對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法，將目的Sm單抗用碳酸氫鈉包被緩沖液，以1:5的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)?-5攝氏度濕盒過(guò)夜；然后用百分之二十以上的脫脂牛奶對(duì)其進(jìn)行封閉，時(shí)間不少于2小時(shí)；振蕩洗滌；過(guò)濾；輕咬振蕩，直至噬菌體全部結(jié)合；篩選未結(jié)合的噬菌體，將其吸出，并棄去；滴入酸堿中和液，對(duì)洗脫液進(jìn)行滴度測(cè)定；上述步驟反復(fù)三次；計(jì)算每一輪免疫篩選后噬菌體的回收率即可；過(guò)濾的時(shí)候，需要輕取輕放，用三層紗布進(jìn)行；所述酸堿中和液在使用前需要在零下四度的冰柜中進(jìn)行預(yù)冷。本發(fā)明的有益效果是：操作簡(jiǎn)單，成本較低，可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選，重復(fù)操作性強(qiáng)，篩選精確。
【專(zhuān)利說(shuō)明】對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生化實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域，具體涉及一種對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法。
【背景技術(shù)】 [0002]紅斑狼瘡為全身性、慢性進(jìn)行性反復(fù)發(fā)作和緩解的典型自身免疫性結(jié)締組織病之一。女性發(fā)病多，可侵犯全身多臟器，免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展使早期輕型和不典型的病例能及時(shí)診治，因此除少數(shù)重癥或重要器官受損者外，有些病例可自行緩解，有些只呈一過(guò)性發(fā)作，經(jīng)數(shù)月或短暫病程后，癥狀完全消失。治療上由于合理應(yīng)用皮質(zhì)類(lèi)固醇激素、免疫調(diào)節(jié)劑、血漿交換療法、中西醫(yī)結(jié)合等，紅斑狼瘡患者的十年存活率已達(dá)85%。近年有人認(rèn)為本病為一病譜性疾病，其兩極為局限性盤(pán)狀紅斑狼瘡和系統(tǒng)性紅斑狼瘡，中間為亞急性皮膚型紅斑狼瘡和深部紅斑狼瘡，二者均可向兩端演變。LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱(chēng)，生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來(lái)預(yù)培養(yǎng)菌種，使菌種成倍擴(kuò)增，達(dá)到使用要求.培養(yǎng)的菌種一般是經(jīng)過(guò)改造的無(wú)法在外界環(huán)境單獨(dú)存活和擴(kuò)增的工程菌.通過(guò)培養(yǎng)工程菌，我們可以表達(dá)大量的外源蛋白，也可以拿到帶有外源基因的質(zhì)粒，工程菌的有效擴(kuò)增是生化分子實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于，針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)缺陷，提供一種技術(shù)方案:
對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法，將目的Sm單抗用碳酸氫鈉包被緩沖液，以1:5的比例進(jìn)行
稀釋?zhuān)?-5攝氏度濕盒過(guò)夜；然后用百分之二十以上的脫脂牛奶對(duì)其進(jìn)行封閉，時(shí)間不少于2小時(shí)；振蕩洗漆；過(guò)濾；輕咬振蕩，直至?xí)窬w全部結(jié)合；篩選未結(jié)合的曬菌體，將其吸出，并棄去；滴入酸堿中和液，對(duì)洗脫液進(jìn)行滴度測(cè)定；上述步驟反復(fù)三次；計(jì)算每一輪免疫篩選后噬菌體的回收率即可。
[0004]本發(fā)明中，過(guò)濾的時(shí)候，需要輕取輕放，用三層紗布進(jìn)行。
[0005]本發(fā)明中，所述酸堿中和液在使用前需要在零下四度的冰柜中進(jìn)行預(yù)冷。
[0006]本發(fā)明的有益效果是:操作簡(jiǎn)單，成本較低，可以準(zhǔn)確進(jìn)行篩選，重復(fù)操作性強(qiáng)，篩選精確。
【具體實(shí)施方式】
[0007]對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法，將目的Sm單抗用碳酸氫鈉包被緩沖液，以1:5的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)?-5攝氏度濕盒過(guò)夜；然后用百分之二十以上的脫脂牛奶對(duì)其進(jìn)行封閉，時(shí)間不少于2小時(shí)；振蕩洗漆；過(guò)濾；輕咬振蕩，直至?xí)窬w全部結(jié)合；篩選未結(jié)合的曬菌體，將其吸出，并棄去；滴入酸堿中和液，對(duì)洗脫液進(jìn)行滴度測(cè)定；上述步驟反復(fù)三次；計(jì)算每一輪免疫篩選后噬菌體的回收率即可，過(guò)濾的時(shí)候，需要輕取輕放，用三層紗布進(jìn)行，所述酸堿中和液在使用前需要在零下四度的冰柜中進(jìn)行預(yù)冷。
[0008]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法，其特征在于，將目的Sm單抗用碳酸氫鈉包被緩沖液，以1:5的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)?-5攝氏度濕盒過(guò)夜；然后用百分之二十以上的脫脂牛奶對(duì)其進(jìn)行封閉，時(shí)間不少于2小時(shí)；振蕩洗漆；過(guò)濾；輕咬振蕩，直至?xí)窬w全部結(jié)合；篩選未結(jié)合的曬菌體，將其吸出，并棄去；滴入酸堿中和液，對(duì)洗脫液進(jìn)行滴度測(cè)定；上述步驟反復(fù)三次；計(jì)算每一輪免疫篩選后噬菌體的回收率即可。
2.如權(quán)利要求1所述的對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法，其特征在于，過(guò)濾的時(shí)候，需要輕取輕放，用三層紗布進(jìn)行。
3.如權(quán)利要求1所述的對(duì)噬菌體肽庫(kù)的篩選方法，其特征在于，所述酸堿中和液在使用前需要在零下四度的冰柜中進(jìn)行預(yù)冷。
【文檔編號(hào)】C40B50/06GK103614780SQ201310539950
【公開(kāi)日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月5日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月5日
【發(fā)明者】辛竹 申請(qǐng)人:辛竹