本發明涉及2-芳基-4-羥基-1,3-噻唑衍生物，其用于預防、改善、治療與瞬時受體電位陽離子通道亞族M成員8(下文稱為TRPM8)又稱為冷薄荷醇受體1(CMR-1)的活性相關的疾病、和/或降低其風險，特別地其用于預防、改善、治療瘙癢、腸易激疾病、冷誘發的和/或加重的呼吸系統疾病、局部缺血、疼痛、神經變性、精神疾病、中風和泌尿系統疾病、和/或降低其風險。本發明進一步涉及包含上述化合物的藥物組合物。
背景技術：
：瞬時受體電位(TRP)通道是一個最大的離子通道組，基于它們序列同源性，被分類為6個亞族(TRPV、TRPM；TRPA、TRPC、TRPP和TRPML)。TRP通道是由數種物理(例如溫度、摩爾滲透壓濃度和機械刺激)和化學刺激活化的陽離子選擇性通道。在2002年克隆的TRPM8是TRP家族的非選擇性陽離子通道，其在引起感覺神經興奮的背根神經節和三叉神經節上的體細胞感覺神經的亞群上表達。其由輕度低溫和合成的冷模擬化合物例如薄荷醇、桉樹腦和冰素(icilin)活化[McKemyD.D.等人,Nature(2002)416,52-58；PeierA.M.等人Cel(2002)108,705-715]。如同其他幾個TRP通道，TRPM8也由電壓門控[NiliusB.等人,J.Physiol.(2005)567,35-44]。TRPM8的電壓依賴性的特征是在去極化的跨膜電位的強外向整流和在負膜電位的快速和電位依賴性閉合。冷卻劑和薄荷醇的應用使活化曲線移向更多的負電位，增加了通道打開的可能性和在生理膜電位增加內向電流。其他內源性因子，例如磷脂酶A2產物[VandenAbeeleF.等人,J.Biol.Chem.(2006)281,40174-40182]、內源性大麻素[DePetrocellisL.等人,Exp.Cell.Res.(2007)313,1911-1920]和PIP2[RohacsT.等人,Nat.Neurosci.(2005)8,626-634]也參與通道調節。存在許多直接和間接證據表明TRPM8通道活性在諸如疼痛、局部缺血和瘙癢、腸易激疾病，冷誘發的和/或加重的呼吸系統疾病的疾病中起關鍵作用。進一步，業已證明TRP通道轉換參與具有損傷或異常脊髓反射通路的患者的膀胱過度活動癥的反射信號[DeGroatW.C.等人,Urology(1997)50,36-52]。TRPM8由8℃至28℃之間的溫度活化并且在初級傷害性神經元上表達，包括膀胱尿道上皮、背根神經節、A-δ和C-纖維。膀胱內冰水或薄荷醇還在罹患緊迫性和尿失禁的患者中誘發C-纖維介導的脊髓排尿反射[EveraertsW.等人,Neurol.Urodyn.(2008)27,264-73]。此外，已知TRPM8調節Ca2+濃度流入以響應寒冷溫度或藥理刺激。最后，在最近的一篇論文中，已經提出TRPM8在冷誘發的哮喘中和在哮喘惡化中的潛在作用，表明TRPM8也是管理這些病理學的相關靶標[XingH.等人,MolecularPain(2008),4,22-30]。腦、肺、膀胱、胃腸道、血管、前列腺和免疫細胞中通道的表達為在廣泛的病理學中治療調節TRPM8的活性提供了進一步的可能性。特別地，業已證明受TRPM8調節影響的病癥或疾病是疼痛，例如慢性疼痛、神經性疼痛包括冷觸誘發痛和糖尿病性神經病、手術后疼痛、骨關節炎疼痛、類風濕性關節炎疼痛、癌癥疼痛、神經痛、神經病、感覺過敏、纖維肌痛、神經損傷、偏頭痛、頭痛；局部缺血、神經變性、中風、精神疾病包括焦慮和抑郁、和瘙癢、腸易激疾病、冷誘發的和/或加重的呼吸系統疾病例如冷誘發的和/或加重的肺動脈高壓、哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)；泌尿系統疾病例如疼痛膀胱綜合征、間質性膀胱炎、逼尿肌過度活動癥(膀胱過度活動癥)、尿失禁、神經性逼尿肌過度活動癥(逼尿肌反射亢進)、特發性逼尿肌過度活動癥(逼尿肌不穩定)、良性前列腺增生、下尿路疾病和下尿路癥狀[NiliusB.等人ScienceSTKE(2005),295,re8；VoetsT.等人,Nat.Chem.Biol.(2005),1,85-92；MukerjiG.等人,Urology(2006),6,31-36；LazzeriM.等人,Ther.Adv.Urol.(2009),1,33-42；NiliusB.等人,Biochim.Biophys.Acta(2007),1772,805-12；WissenbachU.等人,Biol.Cel.(2004),96,47-54；NiliusB.等人,Physiol.Rev.(2007),87,165-217；ProudfootC.J.等人,Curr.Biol.(2006),16,1591-1605]。在最近幾年，已經公開了幾類非肽TRPM8拮抗劑。WO2006/040136、WO2007/017092、WO2007/017093、WO2007/017094和WO2007/080109描述了芐氧基衍生物作為TRPM8拮抗劑用于治療泌尿系統疾病；WO2007/134107描述了含磷化合物作為TRPM8拮抗劑用于治療與TRPM8相關病癥；WO2009/012430描述了用于治療與TRPM8相關的疾病的磺胺類；WO2010/103381描述了螺環哌啶衍生物作為TRPM8調節劑在預防或治療與TRPM8相關病癥或疾病中的用途；WO2010/125831描述了作為TRPM8受體的調節劑的氨磺酰苯甲酸衍生物及其在治療炎癥、疼痛和泌尿系統疾病中的用途；和WO2013/092711描述了作為TRPM8受體調節劑的2-芳基噁唑和噻唑衍生物及其在預防、改善、治療與泌尿系統相關疾病、和/或降低其風險中的用途。其中仍然特別需要開發TRPM8的拮抗劑的治療領域是泌尿系統疾病和相關疼痛領域。事實上，目前可用于治療尿失禁和病癥的傳統藥物和用藥的特征在于幾種副作用。例如，目前，膀胱過度活動綜合征的治療是基于使用藥物，特別是影響外周神經控制機制或膀胱逼尿肌平滑肌收縮的抗膽堿能藥物。這些藥物抑制副交感神經對膀胱肌肉產生直接的解痙作用。該作用的結果是囊內壓力的降低，容量的增加和膀胱收縮的頻率的降低。然而，抗膽堿能藥的使用與嚴重的副作用相關，例如干口、異常視力、便秘和CNS障礙，這損害了患者的整體依從性。實際治療的不足突出了對具有較少副作用的新型、有效和安全的藥物的需要。技術實現要素：本發明的目的是提供新型TRPM8拮抗劑，所述拮抗劑對該特異性受體具有高選擇性和具有足夠用于治療的藥代動力學特征。本發明人現在已經發現一類作為瞬時受體電位陽離子通道亞族M成員8(下文稱為TRPM8)的選擇性拮抗劑的2-芳基-4-羥基-1,3-噻唑化合物，其具有良好的口服生物利用度并滿足上述需求。這些化合物用于治療與TRPM8的活性相關的疾病，優選衍生于TRPM8受體的過表達和/或過度活躍的疾病。附圖說明圖1和2顯示在實施例47所述測試中獲得的典型響應的圖。圖1顯示相比于假手術大鼠(假手術)和接受載體大鼠(載體)，用化合物2(DFL23693os)治療的大鼠中，第7天(圖1a)和第14天(圖1b)的機械抗痛覺超敏作用(mechanicalantiallodyniceffect)。圖2顯示相比于假手術大鼠(假手術)和接受載體大鼠(載體)，用化合物2(DFL23693os)治療的大鼠中，第7天(圖2a)和第14天(圖2b)的冷抗痛覺超敏作用。在兩個圖中，符號*是指p<0.05；符號**是指p<0.01；符號***是指p<0.001相比于載體，用雙因素方差分析(two-wayANOVA)測量，隨后用鄧尼特檢驗(Dunnett’stest)測量。具體實施方式本發明第一個目的是式(I)化合物：其中X為氧、硫、NH、NOH或NOMe；R為選自芳基和雜芳基的基團，所述芳基和雜芳基任選被一個或多個選自以下的取代基取代：-氫，-鹵素，-CF3，-直鏈或支鏈C1-C6烷基，-OR5和-NR6R7，其中R5、R6和R7獨立地為氫或直鏈或支鏈C1-C6烷基；R1為選自以下的基團：-直鏈或支鏈C1-C6烷基，-(CH2)m-OR2，其中m為1至3之間的整數且R2選自氫和直鏈C1-C3烷基，-C3-C6環烷基，和-N(R3)OR4，其中R3和R4獨立地為氫或直鏈或支鏈C1-C3烷基，和其藥學上可接受的鹽。根據本發明第一個優選的實施方案，在所述式(I)化合物中，R1選自：-直鏈或支鏈C1-C6烷基，-(CH2)m-OR2其中m為1且R2為直鏈C1-C3烷基，-C3-C6環烷基，或-N(R3)OR4，其中R3和R4如上所定義。根據該實施方案本發明特別優選的化合物為式(I)化合物其中R1為-直鏈或支鏈C1-C6烷基，-(CH2)m-OR2其中m為1且R2為CH3，-環丙基，-或-N(R3)OR4，其中R3和R4獨立地為C1-C3烷基，優選CH3。根據本發明第二個優選的實施方案，也結合前面的實施方案，在上述式(I)化合物中，R1不為甲基。根據該實施方案特別優選的化合物為化合物其中R1選自乙基、異丙基、異丁基、CH2OCH3、環丙基和N(CH3)OCH3。根據本發明第三個優選的實施方案，也結合第一實施方案，R1選自甲基、乙基、異丙基、異丁基、CH2OCH3、環丙基和N(CH3)OCH3。根據本發明進一步優選的實施方案，也結合第一和第三實施方案，在上述式(I)化合物中，當R1為甲基時，R不選自3-吡啶基、4-氯苯基、4-三氟甲基苯基、3-噻吩基(tiophenyl)、3-噻唑基-(2-甲基)、苯基、噻唑、2,4-二氟苯基、4-甲氧基苯基和2-甲基噻唑。根據本發明另一個優選的實施方案，也結合前面任一實施方案，X為氧。根據本發明進一步優選的實施方案，也結合前面任一實施方案，所述芳基為苯基且所述雜芳基為包含1至3個選自N、O和S的雜原子的5-或6-元雜芳基。優選地，所述5-或6-元雜芳基選自噻吩基(thiophenyl)、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噁二唑基、噁唑基和吡啶基。根據本發明進一步優選的實施方案，也結合前面任一實施方案，在所述式(I)化合物中，其中R為芳基，所述芳基任選被選自以下的基團取代：-鹵素，優選選自Br和F；-直鏈或支鏈C1-C3烷基，優選CH3；-OR5和NR6R7，其中R5、R6和R7獨立地為氫或直鏈C1-C3烷基。OR5和NR6R7優選的基團分別為OH、NH2和NHCH3。根據本發明進一步優選的實施方案，也結合前面任一實施方案，在所述式(I)化合物中，其中R為雜芳基，所述雜芳基任選被直鏈或直鏈C1-C6烷基取代，優選被CH3取代。本發明特別優選的式(I)化合物為那些化合物其中R選自3-氟苯基、4-氟苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2-羥基苯基、3-羥基苯基、4-羥基苯基、3-氨基苯基、4-氨基苯基、3-甲基氨基苯基、4-甲基氨基苯基、噻吩-2-基、呋喃-2-基、吡咯-2-基、1H-咪唑-5-基、1-甲基-咪唑-5-基、吡唑-4-基、1,2,4-噁二唑-3-基、1,2-噁唑-5-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基和吡啶-4-基。