大于1納米，數量上至少90％顆粒直徑小于6納米。干粉組成包括一種固體細粉末稀釋劑，比如糖，這樣方便以單位劑量形式提供。

低沸點推進劑一般包括液體推進器，沸點在大氣壓下低于65華氏。通常，推進劑可構成組合物的50-99.9％(質量/質量)，活性成分可占組合物的0.1-20％(質量/質量)。推進劑可以進一步包含另外的成分，例如液體非離子或固體陰離子表面活性劑或固體稀釋劑(最好具有與包含活性成分的顆粒相同數量級的顆粒大小)。

本發明藥物組合物的配制專門用于肺部給藥，以溶液或懸浮液的液滴的形式提供活性成分。這樣的制劑可以準備，包裝或作為含有或含有活性成分，可選擇無菌的水性或稀釋醇溶液或懸浮液出售，并且可以方便地使用任何霧化或霧化裝置施用。這種配置可以進一步包括一種或多種額外的成分，比如但并不局限于調味劑如糖精鈉，揮發油，緩沖劑，表面活性劑，或防腐劑如羥基苯甲酸甲酯。這種給藥途徑提供的液滴最好平均半徑在約0.1至約200納米范圍。

本文描述的可用于本發明藥物組合物的肺部給藥制劑方法也可用于鼻腔內給藥。

另一種適于鼻腔內給藥的制劑方法是包含活性成分并平均顆粒約0.2至500微米的粗粉末。

這種制劑以吸氣時候施用，即通過將粉末容器靠近鼻孔通過鼻道快速吸入。適合于鼻內給藥的制劑方法包含約0.1％(質量/質量)至100％(質量/質量)的活性成分，并且可以包含一種或多種額外的成分。

給藥方案可以影響有效量的組成成分。本發明治療制劑可以在發病前或者發病后給與實驗對象。此外，幾次分開的劑量以及交錯劑量可以每日或順序給藥，或者劑量可以連續輸注，或者可以是推注。還有，治療制劑的劑量可根據治療或預防情況的緊急情況按比例地增加或減少。可以通過調整劑量方案以提供最佳治療效果。

向患者，優選哺乳動物，更優選人施用本發明中的藥物可以使用已知的給藥程序，用本發明中陳述的疾病或紊亂的劑量和治療時間給與執行。本研究中有效治療劑量需要根據不同因素來調整，包括病人疾病和紊亂的發展階段，年齡，性別，體重；還有治療藥物的活性。比如，可以每天施用幾個分開的劑量，或者可以按照治療情況的緊急情況按比例減少劑量。其中一個非限制性示例為本發明的治療藥物有效劑量范圍約為每天0.1-1000微克/公斤體重。

研究人員將能夠研究相關因素并且在不進行過度實驗的情況下確定治療藥物的有效劑量。實際應用中本發明的有效成分的含量，給與方法可能根據每一個患者而不同，因為每個患者對藥物的反映，對藥物毒性的閾值各不相同。

本發明中治療的有效劑量和給與病人的劑量要根據病人的年齡，性別和體重，已經目前用藥情況以及疾病的發展情況進行調整。醫生，比如內科醫生或者獸醫，有能力做出病人所需有效成分的處方決定權。比如內科醫生或者獸醫可使用比推薦劑量較低的劑量開始治療，然后逐漸增加已達到所期待的治療效果。

本發明中合適的劑量范圍可以是每天0.1μg到1000μg，或者1μg到500μg，或者5μg到250μg。這個劑量可以一次給與，或者分多次給與，可以一天給與1到4次。當多次給藥時，每次的劑量可以相同也可以不同。比如，每天1μg的劑量可以分兩次0.5μg間隔12小時給與。

某些實施例中，本發明的用藥量為1μg到1000μg。某些實施例中，本發明的用藥含量少于1000μg，或少于500μg，或少于200μg，或少于50μg。同樣的，在某些實施例中，本發明中額外藥物的劑量少于1000μg，或少于800μg，或少于600μg，或少于500μg，或少于400μg或少于300μg，或少于200μg，或少于100μg，或少于50μg，或少于40μg，或少于30μg，或少于25μg，或少于20μg，或少于15μg，或少于10μg，或少于5μg，或少于2μg，或少于1μg，或少于0.5μg，或者是其中任何一個中間值。

