專利名稱：一種高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法
技術領域：
本發明涉及天然產物有效成分的提取領域，具體地來說是一種高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的高效提取方法。
背景技術：
多糖是由多個單糖分子以糖苷鍵結合而成的天然大分子化合物，是構成生命的基本物質之一。近二十年來，隨著分子生物學和細胞生物學的發展，人們發現多糖具有多種生物學功能，多糖及其綴合物參與了細胞中的各種生命活動，如細胞特異性識別，組成細胞表面各種抗原和藥物的受體，激活免疫細胞等，因此，多糖研究引起了人們極大的興趣。多糖按其來源一般可分為真菌多糖、高等植物多糖、動物多糖、藻類多糖、細菌多糖等。其中食藥用真菌多糖和高等植物多糖在我國有著悠久的應用歷史，而且資源十分豐富，現已成為關注和研究的熱點。現代藥理學研究表明，這兩類多糖具有非常重要與特殊的生理活性，在促進機體免疫力、抗菌、抗病毒、抗寄生蟲、抗腫瘤、抗輻射、抗血栓、抗凝血、抗衰老、抗炎、降低血脂及改善動物生產性能等方面都有明確的作用。而且，大多數多糖沒有直接細胞毒性， 許多甚至可以長期服用。高等植物和食藥用真菌類活性多糖已成為目前最具發展前途的醫療保健資源之一。多糖的生物活性在很大程度上決定了多糖的利用價值。多糖的構成組分、構成方式及空間構象、多糖的分子量大小與分布范圍以及多糖的水溶性等是影響多糖生物活性的主要因素。大量的研究表明，活性多糖分子量大小是其具備生物活性的必要條件。活性多糖分子量越大，分子表觀體積越大，不利于多糖跨越多重細胞膜障礙進入生物體內發揮生物學活性。而多糖的水溶性是其發揮生物學活性的另一個重要條件。由于多糖的結構十分復雜，致使其合成異常困難，目前活性多糖全部由天然產物提取而得。高等植物多糖和食藥用真菌多糖就是從不同的植物或同種植物的不同部位以及食用真菌與藥用真菌的子實體、菌絲體與菌絲發酵液中提取分離而來。多糖的提取分離純化目前尚無公認、有效、統一的方法，現有的工藝一般可概括為水提法、酸提法、堿提法、鹽提法以及酶法輔助提取等。這些方法無論在多糖提取效率、生產過程的清潔性、能耗與物耗，還是在多糖活性控制等方面存在著明顯不足，所得多糖產品的科技含量也不高，具體表現在多糖物質純度低、水溶性差、分子量過于分散而難以得到均一組分等方面，制約了多糖的高附加值應用。具體地說，現有方法主要有以下問題水浸提法一般耗時長，能耗高、浸提溶劑使用量大、多糖提取率低；酸堿提取所用無機強酸、強堿的用量和反應時間都不好掌控，極易破壞多糖分子的活性，甚至會使多糖分解成分子量更小的色素分子，加重了后續的脫色工作。而且，在反應結束后還要對酸液堿液做到迅速中和或迅速透析，否則會造成產品污染，增加產品用于食品和醫藥保健品的不安全性。另外，使用不能降解的無機酸堿，大規模生產時容易造成嚴重的環境污染。酶法輔助提取中的酶一般價格昂貴，往往還存在容易失活，壽命短，純度不夠等缺點。在酶解過程中酶的最佳溫度往往在一個很小的范圍內，反應條件的微小波動，都可能使酶的活性大大降低，因此酶法提取對實驗條件要求較高，甚至要求對提取原料進行十分復雜的預處理。酶法提取技術要用于工業化的多糖提取，尚需進一步的深入研究。造成這些困難的原因有很多。一般來說，高等植物、真菌活性多糖分子量都很大， 水溶性也較差。其在植物原料中含量較低，而且分布狀態及分布情況復雜，有些呈游離狀態，有些與蛋白質、半纖維素等其他高分子結合成復雜的綴合物，有些存在于細胞質中，有些裹夾在細胞壁中。植物細胞壁的主要成分是纖維素，另外還包括半纖維素、果膠質、木質素等物質。纖維素具有高度結晶區的超分子穩定結構，很難水解。常用的提取法只能通過大量溶劑進行長時間的浸漬，使植物細胞壁充分脹膨，其致密構造變得松散，減少有效成分從胞內向提取介質擴散的傳質阻力。因此傳統的提取方法需要大量的溶劑和較長的時間。 簡單的溶劑浸漬只能溶出胞內游離的多糖，對于胞壁多糖無能為力，所以提取率一般不高。假如在高等植物或食藥用菌活性多糖的提取中使用酸度適中的有機酸體系，就有可能通過控制工藝條件，使原料中纖維素、半纖維素、果膠質等物質發生部分降解，從而改變植物細胞壁的結構層，使胞內多糖迅速溶出的同時，細胞壁多糖也得以盡快釋放。