根據本發明特別優選的式(I)化合物選自：1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號1)2-(3-氟苯基)-5-丙酰基-1,3-噻唑-4-醇鈉(化合物編號2)2-(3-氟苯基)-4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(化合物編號3)1-(2-(3-氟苯基)-4-羥基噻唑-5-基)乙酮(化合物編號4)1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]-2-甲基丙-1-酮(化合物編號5)4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-甲酰胺(化合物編號6)1-[4-羥基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號7)4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-2-(2-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(化合物編號8)1-[4-羥基-2-(2-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號9)2-(2-溴苯基)-4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(化合物編號10)1-[2-(2-溴苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號11)4-羥基-2-(2-羥基苯基)-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(化合物編號12)1-[2-(2-羥基苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號13)1-[2-(3-溴苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號14)1-[2-(呋喃-2-基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號15)1-[4-羥基-2-(1H-吡咯-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號16)1-[4-羥基-2-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號17)1-[4-羥基-2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號18)1-[4-羥基-2-(1H-咪唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號19)1-[4-羥基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號20)1-[4-羥基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丁-1-酮(化合物編號21)1-[4-羥基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]-3-甲基丁-1-酮(化合物編號22)1-[4-羥基-2-(1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號23)1-[4-羥基-2-(1,2-噁唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號24)1-[4-羥基-2-(吡啶-3-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號25)1-[4-羥基-2-(吡啶-4-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號26)1-[4-羥基-2-(吡啶-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號27)1-[4-羥基-2-(3-羥基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號28)1-[4-羥基-2-(4-羥基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號29)1-[4-羥基-2-(3-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號30)1-[4-羥基-2-(4-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號31)1-[2-(3-氨基苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號32)1-[2-(4-氨基苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號33)1-{4-羥基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1,3-噻唑-5-基}丙-1-酮(化合物編號34)1-{4-羥基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1,3-噻唑-5-基}丙-1-酮(化合物編號35)1-[2-(4-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號36)1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丁-1-酮(化合物編號37)1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]-3-甲基丁-1-酮(化合物編號38)1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]-2-甲氧基乙酮(化合物編號39)1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙烷-1-硫酮(化合物編號40)2-(3-氟苯基)-4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-硫代甲酰胺(化合物編號41)2-(3-氟苯基)-5-[(1E)-N-甲氧基丙亞胺酰基]-1,3-噻唑-4-醇(化合物編號42)2-(3-氟苯基)-5-丙亞胺酰基-1,3-噻唑-4-醇(化合物編號43)和2-(3-氟苯基)-5-[(1E)-N-羥基丙亞胺酰基]-1,3-噻唑-4-醇(化合物編號44)。根據本發明最特別優選的式(I)化合物選自：2-(3-氟苯基)-5-丙酰基-1,3-噻唑-4-醇鈉(化合物編號2)2-(3-氟苯基)-4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(化合物編號3)4-羥基-2-(2-羥基苯基)-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(化合物編號12)和1-[4-羥基-2-(3-羥基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(化合物編號28)。如實施例46中所詳述，本發明人已經發現上述化合物1-45為TRPM8的強力拮抗劑。詳細地，所有上述化合物已經在用于人TRPM8的高通量篩選(HTS)基于細胞的試驗中測試，并且顯示出具有低于2μM的IC50的拮抗活性。因此，本發明的第二個目的是上述式(I)化合物作為TRPM8，優選人TRPM8拮抗劑的用途。本發明代表性的式(I)化合物的口服施用在施用后3小時和5小時顯著減輕了冷和機械性痛覺超敏。在治療后3小時達到最大活性(在兩個參數上約50％的抑制)，參見下面的實施例47。此外，相同的代表性化合物對寬范圍的所選GPCR以及對TRPV1、TRPV4和TRPA1顯示出高選擇性，因此證實了其選擇性作用機制，參見下面實施例48。最后，如下面實施例49中所報道，測試化合物對任何人細胞色素同工型沒有顯示作用，因此排除了潛在的藥物藥物相互作用。此外，沒有觀察到對hERG通道的作用，因此排除了臨床開發期間的潛在心臟毒性作用。測試化合物的低logD值使得當需要ip、iv和ives應用時特別適用，特別是在治療泌尿系統疾病中。同時，相對高的血漿半衰期和高的口服生物利用度可使其成為治療慢性疾病，例如炎癥性和神經性疼痛的理想候選物。因此，本發明上述公開的化合物特別適合在治療中使用。因此，本發明第三個目的是作為藥物用途的上述式(I)化合物。本發明第四個目的是上述式(I)化合物用于預防、改善、治療與TRPM8活性相關的疾病，優選衍生于TRPM8受體的過表達和/或過度活躍的疾病、和/或降低其風險。根據本發明，術語“TRPM8受體的過表達和/或過度活躍”是指TRPM8受體的表達和/或活動高于生理學水平。根據本發明，術語“與TRPM8活性相關的疾病”優選是指選自疼痛、瘙癢、腸易激疾病、冷誘發的和/或加重的呼吸系統疾病、局部缺血、神經變性、中風、泌尿系統疾病和精神疾病的疾病。優選地，所述疼痛選自慢性疼痛、癌癥疼痛、神經性疼痛，其意在包括冷痛覺超敏和糖尿病性神經病變，手術后疼痛、骨關節炎疼痛、類風濕性關節炎疼痛、神經痛、神經病、纖維肌痛、感覺過敏、神經損傷、偏頭痛、頭痛。優選地，所述冷誘發的和/或加重的呼吸系統疾病選自冷誘發的和/或加重的肺動脈高壓、慢性阻塞性肺病和哮喘。優選地，所述泌尿系統疾病選自疼痛性膀胱綜合征、間質性膀胱炎、逼尿肌過度活動癥(也稱為膀胱過動癥)、尿失禁、神經性逼尿肌過度活動癥(也稱為逼尿肌反射亢進)、特發性逼尿肌過度活動癥(也稱為逼尿肌不穩定)、良性前列腺增生，下尿路疾病和下尿路癥狀。優選地，所述神經疾病選自焦慮和抑郁。本發明第五個目的是藥物組合物，其包含與藥學上可接受的賦形劑和/或稀釋劑組合的至少一種上述式(I)化合物。根據一個優選的實施方案，所述藥物組合物是用于預防、改善、治療與TRPM8活性相關的疾病，優選衍生于TRPM8受體的過表達和/或過度活躍的疾病、和/或降低其風險。根據一個優選的實施方案，所述藥物組合物包含至少一種上述式(I)化合物作為唯一活性成分。根據一個可選的優選的實施方案，所述藥物組合物包含與至少一種其他活性成分聯合的至少一種上述式(I)化合物。根據本發明進一步優選的實施方案，也結合前面任一實施方案，所述藥物組合物可以膀胱內、靜脈內、局部或口服施用。使用常規技術和賦形劑例如"Remington'sPharmaceuticalSciencesHandbook"MACKPublishing,NewYork,18thed.,1990中所述的那些進行將本發明式(I)化合物常規配制成藥物組合物。本發明第六個目的是一種用于預防、改善、治療所述與TRPM8活性相關的疾病，優選衍生于TRPM8受體的過表達和/或過度活躍的疾病、和/或降低其風險的治療方法，其包括向需要其的受試者施用上述式(I)化合物。本發明的化合物可以作為唯一活性成分施用或者與其他治療活性化合物組合施用。可以通過膀胱內滴注，通過靜脈內注射，作為推注，在皮膚病學制劑(霜劑、洗劑、噴霧劑和軟膏)中，通過吸入以及以膠囊、片劑、糖漿、控釋制劑等形式口服達到本發明化合物的施用。平均每日劑量取決于幾個因素，例如疾病的嚴重程度、病癥、患者的年齡、性別和體重。劑量通常從每天1至1500mg式(I)化合物變化，任選地分多次施用。本發明將通過以下實施例進行說明，這些實施例不應被解釋為限制本發明的范圍。實施例優選化合物的合成表I列出的化合物已經依據以下實施例中描述的程序合成。材料和方法所有試劑購自Sigma-Aldrich、Fluorochem和AlfaAesar，并且不經進一步純化而使用。在BrukerAvance3400MHz儀器上，在四甲基硅烷(TMS)作為內標的指定溶劑中記錄核磁共振(NMR)光譜。化學位移以相對于內標的百萬分之幾(ppm)報告。縮寫如下使用：s＝單峰、d＝雙峰、t＝三重峰、q＝四重逢、m＝多重峰、dd＝雙重雙峰、bs＝寬單峰。偶合常數(J值)以赫茲(Hz)給出。在與ThermoFinniganLCQDECAXP-PLUS裝置偶聯并配備有C18(10μM，4.6mm×150mm)PhenomenexGemini反相柱的ThermoFinniganSurveyor上記錄分析性HPLC-MS譜。洗脫液混合物由10mM(pH4.2)甲酸銨/甲酸緩沖液和乙腈組成，以梯度90:10至10:90使用，流速為0.200mL/min。所有MS實驗使用電噴霧電離(ESI)以正離子和負離子模式進行。通過在250μm厚、60F254的GraceResolvDavisil硅膠板上，通過使用UV(254nm)或染色如KMnO4、對甲氧基苯甲醛和鉬酸鈰銨(CAM)可視化進行的薄層色譜法(TLC)監測所有反應。在具有GraceResolvDavisil二氧化硅60的硅膠柱上進行色譜純化。所有有機溶液用無水Na2SO4或MgSO4干燥并在旋轉蒸發儀上濃縮。除非另有說明，用于生物試驗的所有化合物基于用220和254nm波長監測的HPLC分析結果為至少98％的純度。一般程序實施例13-氟苯硫代甲酰胺(中間體a)的合成向配備有冷凝器和磁力攪拌器的100mL圓底燒瓶中裝入溶解于30mLTHF的3-氟苯甲酰胺(2.0g，14.4mmol)，然后向溶液中加入勞氏試劑(Lawesson’sreagent)(3.5g，8.64mmol)。將混合物加熱至60℃并攪拌過夜；通過TLC(洗脫液：正己烷/EtOAc7:3)監測轉化。于室溫冷卻溶液，并通過真空蒸餾除去溶劑。