專利名稱：一種古登堡菊素的提純方法
技術領域：
本發明屬于天然產物分離領域，尤其是涉及ー種應用超臨界萃取法提純古登堡菊素的方法。
背景技術：
古登堡菊素是從菊科植物心葉古登堡菊Gutenbergia cordifolia Benth. exOliver葉中提取分離得到的ー種12，6_桉烷內酯類化合物，分子量為C17H18O5，分子量為302. 33。現代研究表明，古登堡菊素具有抗菌作用和細胞毒作用，能抑制白血病細胞L-5178Y 的生長，IC50 為 O. 13μ g/ml。
目前，尚未發現采用超高壓提取和柱層析技術從天然植物中提取古登堡菊素的研究報道。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供ー種古登堡菊素的提純方法，該方法操作簡單，制備量大。本發明是通過以下技術方案實現的
ー種古登堡菊素的提純方法，其特征在于包含以下步驟
1)超高壓提取將心葉古登堡菊葉粉碎，加入こ醇溶液后采用超高壓法進行提取，控制粒徑為60目，こ醇濃度為65%，固液體積比為1:10-1:18，壓カ為400MPa，保壓3_5min，重復2-3次，提取液濃縮干燥得到粗提物；
2)石油醚脫脂向上述粗提物中加入3-4倍量石油醚回流提取2-4次，離心分離固液，得脫脂物；
3)柱層析將上述脫脂物進行硅膠柱層析，用氯仿-甲醇梯度洗脫，高效液相監測，收集相應流分，濃縮干燥得到古登堡菊素。所述步驟3)中的硅膠粒度為100-300目，氯仿-甲醇體積比為2_16 :5。本發明的積極效果是
(1)本發明采用超高壓提取技木，不僅提取過程用時短，而且節省能源，生產成本低，操作簡便，提高了經濟效益和社會效益；
(2)本發明采用柱層析法精制古登堡菊素，該法能快速的去處雜質，得到純度高的古登堡菊素，エ藝簡單，成本低，效率高。
具體實施例方式 下面將結合具體實施方式
進ー步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I :
取心葉古登堡菊葉干燥藥材1kg，粉碎過20目篩，加入こ醇溶液后采用超高壓法進行提取，控制粒徑為60目，こ醇濃度為65%，固液體積比為1:18，壓カ為400MPa，保壓3min，重復3次，提取液濃縮干燥得到粗提物，加入350ml石油醚回流提取4次，離心除去液體得脫脂物；
將脫脂物用甲醇溶解和等量硅膠混合均勻，上硅膠(200目)柱層析，用氯仿-甲醇按體積比3:5、7:5、10:5、15:5梯度洗脫，用高效液相色譜跟蹤，收集目標流分，合并，減壓回收試劑，得到古登堡菊素I. 7g，含量為61. 4%。實施例2
取心葉古登堡菊葉干燥藥材1kg，粉碎過20目篩，加入こ醇溶液后采用超高壓法進行提取，控制粒徑為60目，こ醇濃度為65%，固液體積比為1:15，壓カ為400MPa，保壓4min，重復2次，提取液濃縮干燥得到粗提物，加入300ml石油醚回流提取2次，離心除去液體得脫脂物；
將脫脂物用甲醇溶解和等量硅膠混合均勻，上硅膠(100目)柱層析，用氯仿-甲醇按體積比2:5、5:5、10:5、16:5梯度洗脫，用高效液相色譜跟蹤，收集目標流分，合并，減壓回收 試劑，得到古登堡菊素I. 7g，含量為62. 2%。實施例3:
取心葉古登堡菊葉干燥藥材1kg，粉碎過20目篩，加入こ醇溶液后采用超高壓法進行提取，控制粒徑為60目，こ醇濃度為65%，固液體積比為1:16，壓カ為400MPa，保壓4min，重復3次，提取液濃縮干燥得到粗提物，加入300ml石油醚回流提取4次，離心除去液體得脫脂物；
將脫脂物用甲醇溶解和等量硅膠混合均勻，上硅膠(300目)柱層析，用氯仿-甲醇按體積比2:5、5:5、9:5、16:5梯度洗脫，用高效液相色譜跟蹤，收集目標流分，合并，減壓回收試齊U，得到古登堡菊素I. 5g，含量為62. 5%。實施例4:
取心葉古登堡菊葉干燥藥材1kg，粉碎過20目篩，加入こ醇溶液后采用超高壓法進行提取，控制粒徑為60目，こ醇濃度為65%，固液體積比為1:10，壓カ為400MPa，保壓5min，重復2次，提取液濃縮干燥得到粗提物，加入400ml石油醚回流提取3次，離心除去液體得脫脂物；
將脫脂物用甲醇溶解和等量硅膠混合均勻，上硅膠(100目)柱層析，用氯仿-甲醇按體積比2:5、6:5、10:5、14:5梯度洗脫，用高效液相色譜跟蹤，收集目標流分，合并，減壓回收試劑，得到古登堡菊素I. 2g，含量為59. 4%。
權利要求
1.ー種古登堡菊素的提純方法，其特征在于包含以下步驟 1)超高壓提取將心葉古登堡菊葉粉碎，加入こ醇溶液后采用超高壓法進行提取，控制粒徑為60目，こ醇濃度為65%，固液體積比為1:10-1:18，壓カ為400MPa，保壓3_5min，重復2-3次，提取液濃縮干燥得到粗提物； 2)石油醚脫脂向上述粗提物中加入3-4倍量石油醚回流提取2-4次，離心分離固液，得脫脂物； 3)柱層析將上述脫脂物進行硅膠柱層析，用氯仿-甲醇梯度洗脫，高效液相監測，收集相應流分，濃縮干燥得到古登堡菊素。
2.如權利要求所述的ー種古登堡菊素的提純方法，其特征在于所述步驟3)中的硅膠粒度為100-300目，氣仿-甲醇體積比為2-16 5o
全文摘要
本發明涉及了一種古登堡菊素的提純方法，尤其是涉及一種應用超高壓提取法提純古登堡菊素的方法，方法步驟包括取心葉古登堡菊葉粉碎，加入乙醇溶液后采用超高壓法進行提取，得到粗提物，用石油醚回流脫除脂溶性雜質，再采用硅膠柱層析，氯仿-甲醇梯度洗脫，分離精制得古登堡菊素。本發明工藝流程簡單、消耗低、效率高、簡單易操作，可實現大量制備。
文檔編號C07D307/92GK102827121SQ201210368329
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月28日 優先權日2012年9月28日
發明者劉東鋒, 萬冬梅 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司