發明內容
本發明正是涉及這樣一種高效提取高等植物、食藥用真菌類活性多糖的方法，即通過控制反應條件，利用有機酸體系對高等植物、食藥用真菌細胞壁纖維素、半纖維素、果膠質等高分子物質的作用，實現胞內多糖和胞壁多糖的高效提取，并適度切斷目標多糖分子中的糖苷鍵，獲得性能、結構獨特的活性多糖產物，同時實現工藝過程的節水、節能目的。為了實現上述的目的，本發明采用的技術方案如下一種高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，采用有機酸體系對高等植物、食藥用真菌類原料處理，然后再采用水提醇沉工藝，獲得水溶性活性多糖；具體為1)將預處理后的原料置入提取容器中，加入有機酸或有機\無機混酸溶液，充分攪拌使均勻潤濕；2)加熱物料，物料重量配比為原料/有機酸溶液或有機-無機混酸溶液為5/1-1/5，加熱溫度為50 150 °C，保溫時間為10-180min，提取容器工作壓力為 20mmHg-760mmHg，利用有機酸分子和高等植物、食藥用真菌細胞壁有機高分子物質之間的作用，將活性多糖從原料上分離下來，并適度切斷高分子多糖的糖苷鍵，實現其部分降解；3)采用有機溶劑洗滌除去少量殘余的酸液，完成原料的有機酸處理；4)經有機酸處理的原料，加入約5-15倍體積水進行提取，提取液濃縮后醇沉，即在濃縮后的提取液中加入乙醇，使溶于水但不溶于乙醇的多糖沉淀出來，乙醇的加入量是使多糖沉淀完全，一般為水溶液體積的3到6倍，收集沉淀部分可得到活性粗多糖；5)活性粗多糖溶于5-15倍體積的去離子水中，調節溶液的pH至中性，離心處理， 上清液經透析或膜分離后，濃縮，干燥，得到活性多糖。透析采用半透膜，半透膜的選擇根據多糖產品的分子量大小而定。有機酸溶液選自質量百分比濃度為5% -50%的草酸、質量百分比濃度為 10% -99%的甲酸、質量百分比濃度為10% -99%的乙酸和質量百分比濃度為10% -99%的丙酸水溶液中一種。
無機酸選自鹽酸、硫酸、硝酸和磷酸中的一種。無機酸的加入量是使有機-無機混酸中無機酸的質量百分比濃度達到0. -15%。當有機酸為草酸或者有機-無機混酸中的有機酸為草酸時，步驟幻中處理后采用有機溶劑洗滌去除殘留的草酸或混酸；有機酸為甲酸、乙酸、丙酸溶液或者有機-無機混酸中的有機酸為甲酸、乙酸、丙酸溶液時，處理后先采用蒸餾、抽率或離心方式去除大部分的酸液，然后采用有機溶劑進行充分洗滌除去少量殘余的酸。所述有機溶劑選自C1-C3的醇、丙酮的一種。步驟1)中所述預處理的方法可以是將原料干燥、除雜、機械粉碎后，采用乙醇、石油醚、C1-C3的醇或乙酸乙酯進行抽提，獲取其中的揮發油類、黃酮類、三萜類、皂苷類脂溶性活性物質，抽提殘渣經干燥后作為下步原料。預處理方法還可以是將原料干燥、除雜、機械粉碎后作為下步原料。對機械粉碎的目數沒有要求，采用這種方法后，原料中的脂溶性活性物質可以在步驟幻的有機溶劑處理時獲取。本發明中高等植物包括黃芪、枸杞、銀杏葉、木瓜、金銀花、當歸、陳皮、草麻黃、川穹、石菖蒲、大蒜、益智仁、白芷、艾葉、細辛、肉蓯蓉、沙棗、桉葉、魚腥草、女貞子、羌活、人參、三七、草珊瑚、車前子、水紅花子、芫花、佛手、桑白皮、桑寄生、黃芩、淫羊藿、茶葉、紅景天、蘆薈、燕麥、魔芋、山藥、天麻、柴胡、刺五加等的花、葉、種子、皮、果實、根、莖類原料；所述食藥用真菌選自靈芝、木耳、香菇、豬苓、銀耳、灰樹花、茯苓、云芝、猴頭菇、冬蟲夏草的真菌子實體或菌絲體等。