本發明屬于農業領域，具體涉及一種農業殺菌劑及其制備方法。

背景技術：

農作物的病害由于不像害蟲和雜草那樣容易被人們及時察覺，所以往往造成防治上的忽視和困難，因而其危害就更為嚴重。據報道，全世界單是由病原真菌引起的植物病害就多達一萬種，所造成的損失占作物年度總損失的10％～30％。如果把病毒、細菌和線蟲等引起的植物病害也算在內，其損失就更為可觀。

為了滿足人們對糧食和其它生活物質日益增長的需要，不得不采用化學品以保護作物不受有害生物的侵襲，其中殺菌劑起著重要作用。具有農用殺菌活性的天然產物，一般易被植物吸收和傳導，對植物藥害小或無藥害，因此倍受重視。

技術實現要素：

本發明的目的在于提供一種可以開發成農業殺菌劑的天然產物以及該天然產物的制備方法，該天然產物可以制成殺菌劑，以有效保護農作物不受有害生物的侵襲。

本發明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現的：

一種天然產物，化學結構式如下：

一種農業殺菌劑，含有如上所述的天然產物和農藥助劑或農藥賦形劑。

進一步地，所述的農業殺菌劑為乳油、懸浮劑、水乳劑、可濕性粉劑、微乳劑或水分散顆粒劑。

上述的天然產物在防治農業真菌性病害方面的應用。

進一步地，所述的農業真菌性病害為油菜菌核病、水稻紋枯病、草莓灰霉病、小麥赤霉病、辣椒炭疽病和番茄早疫病。

上述的農業殺菌劑在防治農業真菌性病害方面的應用。

進一步地，所述的農業真菌性病害為油菜菌核病、水稻紋枯病、草莓灰霉病、小麥赤霉病、辣椒炭疽病和番茄早疫病。

本發明的優點：

本發明提供的天然產物對農業病害具有優異的防治效果，可以開發成農業殺菌劑，用于保護農作物不受有害生物的侵襲。

具體實施方式

下面結合實施例進一步說明本發明的實質性內容，但并不以此限定本發明保護范圍。盡管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和范圍。

實施例1：天然產物的制備和結構確證

分離方法：(a)將山茱萸的干燥成熟果實粉碎，用90％乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟(a)中正丁醇萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用10％乙醇洗脫8個柱體積，再用75％乙醇洗脫12個柱體積，收集75％洗脫液，減壓濃縮得75％乙醇洗脫濃縮物；(c)步驟(b)中75％乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為60:1(8個柱體積)、30:1(8個柱體積)、15:1(8個柱體積)和8:1(10個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；(d)步驟(c)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1(8個柱體積)、15:1(10個柱體積)和10:1(5個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；(e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70％的甲醇水溶液等度洗脫，收集10～15個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮即得。

結構確證：白色粉末；HR-ESI-MS顯示[M+Na]⁺為m/z 457.2206，結合核磁特征可得分子式為C₂₄H₃₄O₇，不飽和度為8。核磁共振氫譜數據δ_H(ppm，CDCl₃，500MHz)：H-1a(1.12，m)，H-1b(1.34，m)，H-2a(1.68，m)，H-2b(1.70，m)，H-3(5.66，s)，H-5(2.33，dd，J＝13.6，4.3Hz)，H-6a(2.24，m)，H-6b(3.06，dd，J＝15.3，3.4Hz)，H-9(2.26，m，2H)，H-12(1.83，s)，H-13(2.07，s)，H-14(0.99，s)，H-15a(5.18，d，J＝13.1Hz)，H-15b(5.38，d，J＝13.1Hz)，H-3’(5.23，q，J＝6.3Hz)，H-4’(1.26，d，J＝6.3Hz)，H-5’(1.63，s)，2’-AcO(2.07，s)，3’-AcO(2.09，s)；核磁共振碳譜數據δ_C(ppm，CDCl₃，125MHz)：32.8(CH₂，1-C)，27.6(CH₂，2-C)，77.9(CH，3-C)，142.4(C，4-C)，51.3(CH，5-C)，29.4(CH₂，6-C)，131.7(C，7-C)，202.4(C，8-C)，57.8(CH₂，9-C)，38.2(C，10-C)，146.4(C，11-C)，23.1(CH₃，12-C)，23.8(CH₃，13-C)，14.4(CH₃，14-C)，111.2(CH₂，15-C)，168.6(C，1’-C)，82.6(C，2’-C)，72.4(CH，3’-C)，14.9(CH₃，4’-C)，20.7(CH₃，5’-C)，170.3(C，2’-AcO)，21.3(CH₃，2’-AcO)，169.3(C，3’-AcO)，21.0(CH₃，3’-AcO)。紅外波譜中的1715cm^-1與1680cm^-1吸收帶表明結構中存在羰基與雙鍵片段。¹³C-NMR、DEPT和HSQC譜中顯示有24個碳信號，包括七個甲基，五個亞甲基(一個烯烴碳)，三個次甲基(兩個連氧碳)，以及九個季碳(四個羰基碳，三個烯烴碳和一個含氧季碳)。以上功能結構再結合不飽和數表明該化合物為雙環結構。¹H-NMR譜結合HSQC譜顯示五個甲基質子信號δ_H 0.99(3H，s)、1.26(3H，d，J＝6.3Hz)、1.63(3H，s)、1.83(3H，s)、2.07(3H，s)，兩個乙?；谆|子信號δ_H 2.07(3H，s)與2.09(3H，s)，一個烯屬亞甲基質子信號δ_H 5.18(1H，d，J＝13.1Hz)與5.38(1H，d，J＝13.1Hz)，兩個連氧次甲基質子信號δ_H 5.23(1H，q，J＝6.3Hz)與5.66(1H，s)，以上NMR數據可以確認該化合物為闊苞菊酮衍生物。HMBC譜中的H₃-12與C-11，H₃-13與C-11，H₃-14與C-10，H₂-15與C-4相關信號可以歸屬為闊苞菊酮上的片段，C-3位質子信號移向低場說明C-3羥基被酯化，而通過HMBC譜中H-3與C-1’的相關信號得到進一步確認。此外，通過HMBC譜中H-3’與C-3’的相關信號以及移向低場的H-3’與C-2’信號可知該化合物中存在2’,3’-二乙?；?2’-甲基丁酰氧基邊鏈結構，而質子信號δ_H 1.63與1.26(J＝6.3Hz)可以歸屬為H₃-5’與H₃-4’的甲基信號。NOESY譜中H_β-1/H₃-14，H_β-1/H-3相關信號表明H-3和H₃-14在闊苞菊酮骨架的同側，并且H_α-1/H-5相關信號暗示H-5在H-3和H₃-14的異側。該化合物的相對構型進一步通過X-單晶衍射確認，C-3位的絕對構型通過酸解反應與Mosher法可以確認為R構型。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和NOESY譜，以及文獻關于相關類型核磁數據，可基本確定該化合物如下所示，立體構型進一步通過ECD試驗確定，理論值與實驗值基本一致。該天然產物化學結構和碳原子標記如下：