通過閃式色譜法(洗脫液：正己烷/EtOAc7:3)純化粗產物，從中獲得為黃色固體的3-氟苯硫代甲酰胺(2.0g，12.9mmol，Y＝89％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.80-7.55(bs,1H,NH2),7.66-7.60(m,2H),7.44-7.37(m,1H),7.27-7.20(m,1H),7.30-7.00(bs,1H,NH2)。MS(ES1+)m/z:156.11[M+H]+。2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-羧酸乙酯(中間體b)的合成向配備有磁力攪拌器的微波瓶中裝入溶解在干燥乙醇(8mL)中的3-氟苯硫代甲酰胺(0.5g，3.22mmol)，加入二溴丙二酸二乙酯(0.055mL，3.22mmol)，并將瓶蓋緊。將溶液在微波裝置中于100℃輻射30分鐘。從乙醇中結晶后得到為黃色固體的2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-羧酸乙酯(0.439g，1.64mmol，Y＝51％)。1H-NMR(CDCl3):δ9.94(bs,1H,OH),7.80-7.70(m,2H),7.49-7.41(m,1H),7.2-7.17(m,1H),4.43(q,2H,J＝7.1Hz),1.42(t,3H,J＝7.1Hz)。MS(ES1+)m/z:267.81[M+H]+。2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-羧酸乙酯(中間體c)的合成向配備有磁力攪拌器的25mL圓底燒瓶中裝入溶解在干燥THF(3mL)和DMF(2.5mL)中的2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-羧酸乙酯(0.100g，0.374mmol)，用NaH(60-65％油分散體，0.022g，1.5eq)和碘甲烷(0.140mL，7eg)處理該溶液并于室溫攪拌過夜。將反應在水中淬滅，在乙酸乙酯(20mL，3次)中萃取，收集有機物，用飽和碳酸氫鈉和鹽水洗滌，然后用干燥硫酸鈉脫水。粗產物在硅膠上純化(洗脫劑：正己烷/乙酸乙酯9:1)。得到為黃色固體的2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-羧酸乙酯(0.053g，0.19mmol，Y＝50％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.69-7.25(m,2H),7.47-7.41(m,1H),7.23-7.16(m,1H),4.36(q,2H,J＝7.2Hz),4.25(s,3H),1.39(t,3H,J＝7.2Hz)。MS(ES1+)m/z:282.08[M+H]+。2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-羧酸(中間體d)的合成向配備有磁力攪拌器的25mL圓底燒瓶中裝入溶解在乙醇(3mL)和水(0.020mL)中的2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-羧酸乙酯(0.097g，0.344mmol)。然后加入KOH(0.193g，3.44mmol)，將溶液于室溫攪拌過夜。將混合物在水(15mL)中稀釋，用HCl2N酸化至pH2，并在乙酸乙酯(20mL×2)中萃取。收集有機層，用水和鹽水洗滌，然后用干燥硫酸鈉脫水。得到為黃色固體的2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-羧酸(0.077g，0.304mmol，Y＝88％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.76-7.71(m,2H),7.50-7.43(m,1H),7.26-7.19(m,1H),4.32(s,3H)。MS(ES1-)m/z:252.25[M-H]-。2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-碳酰氯(中間體e)的合成于室溫向配備有磁力攪拌器和水冷卻冷凝器的25mL圓底燒瓶中裝入2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-羧酸(0.049g，0.193mmol)和5mL干燥DCM。在相同溫度下，用過量的亞硫酰氯(0.028mL，0.387mmol)和催化量的DMF(0.002mL)處理該溶液，然后回流2.5小時。將溶液冷卻，然后在減壓下去除揮發物。將油狀殘余物用甲苯汽提幾次以進一步除去殘留的亞硫酰氯。得到為淺黃色油的2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-碳酰氯(0.052g，0.0193mmol，Y＝95％)，并且不經進一步純化使用。2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(中間體f)的合成在配備有磁力攪拌器的25mL圓底燒瓶中，將2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-碳酰氯(0.052g，0.193mmol)溶于干燥DCM(5mL)中并用冰浴冷卻至0℃。將該溶液用N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(0.038g，0.386mmol)、三乙胺(0.1mL)和DCM(2mL)的混合物處理，并在相同溫度下攪拌45分鐘。通過LC-MS檢查，反應完全，因此將其淬滅并如下進行后處理：將混合物用DCM(50mL)稀釋，并用水(10mL×2)和鹽水(10mL)洗滌，用無水硫酸鈉干燥并且溶劑真空蒸餾。得到為油狀固體的2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(0.060g，0.20mmol，Y＝95％)，并用于下一合成步驟。1H-NMR(CDCl3):δ7.79-7.71(m,2H),7.48-7.40(m,1H),7.22-7.14(m,1H),4.25(s,3H),3.77(s,3H),3.35(s,3H)。MS(ES1+)m/z:297.32[M+H]+。1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(中間體g)的合成向配備有磁力攪拌器的10mL圓底燒瓶中裝入2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(0.066g，0.223mmol)和2.5mL干燥THF并冷卻至-78℃。將溶液在相同溫度下用乙基氯化鎂(0.17mL，0.334mmol)處理，然后于-60℃攪拌1.5小時。移除冷卻系統，并將反應于室溫用飽和氯化銨水溶液(10mL)淬滅。用乙酸乙酯(20mL×2)萃取混合物，收集有機物，用水(20mL×2)洗滌兩次，用鹽水(20mL)洗滌一次。然后將有機相脫水并真空除去溶劑。粗產物通過閃式色譜法在硅膠上純化。得到為淺黃色固體的1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(0.056g，0.211mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.75-7.70(m,2H),7.48-7.41(m,1H),7.23-7.16(m,1H),4.25(s,3H),2.95(q,2H,J＝7.3Hz),1.21(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:266.30[M+H]+。1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(1)的合成向配備有磁力攪拌器的10mL圓底燒瓶中裝入1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(0.042g，0.158mmol)，并于室溫溶于干燥DCM(4mL)中，然后用冰浴冷卻至0℃。將溶液于該溫度用二氯甲烷中的三溴化硼1M(0.39mL，0.390mmol)處理，然后攪拌30分鐘。將反應用DCM(20mL)稀釋并與水(10mL)一起攪拌10分鐘。分離有機層，用無水硫酸鈉脫水，蒸除溶劑，粗產物用硅膠純化。得到為黃色固體的1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(0.029g，0.115mmol，Y＝73％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.90(bs,1H,OH),7.83-7.79(m,1H),7.79-7.74(m,1H),7.51-7.43(m,1H),7.28-7.21(m,1H),2.80(q,2H,J＝7.3Hz),1.30(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:252.12[M+H]+,MS(ES1-)m/z:250.11[M-1]-。實施例22-(3-氟苯基)-5-丙酰基-1,3-噻唑-4-醇鈉(2)的合成向配備有磁力攪拌器的25mL圓底燒瓶中裝入1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(0.034g，0.135mmol)，并于室溫溶于甲醇(6mL)中。然后用等量的NaOH(0.135mL，0.135mmol，1M，在甲醇中)處理該溶液，并攪拌30分鐘。將揮發物真空蒸餾，以定量產率得到為灰白色固體的標題化合物(0.037g，0.135mmol)。1H-NMR(DMSO-d6):δ7.69-7.66(m,1H),7.63-7.60(m,1H),7.53-7.47(m,1H),7.32-7.29(m,1H),2.77(q,2H,J＝7.4Hz),0.97(t,3H,J＝7.4Hz)。MS(ES1+)m/z:252.25[M+H]+。實施例31-(2-(3-氟苯基)-4-羥基噻唑-5-基)乙酮(4)的合成從如實施例1-中間體a中所述制備的3-氟苯硫代甲酰胺(0.110g，0.70mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺(Weinreb’samide))。使用甲基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-(2-(3-氟苯基)-4-甲氧基噻唑-5-基)乙酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為灰白色固體的標題化合物(0.030g，0.13mmol，Y＝87％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.85-7.71(m,2H),7.55-7.40(m,1H),7.30-7.19(m,1H),2.50(s,3H)。MS(ES1+)m/z:238.0[M+H]+。實施例41-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]-2-甲基丙-1-酮(5)的合成從如實施例1-中間體a中所述制備的3-氟苯硫代甲酰胺(0.070g，0.45mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用異丙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]-2-甲基丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.021g，0.08mmol，Y＝88％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.85-7.71(m,2H),7.55-7.40(m,1H),7.30-7.19(m,1H),2.50(m,1H),1.30(d,6H,J＝7.0Hz)。MS(ES1+)m/z:266.0[M+H]+。