專利名稱：：苦瓜葉提取物及其在化妝品中的應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及化妝品工業，特別涉及的是一種苦瓜葉提取物的制備及其在化妝品中的應用，具體地說是苦瓜葉經提取、純化后得到苦瓜葉提取物并作為防腐抑菌劑應用于化妝品中，亦可作為祛痘或美白祛斑劑應用到化妝品中。
背景技術：
：化妝品是一種日用消費品，它包括護膚膏霜、護膚乳液、潔膚膏霜、潔膚乳液、化妝水、濕巾、面膜及洗發水等。這些化妝品的原料大同小異，原料大多數為石油加工的副產品，安全性和功效性有限。目前，人們為了保護和改善自己的皮膚和頭發，提高產品的安全性，紛紛把具有保健作用的植物性原料添加到化妝品中，希望通過加入這些有效成分，挺高化妝品的安全性，并且在用化妝品清潔和護理的同時，起到更好的消炎抑菌、美白祛斑的功效。
發明內容苦瓜(Mo"/orafcac/2"ra"&a丄.)為葫戸科苦瓜屬一年生蔓性草本植物，又名涼瓜、癩瓜、癩葡萄和錦蒸枝等，是一種藥食同源植物，其葉大，腎狀圓形，長寬各約5-12cm，通常5-7深裂，裂片卵狀橢圓形，基部收縮，邊緣具波狀齒，兩面近于光滑或有毛；葉柄長3-6cm。苦瓜葉可入藥，《本草綱目》記載"葉曬干為末，治一切丹火毒氣，金瘡結毒、脂麻疔、大疔，痛不可忍、胃氣疼、滾湯、目疼，燈草湯下子苦寒無毒，可益氣壯陽"。經研究發現，經提取、純化的苦瓜葉提取物具有防腐抑菌、祛痘和抑制黑色素生成的功效。因此，本發明提供了一種苦瓜葉提取物，先將苦瓜葉洗凈去雜、干燥后進行機械研磨粉碎，制成苦瓜葉粉；再將苦瓜葉粉放入以水和乙醇制得的混合溶劑中加熱萃取；溶劑萃取出的組分經色譜法或分餾法進一歩純化、分離得到產品。所述苦瓜葉的粉碎粒度為1(Him—500^im;溶劑的配置比例為水乙醇1:l一l:19;苦瓜葉與溶劑的比例為1:5—1:40;萃取的溫度保持在攝氏35i:—10(rC之間；時間掌握在8—24小時之間；純化分離具體措施為噴霧干燥、冷凍干燥等。上述所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應用，將苦瓜葉提取物作為植物活性添加劑應用到化妝品中，苦瓜葉提取物的添加量為化妝品的0.1—30%。上述的苦瓜葉提取物是作為防腐抑菌劑應用到化妝品中的。上述的苦瓜葉提取物是作為祛痘物質應用到化妝品中的。上述的苦瓜葉提取物是作為美白祛斑劑應用到化妝品中的。上述所述的化妝品為護膚膏霜、護膚乳液、潔膚膏霜、潔膚乳液、化妝水、濕巾、面膜或洗發水其中之一。本發明通過將具有防腐抗菌、祛痘、美白祛斑功效的苦瓜葉中的有效物質提取出來，經分離純化后添加到各種化妝品中。進一步提高化妝品的效果，并充分利用了苦瓜葉中的生物活性物質。具體實施例方式苦瓜葉有效物質的提取-將苦瓜葉5公斤清洗并晾干，5(TC烘干后粉碎，過40目篩，然后加入10公斤60%的乙醇，6(TC水浴回流提取三次，每次4小時，合并濾液，低于5(TC濃縮后，得苦瓜葉提取液1.0-1.5公斤，提取液可進行進一步純化。本發明所述苦瓜葉提取物具有下述的功效試驗一抑菌功效采用金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和粉刺丙酸桿菌作為代表菌，檢測本藥物組合物的抑菌作用。將濾紙制成(^5mm的紙片，高壓滅菌后備用，用鑷子將滅菌后的濾紙片放入含苦瓜葉提取物的溶液中，浸泡30分鐘后取出晾干，用吸管吸取各種菌懸液0.1mL于無菌平皿中，然后倒入已冷卻的滅菌培養基15mL，充分混勻后水平放置，因供試菌株的不同，所用培養基種類也不同，待培養基冷凝后，將含苦瓜葉提取物的紙片貼于平板上，以無菌水作為對照，放入培養箱中37'C下細菌培養24h、真菌培養48h。按時取出，用卡尺測定抑菌圈直徑，以上操作均在超凈工作臺上完成，結果見表l。苦瓜葉提取液稀釋度菌種-原液1:21:41:8金黃色葡萄球菌21181512大腸桿菌25242113粉刺丙酸桿菌29262320實驗證明，苦瓜葉提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和粉刺丙酸桿菌均有很好的抑制作用，說明苦瓜葉提取物是一種抑菌效果明顯的天然植物防腐劑。試驗二祛痘功效1.治療方案將面部出現痘點，并反復出現，長期不愈者作為治療對象，將苦瓜葉提取物與護膚霜基質混合，按照護膚霜的生產方法制成護膚霜，治療對象每天涂抹加入苦瓜葉提取物1.010.0%的護膚霜早晚各一次。