本發明僅僅是列舉了上述的植物，但是不限于所列出的植物，對于其他高等植物，本發明的方法依然適用，并能取得本發明所取得的效果。高等植物、食藥用真菌中除了含有活性多糖外，還含有許多其他類活性物質，如三萜類、黃酮類、皂苷類等。本方法實施過程中，特別制定了針對性的工藝步驟，即根據這些活性成分與多糖在溶解性上的差別，在有機酸處理前或有機酸處理后分別用極性不同的溶劑提取，例如在預處理中選用的有機溶劑如石油醚、乙酸乙酯、或低分子量的醇都分別具有不同的極性。如實施例中用極性小的石油醚來提取揮發油，用極性稍大的醇來提取黃酮等，用極性最大的水來提取多糖，從而實現高等植物活性成分的綜合利用。本發明原理是在一定工藝條件下，適當的有機酸體系能與高等植物的花、葉、果實、種子、皮、根莖類以及藥用真菌子實體或菌絲體原料細胞壁的有機大分子物質(包括纖維素、半纖維素以及果膠)之間產生作用，將目標多糖與植物原料基體分離開來，再利用水將水溶性多糖抽提出來。另外，利用有機酸體系，還可以在相對溫和的條件下，適度的斷裂多糖分子中的糖苷鍵，將那些分子量過大、水溶性較差的目標多糖的分子結構進行適當降解，改善其固有的結構及理化性質，獲得高附加值活性多糖。同時，由于原料細胞壁結構層發生變化，提取耗水量顯著降低。這樣，不僅顯著提高了植物多糖的提取率，而且減少了提取用水，降低了濃縮提取液時的能耗，簡化了工藝過程。新工藝中使用有機酸體系代替原來工藝中的無機強酸溶液和無機強堿溶液，使得反應條件變得溫和、容易操控，減少了對高分子多糖活性片段的破壞。所用有機溶液容易從物料分離而且可以反復使用，減少了對多糖產物以及對周圍環境的污染。同時，產物分子量的可控降低，有利其生物活性的表達。因此， 本發明提供了一種高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的高效提取方法。與現有技術相比，本發明更具有如下優點
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1.節水、減排、節能效果顯著；使用有機酸體系代替原來工藝中的無機強酸溶液和無機強堿溶液，對多糖分子的活性片段破壞小，且溶劑回收簡單，對環境污染小。2.相比較于傳統工藝，新工藝多糖產物收率得到顯著提高，多糖含量也有明顯提
尚ο3.提取過程中直接實現多糖分子適度降解，獲得平均分子量低、多糖分子量分布窄、水溶性好的多糖產品。新工藝多糖產物作為藥品和保健產品開發具有獨特的優勢。


圖1為本發明實施例1的工藝過程示意圖。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步詳細說明。實施例1如圖1所示的工藝過程示意圖所示，具體過程如下1)取1. 5kg干燥、除雜、機械粉碎后的黃芪置于中草藥提取容器中，加入IOL乙醇， 加熱回流提取1小時，重復上述過程一次；2)過濾，合并兩次濾液并減壓蒸餾回收乙醇，得富含黃酮、皂苷、香豆素等脂溶性活性成分的醇浸膏，濾渣部分烘干備用；3)取步驟2)中烘干后的濾渣部分置于提取容器中；4)取草酸180g，加水2. OL配成草酸溶液；5)取上述步驟4)中的草酸溶液2L，加到步驟幻中的提取容器中，充分攪拌使濾渣均勻潤濕得到混合物料；6)步驟5)的混合物料加熱至100°C，保溫20min后，進行減壓蒸餾，至提取容器中