實施例51-[4-羥基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(7)的合成從如實施例1-中間體a中所述制備的噻吩-2-硫代甲酰胺(0.074g，0.52mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.022g，0.09mmol，Y＝88％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.70(s,1H),7.52(s,1H),7.11(s,1H),2.70(q,2H,J＝7.1Hz),1.28(t,3H,J＝7.1Hz)。MS(ES1+)m/z:240.1[M+H]+。實施例61-[4-羥基-2-(2-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(9)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的2-甲基苯硫代甲酰胺(0.152g，1.0mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(2-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(2-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為褐色固體的標題化合物(0.44g，0.18mmol，Y＝89％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.95-7.83(m,1H),7.48-7.21(m,3H),2.78(q,2H,J＝7.1Hz),1.28(t,3H,J＝7.1Hz)。MS(ES1+)m/z:248.1[M+H]+。實施例71-[2-(2-溴苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(11)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的2-溴苯硫代甲酰胺(0.053g，0.15mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(2-溴苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[2-(2-溴苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.018g，0.06mmol，Y＝87％)。1H-NMR(CDCl3):δ8.35-8.28(m,1H),7.75-7.65(m,1H),7.50-7.37(m,1H),7.37-7.28(m,1H),2.80(q,2H,J＝7.0Hz),1.28(t,3H,J＝7.0)。MS(ES1+)m/z:312.10[M+H]+。實施例81-[2-(2-羥基苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(13)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的2-甲氧基苯硫代甲酰胺(0.061g，0.35mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-2-(2-甲氧基苯基)-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使魏因勒卜酰胺經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(2-甲氧基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼(4當量)將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.016g，0.07mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ12.27(s,1H,OH),11.55(s,1H,OH),7.69-7.61(m,1H),7.40-7.30(m,1H),7.08-6.98(m,1H),6.93-6.86(m,1H),2.77(q,2H,J＝7.0Hz),1.26(t,3H,J＝7.0Hz)。MS(ES1+)m/z:250.10[M+H]+。實施例91-[2-(3-溴苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(14)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的3-溴苯硫代甲酰胺(0.20g，0.92)mmol起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(3-溴苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[2-(3-溴苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為白色固體的標題化合物(0.055g，0.17mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.89(bs,1H,OH),8.23-8.18(m,1H),7.89-7.91(m,1H),7.69-7.63(m,1H),7.41-7.34(m,1H),2.80(q,2H,J＝7.0Hz),1.30(t,3H,J＝7.0Hz)。MS(ES1+)m/z:312.1[M+H]+。實施例101-[2-(呋喃-2-基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(15)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的呋喃-2-硫代甲酰胺(0.101g，0.79mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(呋喃-2-基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[2-(呋喃-2-基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.034g，0.15mmol，Y＝90％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.60(s,1H),7.15(d,1H,J＝3.6Hz),6.52(d,1H,J＝3.6Hz),2.95(q,2H,J＝7.3Hz),1.21(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:224.3[M+H]+。實施例111-[4-羥基-2-(1H-吡咯-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(16)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的1H-吡咯-2-硫代甲酰胺(0.103g，0.82)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(1H-吡咯-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(1H-吡咯-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.034g，0.15mmol，Y＝93％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.89(bs,1H,OH),8.10(vbs,1HNH),7.10-6.80(m,2H),6.20-6.05(m,1H),2.95(q,2H,J＝7.3Hz),1.21(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:223.2[M+H]+。實施例121-[4-羥基-2-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(17)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的1-甲基-1H-吡咯-2-硫代甲酰胺(0.105g，0.75mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.034g，0.14mmol，Y＝91％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.51(bs,1H,OH),7.10-6.95(m,1H),6.95-6.75(m,1H),6.19-6.05(m,1H),3.73(s,3H),2.95(q,2H,J＝7.3Hz),1.21(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:237.3[M+H]+。實施例131-[4-羥基-2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(18)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的1-甲基-1H-咪唑-5-硫代甲酰胺(0.203g，1.44mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.065g，0.27mmol，Y＝94％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.65(bs,1H,OH),7.91-7.70(m,1H),7.52-7.40(m,1H),3.33(s,3H),2.95(q,2H,J＝7.3Hz),1.21(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:238.4[M+H]+。實施例141-[4-羥基-2-(1H-咪唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(19)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的1H-咪唑-5-硫代甲酰胺(0.198g，1.56mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(1H-咪唑-5-基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(1H-咪唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.062g，0.28mmol，Y＝89％)。1H-NMR(CDCl3):δ8.20-8.10(m,1H)；7.40-7.30(m,1H),2.95(q,2H,J＝7.3Hz),1.20(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:224.4[M+H]+。實施例151-[4-羥基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(20)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的1-甲基-1H-吡唑-4-硫代甲酰胺(0.211g，1.49mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.064g，0.27mmol，Y＝92％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.51(vbs,1H,OH),7.90-8.75(m,1H)；7.65-7.45(m,1H),3.70(s,3H),2.95(q,2H,J＝7.3Hz),1.20(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:238.5[M+H]+。