2.治療評定標準(1)治愈痘點消失，痘點不再出現；(2)顯效痘點基本消失；(3)有效痘點有不同程度的減少、減輕或減弱；(4)無效癥狀無任何改善，甚至有加重趨勢。3.本發明治療痘癥106人，其中男56人，女50人，年齡為15—30歲，按上述方案敷用添加苦瓜葉提取物的護膚霜，每天早晚各一次，7天后統計療效，如下<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>上表表明，本發明用于治療青少年痘癥療效極佳，療效高達98.11%，而且治療時間短，使用方便。同時，在臨床測試中，均未發現任何反應，使用用非常安全，性能穩定可靠。試驗三抑制B16小鼠黑色素瘤細胞內酪氨酸酶活性實驗方法:將培養的B16小鼠黑色素瘤細胞活化配制成單個細胞懸液后，以lxl()S個/ml細胞密度接種于6孔板，將6孔板放入C02培養箱，在37"C、5%C02及飽和濕度條件下，培養24小時后添加含苦瓜提取物的培養液2ml，72小時后收集細胞。用離心機以1000r/min轉速離心5min，用磷酸緩沖液(pH6.8)洗2次，加入磷酸緩沖液(pH6.8)制成細胞懸液，計數細胞密度后，調整細胞密度為lxl(^個/ml，取lml細胞懸液離心后去上清液，加入l%TritonX-100(用pH7.4的磷酸緩沖液配制)lml，迅速放入-80。C冰箱冷凍，30min后取出在37。C溶解，加入5mM的L-3，4-二羥基苯丙氨酸(L-DOPA)2ml。調節紫外分光光度計的波長為A475，測定即時反應的吸光度值，再置于37-C條件下30min后測定吸光度值，用L-3，4-二羥基苯丙氨酸(L-DOPA)的自身氧化作參比，用曲酸作為陽性對照，實驗重復3次。根據以下公式計算酶抑制率=[(A—B)_(C—D)]+(A—B)其中A:陰性對照組30min后475nm處吸光度值；B:陰性對照組即時475nm處吸光度值；C:受試物組30min后475nm處吸光度值；D:受試物組即時475nm處吸光度值。實驗數據經統計后顯示31.25250pg/ml的苦瓜提取物對活體B16小鼠黑色素瘤細胞酪氨酸酶活性和細胞內黑色素含量具有抑制作用，酪氨酸酶抑制率為9.85~83.74%，且對酪氨酸酶活性的抑制作用隨濃度增加而增加，并呈劑量依賴性(P<0.05)。見表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>人的膚色是由皮膚內的黑色素密度和分布來決定的，現在化妝品中主要使用的美白機理為抑制酪氨酸酶活性機理，如熊果苷、曲酸就是這類美白劑。在黑素細胞內，酪氨酸在酪氨酸酶的作用下轉化為多巴、多巴醌和多巴色素等，并最終轉變為黑色素，再從黑素細胞分泌到鄰近的角質形成細胞中，從而使膚色改變或形成色斑，而酪氨酸酶是黑色素形成的關鍵酶，通過抑制酪氨酸酶活性，阻斷黑色素的合成反應鏈，降低黑色素的形成從而達到美白祛斑的效果，本發明所述的苦瓜葉提取物具有抑制酪氨酸酶活性和黑素生成的作用，因此苦瓜葉提取物可作為美白祛斑劑應用于化妝品中。試驗四大鼠急性經皮毒性試驗采用最大限量法。設5000mg/kg—個劑量組，20只SD大鼠，雌雄各半。備皮減去大鼠脊柱兩側的被毛，去毛面積4X4cm2。24小時后確認無皮膚損傷，以lml/100gbw將該劑量組苦瓜液提取物溶液滴于6層紗布上，貼敷于已去毛的皮膚上，覆蓋稱量紙，膠布固定。4h后取下紗布，洗去殘留物，觀察其中毒癥狀、體征，連續觀察兩周，判定其毒性分類。苦瓜葉提取物5g/kg*bw劑量經皮染毒后，兩周內未見動物死亡，亦無明顯的中毒癥狀和不良反應，結果見表3。兩周實驗結束后剖殺全部動物，內臟器官未見明顯異常改變，即苦瓜葉提取物對雌、雄SD大鼠的急性經皮MTD大于5g/kgbw，屬實際無毒類。表3苦瓜葉提取物對SD大鼠的急性經皮毒性實驗結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>根據上述試驗結果可以得出如下結論，苦瓜葉提取物作為防腐抗菌劑使用時添加比例掌握在0.15.0%范圍內；作為祛痘劑使用時添加比例掌握在1.0~10.0%范圍內；作為祛斑美白劑使用時添加比例掌握在1.0~30.0%范圍內。下面舉例對本發明產品做更詳細的描述實施例1-按1.