無液體。7)步驟6)中提取容器中加入無水乙醇5L，充分攪拌，過濾。濾液蒸餾回收乙醇和草酸，濾渣干燥后即為有機酸處理黃芪。8)取步驟7)中有機酸處理黃芪100克，放入IL的燒杯中，加入500ml蒸餾水，于 70°C的熱水浴中提取40min，過濾，重復上述過程1次，合并兩次濾液。9)步驟8)中濾液濃縮后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分離后進行干燥， 得到活性粗多糖產品。10)步驟9)活性粗多糖產品加入蒸餾水IL溶解，用氫氧化鈉溶液調節pH至中性， 用截留分子量為1000的半透膜進行透析。11)步驟10)中透析后多糖溶液冷凍干燥，得活性多糖產品。計算活性多糖提取率并測定多糖含量。多糖提取率為產物與高等植物原料的質量比的百分數，多糖含量采用硫酸-苯酚法進行測定。多糖分子量分布采用凝膠色譜儀進行測定。多糖提取率、多糖含量、多糖分子量分布以及提取用水量等數據見表1。實施例2與實施例1不同之處在于1) 1. 5kg經干燥、除雜、機械粉碎后木瓜置于提取容器中；
2)取無水乙酸0.8L，加水0. 15L，加質量百分比濃度為5%的稀鹽酸0.05L，配成乙
酸\鹽酸混酸溶液IL ；3)取步驟2、中混酸溶液1L，加到步驟1)的提取容器中，充分攪拌使均勻潤濕得到混合物料；4)將步驟幻的混合物料加熱至80°C，保溫60min后，進行減壓蒸餾，至提取容器中無液體。5)將步驟4)中的提取容器中加入5L的質量百分比濃度為95%乙醇溶液，充分攪拌，過濾，濾液蒸餾回收乙醇可得富含木瓜黃酮的醇浸膏，濾渣部分干燥后即為有機酸處理木瓜。6)取有機酸預處理木瓜100克，放入IL的燒杯中，加入500ml蒸餾水，于70°C的熱水浴中提取40min，過濾，重復上述過程1次，合并兩次濾液。7)步驟6)中濾液濃縮后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分離后進行干燥， 得到活性粗多糖產品。8)步驟7)活性粗多糖產品加入蒸餾水IL溶解，用氫氧化鈉溶液調節pH至中性， 用截留分子量為3000的半透膜進行透析。9)步驟8)中透析后多糖溶液冷凍干燥，得活性多糖產品。計算活性多糖提取率并測定多糖含量。多糖提取率為產物與高等植物原料的質量比的百分數，多糖含量采用硫酸-苯酚法進行測定。多糖分子量分布采用凝膠色譜儀進行測定。多糖提取率、多糖含量、多糖分子量分布以及提取用水量等數據見表1。實施例3與實施例1不同之處在于1)1. 5kg經干燥、除雜、粉碎后的當歸置于提取容器中，加入7L石油醚，加熱回流提取1小時，重復上述過程一次；2)過濾，合并兩次濾液并減壓蒸餾回收石油醚，可得當歸揮發油，當歸濾渣部分烘干后備用；3)步驟2)中干燥后的當歸濾渣部分置于提取容器中，加入IOL乙醇，加熱回流提取1小時，重復上述過程一次；4)過濾，合并兩次濾液并減壓蒸餾回收乙醇，得富含當歸黃酮的醇浸膏，濾渣部分烘干備用；5)取步驟4)中烘干的當歸濾渣置于提取容器中；6)取無水丙酸0. 85L，加水0. 15L配成丙酸溶液IL ；7)取步驟6)中丙酸溶液1L，加到步驟幻的提取容器中，充分攪拌使均勻潤濕形成混合物料；8)步驟7)的混合物料熱至130°C，保溫IOOmin后，冷卻物料至室溫，離心去除大部分丙酸溶液，固體部分放回提取容器中。9)步驟8)中提取容器中加入質量百分比濃度為90%乙醇溶液5L，充分攪拌洗滌， 過濾，濾液回收乙醇，濾渣部分干燥后即為有機酸處理當歸。10)取步驟9)中有機酸處理當歸100克，放入IL的燒杯中，加入500ml蒸餾水，于 70°C的熱水浴中提取40min，過濾，重復上述過程1次，合并兩次濾液。