實施例161-[4-羥基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丁-1-酮(21)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的噻吩-2-硫代甲酰胺(0.20g，1.39mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用丙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丁-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.067g，0.26mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.37(vbs,1H,OH),7.80-7.60(m,2H)；7.22-7.09(m,1H),2.51(t,2H,J＝7.5Hz),1.71(m,2H),0.92(t,3H,J＝7.4Hz)。MS(ES1+)m/z:254.4[M+H]+。實施例171-[4-羥基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]-3-甲基丁-1-酮(22)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的噻吩-2-硫代甲酰胺(0.150g，1.04mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用異丁基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-基]-3-甲基丁-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.053g，0.20mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.45(vbs,1H,OH),7.80-7.60(m,2H)；7.22-7.09(m,1H),2.49(d,2H,J＝7.3Hz),1.90-1.70(m,1H),0.89(d,6H,J＝7.2Hz)。MS(ES1+)m/z:268.2[M+H]+。實施例181-[4-羥基-2-(1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(23)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的1,2,4-噁二唑-3-硫代甲酰胺(0.151g，1.16mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(1,2,4-噁二唑-3-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.049g，0.22mmol，Y＝88％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.62(bs,1H,OH),8.45(s,1H),2.95(q,2H,J＝7.3Hz),1.20(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:226.1[M+H]+。實施例191-[4-羥基-2-(1,2-噁唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(24)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的1,2-噁唑-5-硫代甲酰胺(0.148g，1.15mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(1,2-噁唑-5-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(1,2-噁唑-5-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.048g，0.22mmol，Y＝89％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.41(bs,1H,OH),7.51(d,1H,J＝3.1Hz),6.80(d,1H,J＝3.1Hz),2.96(q,2H,J＝7.3Hz),1.22(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:225.3[M+H]+。實施例201-[4-羥基-2-(吡啶-3-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(25)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的吡啶-3-硫代甲酰胺(0.186g，1.34mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(吡啶-3-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(吡啶-3-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.060g，0.26mmol，Y＝89％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.56(bs,1H,OH),9.15-9.00(m,1H),8.75-8.65(m,1H),8.35-8.25(m,1H),7.66-7.56(m,1H),2.94(q,2H,J＝7.3Hz),1.20(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:235.3[M+H]+。實施例211-[4-羥基-2-(吡啶-4-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(26)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的吡啶-4-硫代甲酰胺(0.175g，1.27mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(吡啶-4-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(吡啶-4-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.054g，0.23mmol，Y＝92％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.56(bs,1H,OH),9.15-9.00(m,2H),8.55-8.65(m,2H),2.94(q,2H,J＝7.3Hz),1.20(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:235.3[M+H]+。實施例221-[4-羥基-2-(吡啶-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(27)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的吡啶-2-硫代甲酰胺(0.214g，1.55mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(吡啶-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(吡啶-2-基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.065g，0.28mmol，Y＝91％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.56(bs,1H,OH),8.75-8.65(m,1H),8.15-8.05(m,1H),7.95-7.85(m,1H),7.66-7.56(m,1H),2.94(q,2H,J＝7.3Hz),1.20(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:235.3[M+H]+。實施例231-[4-羥基-2-(3-羥基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(28)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的3-甲氧基苯硫代甲酰胺(0.105g，0.63mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-2-(3-甲氧基苯基)-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使魏因勒卜酰胺經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(3-甲氧基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼(4當量)將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.029g，0.12mmol，Y＝91％)。1H-NMR(CDCl3):δ12.37(s,1H,OH),11.45(s,1H,OH),7.70-7.10(m,4H),2.82(q,2H,J＝7.3Hz),1.17(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:250.3[M+H]+。實施例241-[4-羥基-2-(4-羥基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(29)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的4-甲氧基苯硫代甲酰胺(0206g，1.23mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使魏因勒卜酰胺經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼(4當量)將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.058g，0.23mmol，Y＝90％)。1H-NMR(CDCl3):δ12.41(s,1H,OH),11.55(s,1H,OH),7.75-7.10(m,4H),2.82(q,2H,J＝7.3Hz),1.17(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:250.3[M+H]+。實施例251-[4-羥基-2-(3-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(30)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的3-甲基苯硫代甲酰胺(0.086g，0.57mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(3-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(3-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.027g，0.10mmol，Y＝96％)。1H-NMR(CDCl3):δ,11.55(s,1H,OH),7.70-7.47(m,2H),7.45-7.10(m,2H),2.80(q,2H,J＝7.3Hz),2.32(s,3H),1.15(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:248.4[M+H]+。