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與洗滌用品基質混合，按照洗滌用品的生產方法制成洗滌用品，即得具有祛痘、美白祛斑功效的洗滌用品，這些洗滌用品可以是潔面乳液、潔面膏霜。實施例2:按5.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與化妝水基質混合，按照化妝水的生產方法制成化妝水，即得具有祛痘、美白祛斑功效的化妝水。實施例3:按10.0。/。的添加量，將苦瓜提取液加入濕巾中，即得具有祛痘、美白祛斑功效的濕巾。實施例4:按20.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與面膜基質混合，按照面膜的生產方法制成面膜，即得具有祛痘、美白祛斑功效的面膜。實施例5:按30.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與護膚品基質混合，按照護膚品的生產方法制成護膚品，即得具有祛痘、美白祛斑功效的護膚品，這些護膚品包括護膚膏霜、護膚乳液。實施例6:按0.3%的添加量，將苦瓜葉提取物與洗滌用品基質混合，按照洗滌用品的生產方法制成洗滌用品，即得具有一定保質期的洗滌用品，這些洗滌用品可以是洗手液、沐浴液、潔面乳液、潔面膏霜。實施例7:按0.4%的添加量，將苦瓜葉提取物與化妝水基質混合，按照化妝水的生產方法制成化妝水，即得具有一定保質期的化妝水。實施例8:按0.6%的添加量，將苦瓜提取液加入濕巾中，即得具有一定保質期的濕巾。實施例9:按0.8%的添加量，將苦瓜葉提取物與面膜基質混合，按照面膜的生產方法制成面膜，即得具有一定保質期的面膜。實施例10:按1.0%的添加量，將苦瓜葉提取物與護膚品基質混合，按照護膚品的生產方法制成護膚品，即得具有一定保質期的護膚品，這些護膚品包括護膚膏霜、護膚乳液。權利要求1.一種苦瓜葉提取物，其特征在于先將苦瓜葉洗凈去雜、干燥后進行機械研磨粉碎，制成苦瓜葉粉；再將苦瓜葉粉放入以水和乙醇制得的混合溶劑中加熱萃取；溶劑萃取出的組分經色譜法或分餾法進一步純化、分離得到產品。2.根據權利要求1所述的苦瓜葉提取物，其特征在于所述苦瓜葉的粉碎粒度為10nm—500^im;溶劑的配置比例為水乙醇1:19;苦瓜葉與溶劑的比例為l:5—1:40;萃取的溫度保持在攝氏35t:—10(TC之間；時間掌握在8—24小時之間；純化分離具體措施為噴霧干燥或冷凍干燥。3.—種如權利要求1或2所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應用，其特征在于所述的苦瓜葉提取物作為植物活性添加劑應用到化妝品中，苦瓜葉提取物的添加量為化妝品的0.1—30%。4.根據權利要求3所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應用，其特征在于苦瓜葉提取物作為防腐抑菌劑應用到化妝品中。5.根據權利要求3所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應用，其特征在于苦瓜葉提取物作為祛痘物質應用到化妝品中。6.根據權利要求3所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應用，其特征在于苦瓜葉提取物作為美白祛斑劑應用到化妝品中。7.根據權利要求3所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應用，其特征在于所述化妝品為護膚膏霜、護膚乳液、潔膚膏霜、潔膚乳液、化妝水、濕巾、面膜或洗發水其中之一。全文摘要本發明公開了一種苦瓜葉提取物，先將苦瓜葉洗凈去雜、干燥后進行機械研磨粉碎，制成苦瓜葉粉；再將苦瓜葉粉放入以水和乙醇制得的混合溶劑中加熱萃取；溶劑萃取出的組分經色譜法或分餾法進一步純化、分離得到產品。所述的苦瓜葉提取物在化妝品中的應用是將所述的苦瓜葉提取物作為植物活性添加劑應用到化妝品中，苦瓜葉提取物的添加量為化妝品的0.1-30％，可以作為防腐抑菌劑、祛痘物質或美白祛斑劑應用到化妝品中。文檔編號A61Q19/06GK101336880SQ20081014731公開日2009年1月7日申請日期2008年8月7日優先權日2008年8月7日發明者竹溫,征閆,黃正梅申請人:北京昂立達技術有限責任公司