11)步驟10)中濾液濃縮后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分離后進行干燥，得到活性粗多糖產品。12)步驟11)活性粗多糖產品加入蒸餾水IL溶解，用氫氧化鈉溶液調節pH至中性，用截留分子量為3000的半透膜進行透析。13)步驟12)中透析后多糖溶液冷凍干燥，得活性多糖產品。計算活性多糖提取率并測定多糖含量。多糖提取率為產物與高等植物原料的質量比的百分數，多糖含量采用硫酸-苯酚法進行測定。多糖分子量分布采用凝膠色譜儀進行測定。多糖提取率、多糖含量、多糖分子量分布以及提取用水量等數據見表1。實施例41)取1. 5kg干燥除雜、機械粉碎后的靈芝子實體置于提取容器中，加入IOL無水乙醇，加熱回流提取1小時，重復上述過程一次；2)過濾，合并兩次濾液并減壓蒸餾回收乙醇，得富含靈芝三萜的醇浸膏，濾渣部分烘干備用；3)取草酸100g，加水2. OL配成草酸溶液；4)取草酸溶液2L，加到提取容器中，充分攪拌使濾渣均勻潤濕形成物料；5)步驟4)的物料加熱至100°C，保溫20min后，進行減壓蒸餾，至提取容器中無液體，完成靈芝子實體的有機酸預處理。6)經過預處理后的靈芝子實體1. 5kg中加入無水乙醇5L，充分攪拌，過濾。濾液蒸餾回收乙醇和草酸，濾渣干燥后即為有機酸處理靈芝子實體。7)取步驟6)中有機酸處理靈芝子實體100克，放入IL的燒杯中，加入500ml蒸餾水，于70°C的熱水浴中提取40min，過濾，重復上述過程1次，合并兩次濾液。8)步驟7)中濾液濃縮后醇沉，具體是加入乙醇，加入乙醇的量至溶液中多糖沉淀完全析出，沉淀分離后進行干燥，得到活性粗多糖產品。9)步驟10)活性粗多糖產品加入蒸餾水IL溶解，用氫氧化鈉溶液調節pH至中性， 用截留分子量為2000的半透膜進行透析。10)步驟9)中透析后多糖溶液冷凍干燥，得活性多糖產品。計算活性多糖提取率并測定多糖含量。多糖提取率為產物與高等植物原料的質量比的百分數，多糖含量采用硫酸-苯酚法進行測定。多糖分子量分布采用凝膠色譜儀進行測定。多糖提取率、多糖含量、多糖分子量分布以及提取用水量等數據見表1。實施例5與實施例1不同之處在于1)取1. 5kg經干燥除雜、粉碎后的黑木耳子實體置于提取容器中；2)取無水甲酸1L，加水0.45L，加質量百分比濃度為10%的硫酸溶液配成甲酸-硫酸混酸溶液1. 5L ；3)取上述溶液1. 5L，加到上述提取容器中，充分攪拌使均勻潤濕；4)上述物料加熱至110°C，保溫20min后，進行減壓蒸餾，排除有機酸溶液，至提取容器中無液體，完成黑木耳子實體的有機酸預處理。5)經過預處理后的黑木耳子實體1. 5kg中加入無水乙醇5L，充分攪拌，過濾。濾液蒸餾回收乙醇和草酸，濾渣干燥后即為有機酸預處理黑木耳子實體。
6)取上述預處理黑木耳子實體100克，放入IL的燒杯中，加入500ml蒸餾水，于 70°C的熱水浴中提取40min，過濾，重復上述過程1次，合并兩次濾液。7)步驟6)中濾液濃縮后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分離后進行干燥， 得到活性粗多糖產品。8)步驟7)活性粗多糖產品加入蒸餾水IL溶解，用氫氧化鈉溶液調節pH至中性， 用截留分子量為15000的半透膜進行透析。9)步驟8)中透析后多糖溶液冷凍干燥，得活性多糖產品。計算活性多糖提取率并測定多糖含量。多糖提取率為產物與高等植物原料的質量比的百分數，多糖含量采用硫酸-苯酚法進行測定。多糖分子量分布采用凝膠色譜儀進行測定。多糖提取率、多糖含量、多糖分子量分布以及提取用水量等數據見表1。實施例6與實施例1不同之處在于1)取1. 5kg經干燥除雜、粉碎后的香菇子實體置于提取容器中；2)取無水乙酸0. 8L，加水0. 2L配成乙酸溶液IL ；3)取步驟2、的乙酸溶液1L，加到步驟1)的提取容器中，充分攪拌使物料均勻潤濕；4)將步驟幻的物料加熱至80°C，保溫60min后，進行減壓蒸餾，排除有機酸溶液， 至提取容器中無液體，完成香菇子實體的有機酸預處理。