實施例261-[4-羥基-2-(4-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(31)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的4-甲基苯硫代甲酰胺(0.087g，0.58mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(4-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(4-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.027g，0.10mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ,11.55(bs,1H,OH),7.85-7.70(m,2H),7.35-7.05(m,2H),2.80(q,2H,J＝7.3Hz),2.32(s,3H),1.15(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:248.2[M+H]+。實施例271-[2-(3-氨基苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(32)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的3-硝基苯硫代甲酰胺(0.235g，1.35mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(3-硝基苯基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(3-硝基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮。然后將該化合物溶解于甲醇中，并與5當量的氯化亞錫二水合物混合，然后在微波裝置中于100℃輻射30分鐘。在硝基完全還原，酸堿萃取和后處理之后，得到純的1-[2-(3-氨基苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮。用三溴化硼使后者經受脫保護條件，得到為黃色固體的標題化合物(0.033g，0.13mmol，最后兩個步驟Y＝51％)。1H-NMR(CDCl3):δ,11.72(vbs,1H,OH),7.74(bs,1H,NH2),7.22(bs,1H,NH2)7.20-6.89(m,3H),6.72-6.60(m,1H),2.80(q,2H,J＝7.3Hz),1.15(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:249.3[M+H]+。實施例281-[2-(4-氨基苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(33)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的4-硝基苯硫代甲酰胺(0.234g，1.35mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(4-硝基苯基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[4-甲氧基-2-(4-硝基苯基)-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮。將該化合物溶解于甲醇中，與5當量的氯化亞錫二水合物混合，然后在微波裝置中于100℃輻射30分鐘。在硝基完全還原，酸萃取和后處理之后，得到純的1-[2-(4-氨基苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，隨后用三溴化硼脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.032g，0.12mmol，最后兩個步驟Y＝49％)。1H-NMR(CDCl3):δ,11.63(bs,1H,OH),7.75-7.45(m,2H；bs1H,NH2),6.89(vbs,1H,NH2)6.65-6.40(m,2H),2.80(q,2H,J＝7.3Hz),1.15(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:249.4[M+H]+。實施例291-{4-羥基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1,3-噻唑-5-基}丙-1-酮(34)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的3-(溴)苯硫代甲酰胺(0.429g，1.98mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(3-溴苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者化合物經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[2-(3-溴苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮。然后將溴芳基噻唑衍生物溶解于無水甲苯中，并用5當量的叔丁醇鈉、1.5當量的甲胺、0.1當量的2-(二-叔丁基膦基)聯苯、0.05當量的三(二亞芐基-丙酮)二鈀(0)處理，密封在瓶中，然后在微波裝置中于100℃輻射1小時。色譜法之后，得到1-{4-甲氧基-2-[3-(甲基氨基)苯基]-1,3-噻唑-5-基}丙-1-酮，然后用三溴化硼脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.020g，0.08mmol，最后兩個步驟Y＝21％)。1H-NMR(CDCl3):δ,11.60(bs,1H,OH),7.25-6.90(m,3H),6.75-6.65(m,1H),4.35(vbs,1H,NH),3.05(s,3H),2.93(q,2H,J＝7.3Hz),1.25(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:263.4[M+H]+。實施例301-{4-羥基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1,3-噻唑-5-基}丙-1-酮(35)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的4-(溴)苯硫代甲酰胺(0.50g，2.32mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(4-溴苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[2-(4-溴苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮。然后將溴芳基噻唑衍生物溶解于無水甲苯中，并用5當量的叔丁醇鈉、1.5當量的甲胺、0.1當量的2-(二-叔丁基膦基)聯苯、0.05當量的三(二亞芐基-丙酮)二鈀(0)處理，密封在瓶中，然后在微波裝置中于100℃輻射1小時。色譜法之后，得到1-{4-甲氧基-2-[4-(甲基氨基)苯基]-1,3-噻唑-5-基}丙-1-酮，然后通過三溴化硼的作用進行O-脫甲基化，得到為黃色固體的標題化合物(0.015g，0.06mmol，最后兩個步驟Y＝13％)。1H-NMR(CDCl3):δ,11.60(bs,1H,OH),7.72-7.43(m,2H；),6.63-6.39(m,2H),4.35(vbs,1H,NH),3.07(s,3H),2.96(q,2H,J＝7.3Hz),1.23(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:263.4[M+H]+。實施例311-[2-(4-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮(36)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的4-氟苯硫代甲酰胺(0.122g，0.78mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(4-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用乙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-(4-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.037g，0.15mmol，Y＝91％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.85(bs,1H,OH),7.95-7.80(m,2H),7.29-7.09(m,2H),2.80(q,2H,J＝7.3Hz),1.30(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:252.12[M+H]+,MS(ES1-)m/z:250.11[M-H]-。實施例321-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丁-1-酮(37)的合成從如實施例1-中間體a中所述制備的3-氟苯硫代甲酰胺(0.124g，0.80mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用丙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基)丁-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為淺黃色固體的標題化合物(0.028g，0.10mmol，Y＝81％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.90(bs,1H,OH),7.85-7.71(m,2H),7.50-7.40(m,1H),7.27-7.19(m,1H),2.72(t,2H,J＝7.3Hz),1.83(q,2H,J＝7.3Hz),1.05(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:266.30[M+H]+。實施例331-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]-3-甲基丁-1-酮(38)的合成從如實施例1-中間體a中所述制備的3-氟苯硫代甲酰胺(0.112g，0.72mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用異丁基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]-3-甲基丁-1-酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.033g，0.12mmol，Y＝73％)。1H-NMR(CDCl3):δ12.10(bs,1H,OH),7.83-7.73(m,2H),7.50-7.43(m,1H),7.28-7.21(m,1H),2.62(d,2H,J＝7.3Hz),2.34(m,1H),1.05(d,6H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:280.23[M+H]+。實施例341-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]-2-甲氧基乙酮(39)的合成將如實施例3中所述制備的1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]乙酮(0.200g，0.79mmol)溶解于10mL干燥DCM中，并加入N-溴琥珀酰亞胺(0.142g，0.79mmol)。于室溫將所得混合物攪拌3h。在真空蒸餾下蒸發溶劑，得到2-溴-1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]乙酮，其不經進一步純化使用。然后將化合物溶于5mL冰醋酸中，加入乙酸鈉(0.65g，7.9mmol)，將混合物于120℃加熱2小時。將溶液用30mL水稀釋，用乙醚(20mL×3)洗滌。