在其中一個實施例中，本研究的藥物給與病人的頻率為一天一次到五次以上。在另一實施例中，本研究藥物給藥頻率可以是但并不局限于每天一次，每兩天一次，每三天一次，直到每周一次，每兩周一次。很明顯的是，目前給藥多種組合的頻率不盡相同，取決于但不局限于年齡，疾病和紊亂是否進行過治療，性別，健康狀況以及其它因素。因此，本發明不應被理解為限于任何特定的劑量方案，并且給與任何患者的精確劑量和組合物，要通過考慮到患者的所有其他因素而進行物理確定后來決定。

可以理解的是每天給與的藥物可以但并不局限于每天一次，每兩天一次，每三天一次，每四天一次，每五天一次。比如說，針對每兩天給與的頻率，一天給與5μg，可以由周一開始給與第一個5μg，然后周三5μg，周五5μg，依次進行下去。

在患者狀態改善的情況下，根據醫生的判斷，可以連續給與本發明的藥物；或者，所施用的藥物的劑量暫時減少或暫時中止一段時間(比如“藥物假期”)。藥物假期的長短可以從2天到1年，包括2天，3天，4天，5天，6天，7天，10天，12天，15天，20天，28天，35天，50天，70天，100天，120天，150天，180天，200天，250天，280天，300天，320天，350天或者365天。藥物假期中劑量減少范圍是10％-100％，可包括10％,15％,20％,25％,30％,35％,40％,45％,50％,55％,60％,65％,70％,75％,80％,85％,90％,95％,或者100％。

一旦病人出現癥狀改善，維持治療的劑量可以給與。另外，也可以將劑量或頻率，或者兩者都降低，如果患者的身體功能在疾病和紊亂情況下都有所改善。在其中一個實施例中，病人需要長期間斷性的智力，因為癥狀的反復出現和/或感染。

本發明中藥物使用方法可制成每單位劑量的方式。術語“單位劑量方式”指的是適于作為接受治療的患者的單位劑量的物理上不連續單位，其中每個單位含有提前計算好的活性物質，經計算產生所需的治療效果的劑量，也可以聯合適宜的制藥載體使用。單位劑量方式可以一天一次，也可以一天多次(比如1天一次到四次)。當每天給與多次劑量時，單位劑量可以每次相同或不同。

毒性和治療效果的測定是可選擇進行的，結果來自細胞學實驗和動物實驗，包括但不并局限于，ld50(讓實驗群體50％的致死劑量)和ed50(讓實驗群體50％的有效劑量)。毒性和有效性的比值為治療指數，為ld50和ed50的比值。可根據細胞學和動物學獲得的數據來推斷出用于人體的劑量范圍。每個藥物的劑量最好是體循環中接近ed50并且毒性最小。劑量根據這個范圍可根據給與方式和使用途徑改變。

本發明實施例提供了甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥的一種新用途，甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥可以提高肺組織thrt水平可以有效地保護肺泡上皮細胞，調節肺泡上皮細胞表面蛋白合成、儲存和分布，促進肺泡上皮細胞成熟、分化和細胞完整性，有利于肺內積液的清除，促進肺泡上皮細胞內受損線粒體恢復，增強線粒體生物合成，從而有利于受損肺組織修復，阻止和逆轉肺纖維化，調節免疫反應，改變癌化環境，達到防治肺部疾病、改善氣體交換等肺功能，達到治療效果。

本發明實施方式第二方面提供了一種試劑盒，包括說明書和如上述第一方面所述的藥物。

本發明實施方式中，所述試劑盒中還包括霧化器。

本發明實施方式中，所述說明書描述了預防和治療急性肺損傷和纖維性肺病的說明，給藥途徑，頻率等。

實施例1：

甲狀腺素霧化劑的制備：

取甲狀腺素或其鈉鹽，溶于氫氧化鈉等堿性溶液中，濃度可達5mg/ml，然后可用生理鹽水(可加少量修飾成分)稀釋250倍，作為存儲液。使用時取1-5ml存儲液，稀釋至一定體積，選取相應的霧化器進行霧化，霧化時間為15-20分鐘較宜，(如使用歐姆龍霧化器，霧化吸入10ml，大約霧化15分鐘)。

下面結合附圖來說明本發明具體實施情況。

圖1-5表明dio2在特發性肺纖維化病人肺組織中大幅上調。其中，圖1為使用microarray平臺所做的基因表達分析，證明dio2是其中一個上調最為顯著的基因(p＝5.4e-7)，特發性肺纖維化病人(n＝89)比對照組(n＝42)高達8.49倍。圖2為經定量實時pcr分析dio2mrna表達水平在ipf病人(n＝53)和對照人群(圖中用ctrl表示)(n＝17)。圖3(a)為dio2蛋白表達通過免疫印記比較特發性肺纖維化病人(n＝6)和對照(n＝3)的肺部組織。圖3(b)為圖3(a)中免疫印記的灰度分析結果。圖4為dio2酶切活性在特發性肺纖維化病人(ipf表示)和正常以及肺腫瘤組織(ctrl表示)的比較。圖5為代表性的正常肺部組織(c)和代表性的特發性肺纖維化病人肺部組織(d和e)免疫組化圖片；其中c代表性的正常肺組織免疫組化圖片。圖d和e代表性的特發性肺纖維化病人肺部組織圖片。

