專利名稱：抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗植物真菌病害的化合物，特別是涉及一種抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物。

背景技術(shù)：
補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)以及化學(xué)合成的類似物，對(duì)蘋果腐爛病菌、蘋果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等多種常見植物病害具有很好的抑菌活性。上述植物病害對(duì)我國的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)危害嚴(yán)重，據(jù)專家報(bào)道我國每年因蘋果輪紋病危害造成直接經(jīng)濟(jì)損失就達(dá)30億到50億元人民幣；水稻稻瘟病，是全世界稻區(qū)危害最嚴(yán)重的水稻病害之一，一般造成水稻減產(chǎn)10％～20％，以我國為例，20世紀(jì)90年代以來，該病的年發(fā)生面積均在380萬hm2以上，年損失稻谷達(dá)數(shù)億千克。
目前，化學(xué)農(nóng)藥的使用仍是防治上述植物病害行之有效的措施，但因一些常規(guī)品種的長期使用使病原菌產(chǎn)生抗藥性，致使田間用藥量逐年加大，對(duì)人類健康和生態(tài)環(huán)境造成極大危害。因此，高效、低毒、低殘留、與環(huán)境友善同時(shí)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)新農(nóng)藥品種的創(chuàng)制迫在眉睫。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種天然有效成分-補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)，可以將其作為先導(dǎo)化合物為新藥的創(chuàng)制提供理論依據(jù)。同時(shí)，以補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)作為先導(dǎo)化合物創(chuàng)制新藥可以把植物農(nóng)藥和化學(xué)農(nóng)藥的優(yōu)點(diǎn)集于一身，是國內(nèi)外農(nóng)藥創(chuàng)制的熱點(diǎn)之一。
本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的 抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物，本發(fā)明化合物是干燥補(bǔ)骨脂種子5Kg，用70％工業(yè)乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加適量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)(21mg)和異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)(17mg)。
所述的抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物，其補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)，黃色粉末；分子式C21H20O4；ESIMSm/z339.2[M+H]+；HNMR(CDCl3)d1.77(3H，S，H-5″)，1.78(3H，S，H-4″)，3.48(2H，d，J＝7.4Hz，H-1″)，5.29(1H，br t，J＝8.4Hz，H-2″)，6.42(1H，s，H-3)，6.88(2H，d，J＝8.7Hz，H-3′，5′)，7.47(1H，d，J＝15.6Hz)，7.55(2H，d，J＝3Hz，H-2′，6′)，7.59(1H，S，H-6)，7.85(1H，d，J＝15.3Hz)，6.08(OH，br s)，13.88(OH，s)。13CNMR(CDCl3)d17.6(C-4″)，21.5(C-5″)，25.5(C-1″)，53.8(4-OMe)，107.1(C-3)，113.4(C-1)，115.8(C-3′，5′)，115.4(C-b)，117.4(C-5)，121.9(C-2″)，126.5(C-1′)，128.8(C-6)，130.3(C-2′，6′)，132.1(C-3″)，143.9(C-c)，159.5(C-4′)，161.8(C-2)，163.6(C-4)，192.1(C-a)。
補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)結(jié)構(gòu)式
所述的抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物，其異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)，黃色針晶，mp160～161℃；TLC檢查為黃色斑點(diǎn)。1HNMR1.77(3H，s，CH3)，1.81(3H，s，CH3)，3.22(2H，d，J＝6.1Hz)，5.28(1H，br t，J＝6.9Hz)，6.88(2H，d，J＝8.9Hz)，7.55(2H，d，J＝9.1Hz)，7.85(1H，d.J＝15.3Hz)；7.55(1H，d，J＝15.6Hz)，6.44(1H，d，J＝8.7Hz)，7.75(1H，d，J＝8.4Hz)，13.89(1H，s)； 異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)結(jié)構(gòu)式
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)與效果是 補(bǔ)骨脂查爾酮、異補(bǔ)骨脂查爾酮作為農(nóng)用殺菌劑具有以下優(yōu)勢(shì) 1.補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)是天然有效成分，本身作為農(nóng)用殺菌劑具有高效、低毒、低殘留、不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)。
2.藥效高。補(bǔ)骨脂查爾酮、異補(bǔ)骨脂查爾酮、福美胂、銀泰、甲基托布津、多菌靈6種原藥對(duì)蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用EC50分別為0.87、0.36、8.93、26.18、9.16、1.47mg/L，EC90分別為6.72、4.25、128.98、93.37、147.85、26.86mg/L。可見，補(bǔ)骨脂查爾酮、異補(bǔ)骨脂查爾酮的抑菌活性高于防治蘋果腐爛病菌的其它藥劑。
3.殺菌譜廣。補(bǔ)骨脂查爾酮、異補(bǔ)骨脂查爾酮對(duì)蘋果腐爛病菌、蘋果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等多種常見植物病害均具有很好的抑制活性。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明涉及的化合物包括補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)、異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)以及化學(xué)合成的類似物，對(duì)蘋果腐爛病菌(Valsa mali)，蘋果輪紋病菌(Physalospora piricola)，水稻稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)，水稻紋枯病菌(Rhizoctonia solani Kuhn)，黃瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)，小麥赤霉病菌(Gibberellazeae)，黃瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)等多種植物病原菌具有很好的抑制活性。
