本發明屬于納米材料及其制備領域，特別涉及納米多孔金顆粒及其制備方法。

背景技術：

多孔材料因具有高比表面積、低密度、滲透性好、導電性高等特性在針對有機催化、生物大分子檢測、藥物與基因載體、生物傳感等方面有著廣闊的應用前景與巨大的潛在價值。金作為典型的貴金屬材料，因具有良好的穩定性、生物相容性以及獨特的催化特性，在針對有機催化、藥物與基因載體、生物傳感、癌癥治療等方面有著廣闊的應用前景與巨大的潛在價值。多孔納米金是一種具有納米級孔和骨架的貴金屬材料，其不僅具有多孔材料的豐富特性以及納米材料特有的小尺寸效應、量子尺寸效應、量子隧道效應等特性，同時也具有貴金屬金的熒光增強、生物相容以及催化等特性，使得它能夠應用于藥物輸送和可控釋放等領域。納米多孔金顆粒及其的合成引了科學家們的廣泛關注。目前主要基于脫合金法(NanoLett.2007,7:1764-1769)、電化學法(Nano Lett.2008,8:2265-2270)、模板法(Nano Lett.2015,15,：4448-4454)制備納米多孔金顆粒。但是，這些方法其制備過程皆比較復雜、條件苛刻、成本高；其次，材料本身穩定性差、生物相容性差且在體內可降解性差，代謝周期長；最后，這些方法均難得到金屬組成成分較單一且均勻的晶體，這些都極大的限制了多孔納米金的應用。因此，我們研究了一種利用脂質體作為生物模板來制備形貌可控、尺寸可協調、孔徑可調節的多孔納米金的簡易方法。這種生物模板法和傳統的制備方法相比，一方面其制備方法簡易、耗時短、耗材少、需控制的復雜因素少，無傳統的模板法以及去合金法后期的火焰燒結以及化學腐蝕等步驟。另一方面，它借助脂質體這種生物模板，增加其生物相容性以及膠體穩定性，同時避免了由其他無機模板、表面活性劑或穩定劑所引起的高細胞毒性。

技術實現要素：

本發明的目的是提供一種納米多孔金顆粒；

本發明的另一個目的是提供一種納米多孔金顆粒的制備方法；

納米多孔金顆粒具有如下特征：

(1)內部為脂質體膜，外層是多孔金；

(2)具有均一的尺寸，粒徑為120～130nm；

(3)具有孔徑均一的孔，孔徑尺寸為30～40nm；

一種納米多孔金顆粒的制備方法，其特征在于，該制備方法借助二棕櫚酰磷脂酰膽堿和二油酰磷脂酰乙醇胺通過旋蒸、真空干燥、超聲水化、過膜后形成的脂質體為生物模板，在其表面利用鹽酸羥胺一步還原氯金酸，去離子水洗兩遍去除殘留溶劑后，即得到納米多孔金顆粒。

進一步，脂質體生物模板法包括如下步驟：首先將二棕櫚酰磷脂酰膽堿和二油酰磷脂酰乙醇胺與膽固醇溶液均勻分散于氯仿中，旋轉蒸發去除溶劑則形成脂質體生物膜，室溫下真空干燥，去除殘留溶劑，隨后加入磷酸鹽緩沖溶劑進行水化，60～65℃下超聲、過膜，制備得到脂質體膜；隨后再將上述的脂質體溶液加入到的多孔金生長液中，以所述的脂質體膜為模板，借助所述的多孔金生長液，使得脂質體膜表面沉積生成納米多孔金顆粒，去離子水洗后，離心即得到納米多孔金顆粒。

進一步，所述的多孔金生長液的組分包括K₂CO₃、HAuCl₄和鹽酸羥胺。

進一步，所述的二棕櫚酰磷脂酰膽堿、油酰磷脂酰乙醇胺、膽固醇的濃度分別為:3.6～4.4mg/mL、0.16～0.24mg/mL、1.2mg/mL，K₂CO₃、HAuCl₄和鹽酸羥胺的濃度為：10mg/mL、0.16mg/mL、0.3mg/mL。