圖6-圖7表明dio2缺陷(dio2ko)和甲狀腺素抑制條件均加劇小鼠肺纖維化。其中，將8周大的小鼠氣管內給與博來霉素(1.5u/kg)，在第14天后殺死。圖6a和6b是dio2敲除老鼠的實驗結果，圖7c和7d是甲狀腺素抑制劑ptu(丙基硫脲嘧啶)處理情況下的結果。圖6a:右肺羥脯胺酸含量在野生型(wt，在圖中以dio2+/+表示)和dio2ko小鼠(dio2基因敲除小鼠，在圖中以dio2-/-表示)第14天的結果比較(每組n＝8)。圖6b:免疫組織化學分析表明膠原蛋白在野生型(在圖中以dio2+/+表示)和dio2ko小鼠肺組織(在圖中以dio2-/-表示)表達區別(第14天)。圖7c:右肺羥脯胺酸含量在ptu抑制甲狀腺素下小鼠第14天的結果比較(每組n＝8)。圖7d:免疫組織化學分析表明膠原蛋白在有或無ptu處理條件下小鼠肺組織表達區別(第14天)。

圖8-11顯示在博來霉素腹腔注射給與t4能減輕肺纖維化。其中，40μg/kgt4在給與博來霉素后3或7天通過腹腔給與，小鼠在第14天被殺死。圖8a:羥脯胺酸測量顯示博來霉素在鹽水和ptu組均顯著升高，而在t4處理過的組中同鹽水比較沒有顯著性變化，t4為第三天注射t4。圖8b:qrt-pcr表明t4處理有效地抑制了靶向基因col1a1,col3a1,s100a4和acta2表達，(n＝8,p<0.05)，t4為第三天注射t4。圖中直柱從左到右依次為t4組、pbs組和ptu組，pbs組為鹽水對照組。圖9c:羥脯胺酸測量顯示博來霉素在鹽水和ptu組均顯著升高，而在t4處理過的組中同鹽水比較沒有顯著性變化，t4為第七天注射t4。圖9d:qrt-pcr表明t4處理有效地抑制了靶向基因col1a1,col3a1,s100a4和acta2表達，(n＝8,p<0.05)，t4為第七天注射t4。圖中直柱從左到右依次為t4組、pbs組和ptu組。圖10e:全身給與t4顯著性升高了體循環中t3的水平(n＝10,p<0.05)。圖10f:t3在血清含量和羥脯氨酸在小鼠肺中含量的相對關系。圖11:組織學masson三色染色針對博來霉素的纖維化和炎性反應在第三天或第七天給與t4治療而減弱。其中，圖中數字3和數字7代表第三天注射和第七天注射t4。

圖12-14顯示霧化吸入t3減輕了博來霉素引起的纖維化并降低其致死率。給與1.5u/kg博來霉素的第10,12,14,16天，霧化和吸入40μg/kgt3，鹽水為對照。在第21天殺死小鼠取材。圖12a-e:massontrichorome膠原蛋白染色分析結果。a，正常對照組老鼠肺組織，b，博來霉素誘導的纖維化肺組織，c，博來霉素誘導纖維化后t3治療下肺組織，d，博來霉素誘導后尼達尼布(fda批準藥物)治療后的肺組織，e，博來霉素誘導后吡菲尼酮(fda批準藥物)治療后的肺組織，結果顯示t3的治療效果最好。圖12f:羥脯胺酸測量顯示博來霉素處理后顯著升高，而40g/kgt3吸入后降低了羥脯氨酸含量。圖13:kaplan-meier生存曲線分析顯示博來霉素導致的致死率。4.0u/kg博來霉素在第0天通過氣管給與，40μg/kgt3從第10天起每隔一天霧化吸入，鹽水為對照。圖14:elisa檢測血清中t3水平顯示吸入t3并未改變小鼠的血清t3水平(n＝10,p<0.05)，圖中二甲基亞砜代表溶劑對照。