實施例2：對農業病害的防治

供試菌株核盤菌(Sclerotioia selerotiorum)從油菜菌核病菌株上分離得到；立枯絲核菌(Thanatephorus cucumeris)從水稻紋枯病病葉上分離；灰霉菌(Botrytis cinerea)，又稱灰葡萄孢菌從草莓灰霉病上分離得到；禾谷鐮孢菌(Fusarium.graminearm)從小麥赤霉病穗上分離得到；禾谷絲核菌(Rhizoctonia solani)從小麥紋枯病葉上分離得到；辣椒疫霉(phytophthora capsici)從辣椒病株上分離；辣椒刺盤孢[Colletotrichum capsici(syd.)Butl.]從辣椒炭疽病果實上分離得到；茄鏈格孢菌(Alternaria solani.)從番茄早疫病葉上分離得到。

將實施例1制備的天然產物溶于甲醇制成1000μg/mL母液，4℃保存備用。PDA培養基：200g去皮馬鈴薯切成塊，煮沸10min后，取汁，加入20g瓊脂，加熱至熔化，再加入20g葡萄糖，用水定容至1000mL。

采用菌絲生長速率測定法對菌絲生長的抑制測定，從PDA平板上預培養的供試菌邊緣打取菌碟(直徑5mm)，將供試藥劑母液與培養基均勻混合，使供試藥劑最終濃度為30ppm，混合液傾入直徑為9cm的滅菌培養皿中制成平板，每皿接種一菌碟，菌絲面朝上，每處理重復3次。25℃培養至對照菌落布滿培養皿三分之二以上時，十字交叉法測量菌落增長直徑。由菌落直徑平均值(mm)計算生長抑制率。

以蛇床子素Osthol為陽性對照品，從結果中可以看出實施例1制備的天然產物可有效地防治油菜菌核病、水稻紋枯病、草莓灰霉病、小麥赤霉病、辣椒炭疽病、番茄早疫病等，濃度30ppm對這幾種病害抑制率分別為60.91％、66.99％、52.30％、44.67％、70.54％、44.66％，具體實驗結果見表1；通過實驗充分體現了本發明提供的天然產物的顯著效果，尤其對真菌性病害油菜菌核病、水稻紋枯病及辣椒炭疽病防治效果明顯。

表1對農業病害的防治

試驗結果表明，本發明提供的天然產物對農業病害具有優異的防治效果，可以開發成農業殺菌劑，用于保護農作物不受有害生物的侵襲。

可以將本發明提供的天然產物和農藥助劑或農藥賦形劑混合制備成農業殺菌劑，劑型可以為乳油、懸浮劑、水乳劑、可濕性粉劑、微乳劑或水分散顆粒劑。

上述實施例的作用在于說明本發明的實質性內容，但并不以此限定本發明的保護范圍。本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和保護范圍。