通過閃式色譜法(正己烷：乙酸乙酯9:1作為洗脫劑)純化2-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]-2-氧代乙基乙酸酯。將后者化合物溶解于10mL1,4-二氧六環中，加入2mL2MNaOH。于室溫攪拌溶液2小時。將溶液用10mL2MHCl稀釋，并用乙酸乙酯萃取該化合物。得到為橙色油的1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]-2-羥基乙酮，產率65％。將后者化合物(0.089g，0.33mmol)溶解于5mL干燥DMF中，于0℃加入0.016g(0.66mmol)NaH(60％w/w)。然后加入41μL(0.66mmol)碘甲烷，于室溫攪拌溶液5小時。將混合物用10mL飽和的NH4Cl淬滅，并用乙酸乙酯萃取該化合物。通過閃式色譜法純化粗產物，用正己烷：乙酸乙酯9:1作為洗脫液，以定量產率得到1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]-2-甲氧基乙酮。于室溫將1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]-2-甲氧基乙酮溶解于干燥DCM(4mL)中，然后用冰浴冷卻至0℃。在該溫度將溶液用二氯甲烷中的三溴化硼1M(0.66mL，0.66mmol)處理，然后攪拌30分鐘。將反應用DCM(10mL)稀釋并與水(10mL)一起攪拌10分鐘。分離有機層，用無水硫酸鈉脫水，蒸除溶劑，粗產物用硅膠純化。得到為黃色固體的1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]-2-甲氧基乙酮(0.019g，0.071mmol，Y＝43％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.83-7.71(m,2H),7.42-7.35(m,1H),7.28-7.21(m,1H),2.85(s,2H),2.37(s,3H)。MS(ES1+)m/z:268.21[M+H]+。實施例351-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙烷-1-硫酮(40)的合成將如實施例1-中間體g中所述制備的1-[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]丙-1酮(0.120g，0.45mmol)溶解于5mL干燥THF中。加入勞氏試劑(0.273g，0.675mmol)，將所得混合物在密封管中于130℃加熱2小時。于室溫冷卻溶液，并通過真空蒸餾除去溶劑。通過閃式色譜法純化粗產物(正己烷：乙酸乙酯85:15作為洗脫液)，得到為黃色油的1-[2-(3-氟苯基)-4-甲氧基-1,3-噻唑-5-基]丙烷-1-硫酮(0.037mg，0.13mmol，Y＝29％)。如對于化合物1所述，將后者化合物用三溴化硼脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.030g，0.11mmol，Y＝86％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.81(bs,1H,OH),7.81-7.76(m,1H),7.71-7.64(m,1H),7.61-7.53(m,1H),7.28-7.20(m,1H),2.85(q,2H,J＝7.3Hz),1.51(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:268.35.12[M+H]+。實施例362-(3-氟苯基)-4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(3)的合成從如實施例1-中間體a中所述制備的3-氟苯硫代甲酰胺(0.055g，0.35mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。然后將后者用三溴化硼直接脫保護，得到為淺黃色固體的2-(3-氟苯基)-4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(0.019g，0.07mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.85-7.70(m,2H),7.45-7.35(m,1H),7.25-7.19(m,1H),3.85(s,3H),3.37(s,3H)。MS(ES1+)m/z:283.9[M+H]+。實施例374-羥基-N-甲氧基-N-甲基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(6)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的噻吩-2-硫代甲酰胺(0.081g，0.57mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(噻吩-2-基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。將后者用三溴化硼直接脫保護，得到為灰白色固體的標題化合物(0.030g，0.11mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.68(s,1H),7.48(s,1H),7.08(s,1H),3.80(s,3H),3.35(s,3H)。MS(ES1+)m/z:271.1[M+H]+。實施例384-羥基-N-甲氧基-N-甲基-2-(2-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(8)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的2-甲基苯硫代甲酰胺(0.103g，0.68mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-N-甲基-2-(2-甲基苯基)-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。將后者用三溴化硼直接脫保護，得到為灰白色固體的標題化合物(0.037g，0.13mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ12.10(s,1H,OH),7.84-7.78(m,1H),7.41-7.20(m,3H),3.80(s,3H),3.38(s,3H),2.62(s,3H)。MS(ES1+)m/z:279.9[M+H]+。實施例392-(2-溴苯基)-4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(10)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的2-溴苯硫代甲酰胺(0.051g，0.15mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(2-溴苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。將后者用三溴化硼直接脫保護，得到為白色固體的標題化合物(0.021g，0.06mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ12.00(s,1H,OH),8.35-8.21(m,1H),7.78-7.68(m,1H),7.50-7.37(m,1H),7.37-7.22(m,1H),3.83(s,3H),3.39(s,3H)。MS(ES1+)m/z:343.04[M+H]+。實施例404-羥基-2-(2-羥基苯基)-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(12)的合成從與實施例1-中間體a中所述類似制備的2-甲氧基苯硫代甲酰胺(0.120g，0.72mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到N,4-二甲氧基-2-(2-甲氧基苯基)-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。將魏因勒卜酰胺用三溴化硼(4當量)直接脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.040g，0.14mmol，Y＝95％)。1H-NMR(CDCl3):δ12.29(s,1H,OH),11.60(s,1H,OH),7.70-7.62(m,1H),7.41-7.32(m,1H),7.10-7.02(m,1H),6.95-6.89(m,1H),3.83(s,3H),3.38(s,3H)。MS(ES1+)m/z:281.1[M+H]+。實施例412-(3-氟苯基)-4-羥基-N-甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-硫代甲酰胺(41)的合成將如實施例1--中間體f中所述制備的2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(0.100g，0.34mmol)溶解于5mL干燥THF中。加入勞氏試劑(0.361g，0.51mmol)，將所得混合物于70℃加熱2小時。于室溫冷卻溶液，并通過真空蒸餾除去溶劑。通過閃式色譜法純化粗產物(正己烷：乙酸乙酯85:15作為洗脫液)，得到為黃色油的2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-硫代甲酰胺(0.072g，0.23mmol，Y＝68％)。如對于化合物1所述，將后者化合物用三溴化硼脫保護，得到為黃色固體的標題化合物(0.057g，0.19mmol，Y＝85％)。1H-NMR(CDCl3):δ7.83-7.69(m,2H),7.44-7.35(m,1H),7.26-7.20(m,1H),3.95(s,3H),3.45(s,3H)。MS(ES1+)m/z:299.20[M+H]+。實施例422-(3-氟苯基)-5-[(1E)-N-甲氧基丙亞胺酰基]-1,3-噻唑-4-醇(42)的合成向2-氯-3-氧代戊酸甲酯(0.200g，1.215mmol)在5mL乙醇中的溶液中加入甲氧基胺鹽酸鹽(0.152g，1.823mmol)和乙酸銨(0.149g，1.823mmol)，將所得混合物于室溫攪拌4小時。將混合物用水(10mL)稀釋，用乙醚(20mL)萃取。然后將有機相用干燥硫酸鈉脫水，并通過真空蒸餾除去溶劑。將粗產物溶解于5mL乙醇中并且倒入微波瓶中；然后加入0.093g(0.60mmol)3-氟苯硫代甲酰胺。將瓶密封并于100℃輻射60分鐘。于室溫冷卻溶液，并通過真空蒸餾除去溶劑。通過閃式色譜法純化粗產物(正己烷：乙酸乙酯90:10作為洗脫液)，得到為黃色油的2-(3-氟苯基)-5-[(1E)-N-甲氧基丙亞胺酰基]-1,3-噻唑-4-醇(0.066mg，0.23mmol，Y＝39％)。1H-NMR(CDCl3):δ10.45(bs,1H,OH),7.75-7.65(m,2H),7.45-7.38(m,1H),7.18-7.11(m,1H),4.00(s,3H),2.68(q,2H,J＝7.3Hz),1.22(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:281.12[M+H]+。實施例432-(3-氟苯基)-5-丙亞胺酰基-1,3-噻唑-4-醇(43)的合成向2-氯-3-氧代戊酸甲酯(0.107g，0.650mmol)在1.5mL乙醇中的溶液中加入O-(三甲基硅基)羥胺(0.120g，0.975mmol)和乙酸銨(0.125g，1.625mmol)，將所得混合物于室溫攪拌1h。將粗產物轉移至微波瓶中，然后加入0.052g(0.650mmol)3-氟苯硫代甲酰胺。將瓶密封并于120℃輻射50分鐘。于室溫冷卻溶液，并通過真空蒸餾除去溶劑。通過閃式色譜法純化粗產物(二氯甲烷：甲醇99:1作為洗脫液)，得到為黃色油的2-(3-氟苯基)-5-丙亞胺酰基-1,3-噻唑-4-醇(0.078mg，0.31mmol，Y＝48％)。