圖15-16顯示霧化吸入甲狀腺素可有效清除肺積液，減少細胞內容物外泄和炎癥。其中，圖15a，b顯示t3處理可增加肺內積液的清除，而反式t3則無此功能，在氧脅迫條件下(急性肺損傷)t3處理促進肺積液清除。圖16c，d，t3處理在lps(脂多糖)誘導的急性肺損傷中的作用。小鼠在lps處理后3小時和24小時吸入t3，48小時候采集小鼠樣品，分析表明t3處理可保護細胞完整性，減少細胞內容物流出，同時也減少炎癥細胞在肺泡中的積累，減輕炎癥反應。圖16e，f，t3處理在鹽酸暴露導致的急性肺損傷中的作用。小鼠在鹽酸處理后3小時和24小時吸入t3，48小時候采集小鼠樣品，分析顯示鹽酸暴露導致急性肺損傷模型下t3處理可保護細胞完整性，減少細胞內容物流出，同時也減少炎癥細胞在肺泡中的積累，減輕炎癥反應。

圖17顯示t3處理顯著改善由博來霉素誘導的纖維化了得肺功能。小鼠給與博來霉素后第10天開始隔天霧化吸入t3(40ug/kg)，第21天進行肺功能測試。其中，橫坐標為肺內壓力，縱坐標為肺內體積變化。圖17中各曲線從上到下依次為博來霉素+t3、博來霉素+尼達尼布、鹽水對照、博來霉素+吡非尼酮、博來霉素。

本發明發現在急性肺損傷和纖維化肺組織中dio2水平上調，dio2是一個可催化t4轉換為活性成分t3的活化酶。在某些情況下，給與t4可導致肺組織中甲狀腺素水平上調。

本研究顯示缺少甲狀腺激素會加劇肺纖維化，局部霧化吸入甲狀腺激素可減輕肺急性損傷和纖維化動物模型中的疾病進程。這些結果支持霧化給與甲狀腺激素有可能治療急性肺損傷和纖維化肺部疾病的病人。結果顯示，靶向在受損的肺中給與甲狀腺激素及其藥學上可接受的鹽或前藥可以有效減輕或完全阻止纖維化過程。

如本文所報道的，動物學研究包括在博來霉素引起的小鼠損傷模型中，在疾病發展的不同時間點多次吸入t4至受損肺組織有利于疾病治愈。在預防實驗中，t4在博來霉素誘導后第3天到第七天后給藥可有效抑制肺纖維化。在治療實驗中，t4在博來霉素誘導后第10天開始給藥，隔天給藥，在第21天取樣檢測，對肺纖維化有治療作用。

在某些情況下，dio2表達增加的特發性肺纖維化病人給與t4激素可治療或預防纖維化進程。這一結果發現了這些病人在甲狀腺素治療后可能獲益最大。本發明提供了如何選擇特定的特發性肺纖維化病人群體有可能在甲狀腺素治療中獲益的一種方法。

通過上述試驗研究發現：(1)dio2表達在肺病病變中顯著改變。該基因編碼的蛋白主要是負責把原thrtt4轉化為活性thrtt3。(2)dio2基因敲除和thrt抑制藥物處理能夠促進老鼠肺纖維化。(3)注射thrt在兩種動物肺纖維化模型中均顯示可阻止和逆轉肺纖維化。(4)霧化吸入活性thrt(甲狀腺激素)更為有效阻止和逆轉肺纖維化。(5)thrt處理促進肺泡上皮細胞發育成熟和細胞膜完整性，防止細胞損傷和蛋白滲出。(6)thrt處理調節肺泡上皮細胞表面蛋白合成，儲存和分泌，減少細胞脅迫。(7)t3處理實驗表明thrt顯著增加肺泡腔內液體清除率(80％)和肺泡上皮ii型細胞的鈉泵活性(60％)。(8)t3治療恢復原代肺泡上皮細胞損傷導致的線粒體異常。

所有結果顯示，提高肺組織thrt水平可以有效地保護肺泡上皮細胞，調節肺泡上皮細胞表面蛋白合成、儲存和分布，促進肺泡上皮細胞成熟、分化和細胞完整性，有利于肺內積液的清除，促進肺泡上皮細胞內受損線粒體恢復，增強線粒體生物合成，從而有利于受損肺組織修復，阻止和逆轉肺纖維化，調節免疫反應，改變癌化環境，達到防治肺部疾病、改善氣體交換等肺功能，達到治療效果。總之，本發明為急性肺損傷和肺纖維化疾病治療找到有效治療的新方法。

以上所述實施例僅表達了本發明的幾種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對本發明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發明的保護范圍。因此，本發明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。