5)經過預處理后的香菇子實體1. 5kg中加入無水甲醇5L，充分攪拌，過濾。濾液蒸餾回收甲醇，濾渣干燥后即為有機酸預處理靈芝子實體。6)取步驟5)有機酸預處理香菇子實體100克，放入IL的燒杯中，加入500ml蒸餾水，于70°C的熱水浴中提取40min，過濾，重復上述過程1次，合并兩次濾液。7)步驟6)中濾液濃縮后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分離后進行干燥， 得到活性粗多糖產品。8)步驟7)活性粗多糖產品加入蒸餾水IL溶解，用氫氧化鈉溶液調節pH至中性， 用截留分子量為8000的半透膜進行透析。9)步驟8)中透析后多糖溶液冷凍干燥，得活性多糖產品。計算活性多糖提取率并測定多糖含量。多糖提取率為產物與高等植物原料的質量比的百分數，多糖含量采用硫酸-苯酚法進行測定。多糖分子量分布采用凝膠色譜儀進行測定。多糖提取率、多糖含量和提取用水量等數據見表1。實施例7與實施例1不同之處在于1)1. 5kg經干燥除雜、粉碎后的豬苓子實體置于提取容器中；2)取無水甲酸0.85L，加水0. 15L配成甲酸溶液IL ；3)取步驟2、甲酸溶液1L，加到步驟1)提取容器中，充分攪拌使均勻潤濕物料；5)步驟3)物料加熱至130°C，保溫IOOmin后，停止加熱，并冷卻至室溫，壓濾，排除有機酸溶液，固體部分放回提取容器中，完成豬苓子實體的有機酸預處理。6)經過步驟幻的豬苓子實體1.5kg中加入無水乙醇5L，充分攪拌，過濾。濾液蒸餾回收乙醇，濾渣干燥后即為有機酸預處理豬苓子實體。
7)取步驟6)的有機酸預處理豬苓子實體100克，放入IL的燒杯中，加入500ml蒸餾水，于70°C的熱水浴中提取40min，過濾，重復上述過程1次，合并兩次濾液。8)步驟7)中濾液濃縮后醇沉，加入乙醇至沉淀完全析出，沉淀分離后進行干燥， 得到活性粗多糖產品。9)步驟7)活性粗多糖產品加入蒸餾水IL溶解，用氫氧化鈉溶液調節pH至中性， 用截留分子量為3000的半透膜進行透析。10)步驟9)中透析后多糖溶液冷凍干燥，得活性多糖產品。計算活性多糖提取率并測定多糖含量。多糖提取率為產物與高等植物原料的質量比的百分數，多糖含量采用硫酸-苯酚法進行測定。多糖分子量分布采用凝膠色譜儀進行測定。多糖提取率、多糖含量(所得到的固體多糖的純度)和提取用水量(物料和所用水的質量比)等數據見表1。表1為實施例1-5中多糖產物提取率、多糖含量、多糖分子量分布以及多糖提取耗水量比較情況
權利要求
1.一種高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，其特征在于采用有機酸體系對高等植物、食藥用真菌類原料處理，然后再采用水提醇沉工藝，獲得水溶性活性多糖； 具體為1)將預處理后的原料置入提取容器中，加入有機酸或有機\無機混酸溶液，充分攪拌使均勻潤濕；2)加熱物料，物料重量配比為原料/有機酸溶液或有機-無機混酸溶液為5/1-1/5， 加熱溫度為50-150°C，保溫時間為10-180min，利用有機酸分子和高等植物、食藥用真菌細胞壁有機高分子物質之間的作用，將活性多糖從原料上分離下來，并切斷高分子多糖的糖苷鍵，實現其部分降解；3)有機溶劑洗滌除去殘余的酸液，完成原料的有機酸處理；4)經有機酸處理的原料，加入5-15倍體積水進行提取，提取液濃縮后醇沉，分離沉積物可得到活性粗多糖；5)活性粗多糖溶于5-15倍體積去離子水中，調節溶液的pH至中性，離心處理，上清液經透析或膜分離后，濃縮，干燥，得到活性多糖。