進一步，所述的分散在室溫下進行；

和/或，所述的超聲是在水相中進行；所述的超聲功率為300W；超聲時間為30～40min；

和/或，所述的過膜所用的膜孔徑為0.22μm的水膜；

和/或，所述的避光攪拌的轉速為300r/s；

和/或，所述的離心的轉速為11000r/s。

進一步，旋轉蒸發是在40℃下進行的，所在的體系為水相，旋轉時間為20min。所述的室溫下真空干燥是在真空恒溫干燥箱中進行，設定溫度為25℃，時間為10～12h。

本發明的納米多孔金顆粒的制備方法是按照以下步驟進行：

(1)18～22mg二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、0.8～1.2mg油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)和6mg膽固醇溶于5mL氯仿溶劑中，搖晃均勻。于100mL圓底燒瓶中，40℃下，旋轉蒸發20～30分鐘去除溶劑。在室溫下真空干燥10～12小時，去除殘留溶劑。然后再加入10mLPBS，選擇在50～60℃，即脂質體膜相變溫度之上進行水化，功率為300W，水浴條件下超聲30～40分鐘，后得到澄清透明的脂質體溶液。用0.22μm的微孔過濾水膜過濾，在4℃冰箱保存。

(2)取5mL步驟(1)得到的脂質體溶液，加入0.25mL的碳酸鉀，60～100μL氯金酸，10μL鹽酸羥胺，避光下，300r/s攪拌4小時，去離子水洗后，11000r/s離心后即得到納米多孔金顆粒。

本發明的納米多孔金顆粒的制備方法是以脂質體的為生物模板制備的。該納米多孔金顆粒的制備方法和傳統的制備方法相比，一方面其制備方法簡易、耗時短、耗材少、需控制的復雜因素少，無傳統的模板法以及去合金法后期的火焰燒結以及化學腐蝕等步驟。另一方面，它借助脂質體這種生物模板，增加其生物相容性以及膠體穩定性，同時避免了由其他無機模板、表面活性劑或穩定劑所引起的高細胞毒性。本發明的納米多孔金顆粒內部為脂質體膜，外層是多孔金，具有均一的粒徑、均一的孔徑尺寸和高比表面積。

附圖說明

圖1：本發明實施例1的TEM圖。

圖2：本發明實施例1的MTT細胞毒性測試數據柱狀圖。

具體實施方式

實施例1

(1)18mgDPPC、0.8mgDOPE和6mg膽固醇溶于5mL氯仿溶劑中，搖晃均勻。于100mL圓底燒瓶中，40℃下，旋轉蒸發20分鐘去除溶劑。在室溫下真空干燥10小時，去除殘留溶劑。然后再加入10mLPBS，在60℃，功率為300W，水浴條件下超聲30分鐘，后得到澄清透明的脂質體溶液。用0.22μm的微孔過濾水膜過濾，在4℃冰箱保存。

(2)取5mL步驟(1)得到的脂質體溶液，加入0.25mL的碳酸鉀，60μL氯金酸，10μL鹽酸羥胺，避光下，300r/s攪拌4小時，去離子水洗后，11000r/s離心后即得到納米多孔金顆粒。

所得到的納米多孔金顆粒的平均粒徑為122nm，平均孔徑為27nm，最大吸收波長為805nm。

實施例2

(1)20mgDPPC、1mgDOPE和6mg膽固醇溶于5mL氯仿溶劑中，搖晃均勻。于100mL圓底燒瓶中，40℃下，旋轉蒸發20分鐘去除溶劑。在室溫下真空干燥11小時，去除殘留溶劑。然后再加入10mLPBS，在62℃，功率為300W，水浴條件下超聲35分鐘，后得到澄清透明的脂質體溶液。用0.22μm的微孔過濾水膜過濾，在4℃冰箱保存。

(2)取5mL步驟(1)得到的脂質體溶液，加入0.25mL的碳酸鉀，80μL氯金酸，10μL鹽酸羥胺，300r/s避光下攪拌4小時，去離子水洗后，11000r/s離心后即得到納米多孔金顆粒。

所得到的納米多孔金顆粒的平均粒徑為123nm，平均孔徑為26nm。

實施例3

(1)22mgDPPC、1.2mgDOPE和6mg膽固醇溶于5mL氯仿溶劑中，搖晃均勻。于100mL圓底燒瓶中，40℃下，旋轉蒸發20分鐘去除溶劑。在室溫下真空干燥12小時，去除殘留溶劑。然后再加入10mLPBS，在65℃，功率為300W，水浴條件下超聲35分鐘，后得到澄清透明的脂質體溶液。用0.22μm的微孔過濾水膜過濾，在4℃冰箱保存。

(2)取5mL步驟(1)得到的脂質體溶液，加入0.25mL的碳酸鉀，100μL氯金酸，10μL鹽酸羥胺，避光下，300r/s攪拌4小時，去離子水洗后，11000r/s離心后即得到納米多孔金顆粒。

所得到的納米多孔金顆粒的平均粒徑為129nm，平均孔徑為23nm。