本發(fā)明化合物是干燥補(bǔ)骨脂種子5Kg，用70％工業(yè)乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加適量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)(21mg)和異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)(17mg)。
實(shí)例1用丙酮或二甲基亞砜將補(bǔ)骨脂查爾酮溶解配成10g/L的粗提物母液。加入適量粗提物母液于50℃的PDA培養(yǎng)基中，充分混勻，配成粗提物終濃度分別為0.12mg/L、0.6mg/L、3mg/L、15mg/L、75mg/L的含藥培養(yǎng)基，以等體積的丙酮或二甲基亞砜加入到PDA培養(yǎng)基中作對(duì)照，然后倒入直徑90mm培養(yǎng)皿內(nèi)制成平板，備用。用直徑6mm的打孔器從事先在PDA平板上28℃下培養(yǎng)7～12d的各供試病菌菌落邊緣處切取菌餅，并移植于上述含不同濃度的粗提物平板和對(duì)照平板中央，每次處理重復(fù)3次，置28℃下培養(yǎng)7～12d，測(cè)量菌落直徑。每菌落取相交垂直線方向測(cè)其直徑，以其均值減去菌餅直徑即得菌落凈生長直徑(CK)，相對(duì)抑制率(％)＝(對(duì)照凈生長量一處理凈生長量)/對(duì)照凈生長量×100。根據(jù)病菌抑制率等有關(guān)指標(biāo)，采用相應(yīng)的數(shù)據(jù)分析軟件，計(jì)算出EC50值及EC90值限。
補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)對(duì)幾種常見植物病原菌菌絲生長的抑制作用。
實(shí)例2試驗(yàn)方法同實(shí)例1，異補(bǔ)骨脂查爾酮對(duì)幾種常見植物病原菌菌絲生長的抑制作用如下 異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)對(duì)幾種植物病原菌菌絲生長的抑制作用。
實(shí)例3試驗(yàn)方法同實(shí)例1，補(bǔ)骨脂查爾酮、異補(bǔ)骨脂查爾酮、福美胂、銀泰、甲基托布津、多菌靈6種原藥對(duì)蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用如下 6種藥劑對(duì)蘋果腐爛病菌菌絲生長的抑制作用
權(quán)利要求
1.抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物，其特征在于該化合物是干燥補(bǔ)骨脂種子5Kg，用70％工業(yè)乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加適量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取；取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)21mg和異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)17mg。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物，其特征在于所述補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)，黃色粉末；分子式C21H20O4；ESIMSm/z 339.2[M+H]+；HNMR(CDCl3)d1.77(3H，S，H-5″)，1.78(3H，S，H-4″)，3.48(2H，d，J＝7.4Hz，H-1″)，5.29(1H，br t，J＝8.4Hz，H-2″)，6.42(1H，s，H-3)，6.88(2H，d，J＝8.7Hz，H-3′，5′)，7.47(1H，d，J＝15.6Hz)，7.55(2H，d，J＝3Hz，H-2′，6′)，7.59(1H，S，H-6)，7.85(1H，d，J＝15.3Hz)，6.08(OH，br s)，13.88(OH，s)。13CNMR(CDCl3)d17.6(C-4″)，21.5(C-5″)，25.5(C-1″)，53.8(4-OMe)，107.1(C-3)，113.4(C-1)，115.8(C-3′，5′)，115.4(C-b)，117.4(C-5)，121.9(C-2″)，126.5(C-1′)，128.8(C-6)，130.3(C-2′，6′)，132.1(C-3″)，143.9(C-c)，159.5(C-4′)，161.8(C-2)，163.6(C-4)，192.1(C-a)；
補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)結(jié)構(gòu)式
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物，其特征在于所述異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)VIII黃色針晶，mp160～161℃；TLC檢查為黃色斑點(diǎn)；1HNMR1.77(3H，s，CH3)，1.81(3H，s，CH3)，3.22(2H，d，J＝6.1Hz)，5.28(1H，br t，J＝6.9Hz)，6.88(2H，d，J＝8.9Hz)，7.55(2H，d，J＝9.1Hz)，7.85(1H，d.J＝15.3Hz)；7.55(1H，d，J＝15.6Hz)，6.44(1H，d，J＝8.7Hz)，7.75(1H，d，J＝8.4Hz)，13.89(1H，s)；
異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)結(jié)構(gòu)式
全文摘要
抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物，涉及一種化合物，特別是涉及一種抗植物真菌病害的補(bǔ)骨脂查爾酮類化合物。本發(fā)明化合物是干燥補(bǔ)骨脂種子5Kg，用70％工業(yè)乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加適量水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取。取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，用氯仿一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補(bǔ)骨脂查爾酮(bavachalcone)(21mg)和異補(bǔ)骨脂查爾酮(isobavachalcone)(17mg)。可以將其作為先導(dǎo)化合物為新藥的創(chuàng)制提供理論依據(jù)。同時(shí)，作為先導(dǎo)化合物創(chuàng)制新藥可以把植物農(nóng)藥和化學(xué)農(nóng)藥的優(yōu)點(diǎn)集于一身，是國內(nèi)外農(nóng)藥創(chuàng)制的熱點(diǎn)之一。
文檔編號(hào)C07C49/84GK101215229SQ20081001001
公開日2008年7月9日 申請(qǐng)日期2008年1月2日 優(yōu)先權(quán)日2008年1月2日
發(fā)明者關(guān)麗杰, 紅 邵, 蔡麗麗, 雙 邵, 李海燕 申請(qǐng)人:沈陽化工學(xué)院