1H-NMR(CDCl3):δ10.50(bs,1H,OH),7.87-7.79(m,2H),7.51-7.43(m,1H),7.26-7.20(m,1H),2.60(q,2H,J＝7.3Hz),1.42(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:251.34[M+H]+。實施例442-(3-氟苯基)-5-[(1E)-N-羥基丙亞胺酰基]-1,3-噻唑-4-醇(44)的合成然后將0.040g(0.143mmol)2-(3-氟苯基)-5-[(1E)-N-甲氧基丙亞胺酰基]-1,3-噻唑-4-醇(實施例42)在干燥二氯甲烷(5mL)中的溶液用冰浴冷卻至0℃。在該溫度將溶液用二氯甲烷中的三溴化硼1M(0.36mL，0.36mmol)處理，然后攪拌30分鐘。將反應用DCM(5mL)稀釋并與水(5mL)一起攪拌10分鐘。分離有機層，用無水硫酸鈉脫水，蒸除溶劑，粗產物用硅膠純化。得到為橙色固體的2-(3-氟苯基)-5-[(1E)-N-羥基丙亞胺酰基]-1,3-噻唑-4-醇(0.031g，0.118mmol，Y＝83％)。1H-NMR(CD3OD):δ7.81-7.78(m,1H),7.77-7.73(m,1H),7.50-7.22(m,2H),2.81(q,2H,J＝7.3Hz),1.54(t,3H,J＝7.3Hz)。MS(ES1+)m/z:267.22[M+H]+。實施例45環丙基[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]甲酮(45)的合成從如實施例1-中間體a中所述制備的3-氟苯硫代甲酰胺(0.085g，0.55mmol)起始，應用噻唑合成的一般程序，得到2-(3-氟苯基)-N,4-二甲氧基-N-甲基-1,3-噻唑-5-甲酰胺(魏因勒卜酰胺)。使用環丙基氯化鎂使后者經受與一般程序中限定的相同合成條件，得到環丙基[2-(3-氟苯基)-4-羥基-1,3-噻唑-5-基]甲酮，然后用三溴化硼將其脫保護，得到為淺褐色固體的標題化合物(0.121g，0.46mmol，Y＝81％)。1H-NMR(CDCl3):δ11.50(bs,1H,OH),7.83-7.78(m,2H),7.53-7.41(m,1H),7.29-7.21(m,1H),2.38(m,1H),0.95-0.88(m,2H),0.63-0.55(m,2H)。MS(ES1+)m/z:264.40[M+H]+。實施例46體外活性的評價a.表達人TRPM8的陽性克隆的克隆、測序、轉染和選擇在HEK293細胞中通過穩定的純克隆選擇和用熒光鈣敏感染料的功能表征開展了用于鑒定TRPM8受體拮抗劑的功能性基于細胞的試驗(優化以允許在FLIPRTETRA的高通量篩選)。將TRPM8克隆到pcDNA3哺乳動物表達載體的多克隆位點；獲得的構建體pcDNA3/hTRPM8被完全序列驗證并用于HEK293細胞系的轉染。將用TRPM8基因穩定轉染的HEK293細胞保持在最低必需培養基中。通過電穿孔用pcDNA3/hTRPM8載體轉染細胞，然后用含有0.8mg/mlG418的培養基選擇細胞10-15天。使用以下商購化合物作為TRPM8通道參照化合物以測試HEK293/hTRPM8細胞系的激動和拮抗活性：活化劑：甲醇(SIGMA目錄號M2772)WS-3，(N-乙基-5-甲基-2-(1-甲基乙基)環己烷甲酰胺)(SIGMA目錄號W345501)阻斷劑：辣椒平(Capsazepine)(SIGMA目錄號C191)使用FLIPR儀器進行實驗活性測定。在FLIPR384基于1mM薄荷醇響應選擇功能性克隆。選擇兩個最佳響應克隆，以1個細胞/孔的細胞密度稀釋，并在FLIPR384用1mM薄荷醇分析。使用鈣依賴性熒光信號分析TRPM8受體對參考激動劑，薄荷醇的響應。還在HEK/TRPM8克隆上在電壓鉗配置中獲得膜片鉗記錄，以驗證受體藥理學并確定激動劑劑量–響應曲線和EC50值。將HEK293細胞于室溫保持在具有1.5-2.5MΩ電阻的火拋光硼硅酸鹽玻璃移液管上，用于記錄施用藥物后的電流。薄荷醇的施用在所選的HEK/hTRPM8克隆中誘導劑量依賴性內向電流(計算的EC50值＝58μM)。在未轉染的HEK293細胞中沒有記錄到薄荷腦誘導的電流。為了確定辣椒平對于薄荷醇激動劑響應的拮抗活性并驗證在不同天數的實驗中拮抗劑響應穩定性，在FLIPR384在24小時后在可變濃度的拮抗劑(100nM至316μM)存在下分析選擇的TRPM8的克隆。所選擇的克隆顯示非常好的拮抗活性的穩定性和再現性(計算的IC50值＝20μM)。總之，最好的克隆的特征在于：1-藥理學：對不同實驗的激動EC50和拮抗IC50測定；2-最佳細胞密度和接種時間；3-DMSO敏感性；4-配體穩定性；5-膜片鉗分析。b.設置用于鑒定TRPM8拮抗劑的篩選使用以下商購化合物作為配體：活化劑：冷卻劑10(TakasagoCASN.87061-04-9)阻斷劑：辣椒平(SIGMA目錄號D_5879)使用FLIPRTETRA儀器進行實驗活性測定。將用TRPM8基因穩定轉染的HEK293細胞保持在最低必需培養基中。在384孔微量滴定板形式中使用Ca2+遷移依賴性熒光信號來分析TRPM8細胞系對化合物庫的響應。使用帶有ICCD相機的FLIPRTETRA(MDC)進行分析。試驗的執行涉及三種微量滴定板的使用：1.試驗板，含有負載染料的細胞，并如下制備：將細胞以15000c/孔接種在聚-D-賴氨酸包被的384孔微量滴定板的完全培養基(25μl/孔)中。接種后24小時，通過微型板清洗器用臺式(Tyrode)試驗緩沖液洗滌細胞板，并在每個孔中留下10μL臺式試驗緩沖液。然后通過移液器將細胞用10μL/孔的Fluo-4NW染料溶液負載。將每瓶Fluo4-NW染料(MolecularProbes目錄號F36206，組分A)重懸于8mL臺式試驗緩沖液中，并補充100μL水溶性丙磺舒(MolecularProbes目錄號F36206，組分B)。將負載染料的細胞板于室溫溫育1h。2.化合物稀釋板，含有稀釋的測試化合物，如下配制：1列：含有試驗緩沖液加最終0.5％DMSO的孔2列：在第一次注射中的最大信號控制(最大響應：EC100處的冷卻劑10，100μM)和第一次注射中的最小信號控制(試驗緩沖液加最終0.5％DMSO)之間交替的孔；3-22列：含有試驗緩沖液加最終0.5％DMSO的孔。向這些孔中以3x濃度加入待測試的化合物。23列：在試驗緩沖液加最終0.5％DMSO中在第二次注射試驗中的最大信號控制(試驗緩沖液)和第二次注射中的最小信號控制(拮抗劑辣椒平IC100，50μM)之間的交替孔；24列：含有辣椒平(拮抗劑)的孔，8個濃度，一式兩份，在試驗緩沖液加最終0.5％DMSO中的最終濃度為50μM、25μM、6.25μM、3.15μM、1.56μM、780nM、309nM。3.活化劑板，含有EC80處的激動劑冷卻劑10，如下配制：1列：冷卻劑10(激動劑)8個劑量響應濃度，一式兩份，在試驗緩沖液中終濃度為100μM、31.6μM、10μM、3.16μM、1μM、316nM、100nM、31.6nM；2-24列：在試驗緩沖液中EC80處(3倍濃縮，最終20μM)的冷卻劑10(激動劑)。根據包括以下步驟的程序進行測試：1.通過FLIPRTETRA將化合物板的孔中所含的樣品加入到試驗板的相應孔中，從而導致在測試化合物的3-22列中以3x濃度向試驗板的細胞中添加。在試驗孔中不進行混合，并且記錄發射的熒光信號300秒。2.通過FLIPRTETRA將活化劑板的孔中所含的樣品加入到試驗板的相應孔中，從而導致在除了測試化合物之外還在激動劑化合物的試驗板3-22列中添加。記錄發射的熒光信號180秒。1、2、23和24列用作對照。特別地：“第一次注射中的最大信號控制”表示EC100處的冷卻劑10激動劑響應，“第二次注射中的最大信號控制”表示在預注射試驗緩沖液存在下EC80處(10μM)的激動劑，“在第一次注射中的最小信號控制”對應于試驗緩沖液注射，并且“第二次注射中的最小信號控制”表示在預注射的參照拮抗劑辣椒平以IC100(50μM)存在下的EC80(20μM)處的激動劑。在靶激活(TA)階段期間，在EC80處參照激動劑的注射在MAX信號對照孔中給出熒光信號的增加，其中預先注射CA中的試驗緩沖液，而由于參照抑制劑辣椒平的預注射，在MIN信號對照孔中的響應完全被抑制。該試驗的目的是找到TRPM8活性的拮抗劑；為此目的，測量了在TA階段期間熒光信號的變化。計算和分析幾個參數(Z'因子、板間變異性(variability)、板內變異性、日間變異性、拮抗劑劑量響應和IC50測定、激動劑劑量響應和EC50測定)。對于拮抗劑劑量響應和IC50測定，包括辣椒平(參照拮抗劑)作為對照，并計算所有試驗化合物的IC50值。測試了化合物1-45，并且都顯示2μM以下的IC50值；大多數化合物具有0.1μM以下的IC50，其中一些具有0.03μM以下的IC50。實施例47體內活性的評價疼痛的慢性壓迫性模型將根據BennettGJ等人，Pain.33:87-107,1988所述的方法通過坐骨神經的結扎誘導神經性疼痛行為。簡言之，將雄性斯普拉-道來氏(Sprague-Dawley)大鼠麻醉(100mg/kg氯胺酮和10mg/kg甲苯噻嗪i.p.)，并且通過穿過股二頭肌的鈍性分離，將左坐骨神經暴露在大腿水平。在坐骨神經的三根分叉部附近，約12mm的神經將被剝離粘附的組織，并且四根結扎物將以約1mm的間距松弛地系在其周圍，使得上神經的循環將被保持。如此受影響的神經的長度為6-8mm長。在手術后的第二天允許動物恢復并使用。假手術動物代表手術但未結扎的大鼠。進行研究以確定化合物2的抗痛覺超敏作用。在結扎后第7和14天，神經性大鼠接受單劑量的化合物2；在治療后1、3和5h，使用動態足底觸覺計(DPA)和丙酮滴降來評價機械性和冷痛覺超敏。所有數據表示為平均值±SEM。使用GraphPadPrism4.01進行數據分析。通過雙因素方差分析進行統計分析，視情況隨后進行用于多重比較的鄧尼特檢驗。統計學顯著性設定為p<0.05。在神經誘導的損傷后第7天和第14天以10mg/kg的劑量口服施用化合物2，在施用后3小時和5小時顯著減弱冷和機械性痛覺超敏。根據其藥代動力學屬性，在處理后3小時達到最大活性(對兩個參數具有約50％的抑制作用，圖1a、1b、2a和2b)。實施例48選擇性分析a.GPCR選擇性使用放射性配體結合試驗測試化合物2以評價對克隆的人GPCR(G-蛋白偶聯受體)的活性。以10μM一式兩份測試化合物，結果總結于表1中。表1從表1可以注意到，化合物2對眾所周知參與疼痛控制的廣泛范圍的選擇的GPCR(包括毒蕈堿M3、CB2、BK1，αeβ腎上腺素能)顯示出高選擇性。這些數據支持化合物2和一般所有本發明化合物觀察到的體內功效潛在強烈地依賴于TRPM8阻斷。b.離子通道選擇性為了更具體地解決潛在的選擇性問題，對化合物2進行針對TRPV1和TRPV4離子通道以及針對TRPA1的反分析，TRPV1和TRPV4離子通道都參與傷害感受(JhaveriMD,等人2005.Eur.J.Neurosci.22(2):361–70,BrierleySM等人,2008,Gastroenterology.2008Jun；134(7):2059-69)。結果總結于表2中。用鈣流入試驗評價化合物2作為TRPV1拮抗劑的能力。在陽性對照激動劑(辣椒素)存在下引發的信號設定為100％，并且在拮抗劑(釕紅)存在下的信號設定為0。平行地，用鈣流入試驗評價化合物2作為TRPV4拮抗劑的能力。在陽性對照激動劑(GSK1016790A)存在下引發的信號設定為100％，并且在拮抗劑(釕紅)存在下的信號設定為0。用鈣流入試驗評價化合物2作為TRPA1拮抗劑的能力。在陽性對照激動劑(異硫氰酸烯丙酯，AITC)存在下引發的信號設定為100％，并且在拮抗劑(釕紅)存在下的信號設定為0。表2化合物IC50(TRPV1)IC50(TRPV4)IC50(TRPA1)2>105M>105M>105M數據強烈地突出了化合物2對TRPV1、TRPV4和TRPA1的極大選擇性，因此證實了其選擇性作用機制。實施例49ADME和PK評價評價化合物2的ADME性質和藥代動力學屬性。結果總結于表3和表4中。表3表4aIV5mg/kg；PO10mg/kg化合物2在10μM的最大濃度下對任何人細胞色素同種型沒有影響，因此排除了潛在的藥物藥物相互作用。此外，對hERG通道沒有觀察到作用，因此排除了臨床開發期間的潛在心臟毒性作用。化合物2的低logD值使得當需要ip、iv和ives應用時特別適用，特別是在治療泌尿系統疾病中。同時，相對高的血漿半衰期(2.94h)和高的口服生物利用度(F＝100％)可使其成為治療慢性疾病，例如炎癥性和神經性疼痛的理想候選物。表5當前第1頁1 2 3