2.按權利要求1所述高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，其特征在于 所述有機酸溶液選自質量百分比濃度為5% -50%的草酸、質量百分比濃度為10% -99%的甲酸、質量百分比濃度為10% -99%的乙酸和質量百分比濃度為10% -99%的丙酸水溶液中的一種。
3.按權利要求1所述高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，其特征在于 所述有機-無機混酸中無機酸的質量百分比濃度為0. 1%-15%。
4.按權利要求1或3所述高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，其特征在于所述無機酸選自鹽酸、硫酸、硝酸和磷酸中的一種。
5.按權利要求1或2所述高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的高效提取方法，其特征在于有機酸為草酸溶液時，處理后采用有機溶劑洗滌去除殘留的草酸或混酸；所述有機酸為甲酸、乙酸、丙酸溶液時，處理后采用蒸餾、抽濾或離心方式去除大部分的酸液，然后采用有機溶劑進行充分洗滌除去少量殘余的酸。
6.按權利要求1或5所述高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的高效提取方法，所述有機溶劑選自C1-C3的醇或丙酮。
7.按權利要求1所述高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，其特征在于 所述預處理方法為將原料干燥、除雜、機械粉碎，采用石油醚、C1-C3的醇或乙酸乙酯進行抽提，獲取其中的揮發油類、黃酮類、三萜類、皂苷類脂溶性活性物質，抽提殘渣經干燥后作為下步原料。
8.按權利要求1所述高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，其特征在于 所述預處理方法為將原料干燥、除雜、機械粉碎作為下步原料，此時脂溶性活性物質可在步驟3)中有機溶劑洗滌時獲取。
9.按權利要求1所述高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，其特征在于所述高等植物選自黃芪、枸杞、銀杏葉、木瓜、金銀花、當歸、陳皮、草麻黃、川穹、石菖蒲、 大蒜、益智仁、白芷、艾葉、細辛、肉蓯蓉、沙棗、桉葉、魚腥草、女貞子、羌活、人參、三七、草珊瑚、車前子、水紅花子、芫花、佛手、桑白皮、桑寄生、黃芩、淫羊藿、茶葉、紅景天、蘆薈、燕麥、魔芋、山藥、天麻、柴胡、刺五加的花、葉、種子、皮、果實、根、莖類原料；所述食藥用真菌選自靈芝、木耳、香菇、豬苓、銀耳、灰樹花、茯苓、云芝、猴頭菇、冬蟲夏草的真菌子實體或菌絲體。
全文摘要
本發明涉及一種高等植物或食藥用真菌類中活性多糖的提取方法，具體為在原料中加入有機酸或有機\無機混酸溶液;加熱物料,利用有機酸分子將活性多糖從原料上分離下來，并適度切斷植物高分子活性多糖的糖苷鍵，實現其部分降解；采用蒸餾、過濾或離心方法，排除物料中大部分酸溶液,然后用有機溶劑洗滌除去少量殘余的酸液；經有機酸處理的原料，加入約5-15倍體積水進行提取，提取液濃縮后醇沉可得活性粗多糖；粗多糖溶于5-15倍體積去離子水中，調節溶液的pH至中性，離心，上清液經透析或膜分離后，濃縮，干燥得到平均分子量低、多糖分子量分布窄、水溶性好的活性多糖產品，同時克服現有工藝耗水、耗能、產物收率低等諸多缺點。
文檔編號C08B37/00GK102417545SQ201110342660
公開日2012年4月18日 申請日期2011年11月3日 優先權日2011年11月3日
發明者劉志宇, 張勁松, 李明天, 許磊 申請人:沈陽科思高科技有限公司