本發明屬于生化分離技術領域，具體涉及提高印度辣木籽脫脂率的方法。
背景技術：
辣木又稱鼓槌樹，白花菜目辣木科，是多年生熱帶喬木，原產于印度。辣木籽為辣木樹的種子，在食品、醫藥、保健、化妝品等領域都有著良好的應用價值，因為富含辣木籽油，其在降低血脂、血壓，減肥瘦身，調節腸胃，護肝戒酒，增強人體免疫力方面都具有顯著療效。
現有技術提供多種脫脂方法，例如，中國發明授權專利文獻 一種采用超聲波輔助脫脂提取厥麻多糖的方法 授權公告號：CN104231096B 該發明提供一種采用超聲波輔助脫脂提取厥麻多糖的方法，它以厥麻為原料，加入石油醚后，采用不同溫度回流脫脂，揮干溶媒后用乙醇常溫浸泡洗滌，加入蒸餾水，轉入超聲波提取設備，超聲提取過濾，收集水提液，濾渣再加水超聲提取兩次，合并水提液，旋轉蒸發濃縮后加入木瓜蛋白酶液酶解，離心后取上清液，用微抽濾儀抽濾，進一步除去較細的濾渣，濃縮收集到的濾液，再用正丁醇和氯仿的混合液,萃取3～5次,收集上層水相，向水相中加入乙醇，靜置后離心收集沉淀，冷凍干燥將得到純化的蕨蔴多糖。
現有技術采用超聲波輔助脫脂，可縮短提取過程的時間，提取率有所提高，但工藝復雜且脫脂率和提取率有待提升。
技術實現要素：
本發明針對上述技術問題提供一種脫脂率高的的提高印度辣木籽脫脂率的方法。
本發明針對上述技術問題所采取的方案為：提高印度辣木籽脫脂率的方法，制備步驟如下：
1）預處理：將辣木籽曬干，去皮，得到白色球狀的內子，去離子水浸泡，干燥，超微粉碎，過篩；去離子水可充分的將去皮后的內子表面可溶雜質與內子分離，避免在后續步驟中雜質對提取的影響，保證提取過程無雜質干擾。
2）脫脂：往內子粉末中加入脫脂劑和活性劑，攪拌，靜置，過濾得塊狀粉末，再將粉末風干后過篩；內子中的油脂會影響活性蛋白的提取率故用脫脂劑對內子粉末進行脫脂，添加的活性劑可保證脫脂過程中內子粉末中活性蛋白的活性。
3）提取活性蛋白：往過篩后的粉末中加入Tris—HCl緩沖液，攪拌，水浴加熱，加入酶解劑和助溶劑，繼續攪拌，離心取上清液，上清液中加入析出劑，靜置過濾得印度辣木籽中活性蛋白；將粉末中的活性蛋白充分酶解出來，提高活性蛋白的提取率。
4）凍干保存，由于活性蛋白對環境的要求很高，常溫下高濃度的生物蛋白很容易失去活性，為確保活性采用凍干工藝。
脫脂劑劑體積為內子粉末2~4倍，可保證充分脫脂，攪拌靜置1~2天后用50~150目篩子過篩，便于后續步驟提取活性蛋白。
脫脂劑由以下成分及重量份組成：正己烷68~80份、硼氫化鉀5~15份和環烯醚萜3~8份。將內子粉末中的油脂充分脫離，脫脂效果優異，使用脫脂劑獲得的內子粉末蛋白含量高、脂肪充分去除，經過濾風干可使水分也降低且易篩，提升后續的酶解的效果。活性劑由以下成分及重量份組成：脂肪酸甲酯乙氧基化物8~15份、烷基酚聚氧乙烯醚2~10份、異丙醇2~10份、丁基二甘醇3~10份、氯化鈉1~4份、N-乙酰鄰氨基苯酸1~3份、三聚磷酸鈉2~4份。在脫脂的過程中肯會對蛋白的活性產生影響，加入活性劑保證蛋白活性，同時起到提升蛋白活性，效果優異。
Tris-Hcl緩沖液pH值為8.6~8.9，濃度為1.3~1.6mol/L，pH值和濃度在此范圍緩沖液效果優異。
步驟3中離心機轉速為3000~4000r/min，離心時間10~20min，進行固液分離將雜質去除便于活性蛋白的提取。
步驟1中內子在去離子水中浸泡30~50min后置于干燥器內干燥，充分將內子表面雜質浸泡出來，再進行干燥保證雜質充分去除。
有益效果：本發明采用的去離子水可充分的將去皮后的內子表面可溶雜質與內子分離，避免在后續步驟中雜質對提取的影響，保證提取過程無雜質干擾，內子中的油脂會影響活性蛋白的提取率，用脫脂劑將內子粉末中的油脂充分脫離，脫脂效果優異，使用脫脂劑獲得的內子粉末蛋白含量高、脂肪充分去除，經過濾風干可使水分也降低且易篩，提升后續的酶解的效果。添加的活性劑可保證脫脂過程中內子粉末中活性蛋白的活性，由于活性蛋白對環境的要求很高，常溫下高濃度的生物蛋白很容易失去活性，為確保活性采用凍干工藝，本發明制備的脫脂劑顯著提高了印度辣木籽的油脂脫脂率，且脫脂率較高，從而提高了提取到的活性蛋白含量。
具體實施例
以下結合具體實施例作進一步詳細描述：
實施例1：
提高印度辣木籽脫脂率的方法，制備步驟如下：
1）預處理：將辣木籽曬干，去皮，得到白色球狀的內子，去離子水浸泡，干燥，超微粉碎，過篩；去離子水可充分的將去皮后的內子表面可溶雜質與內子分離，避免在后續步驟中雜質對提取的影響，保證提取過程無雜質干擾。
2）脫脂：往內子粉末中加入脫脂劑和活性劑，攪拌，靜置，過濾得塊狀粉末，再將粉末風干后過篩；內子中的油脂會影響活性蛋白的提取率故用脫脂劑對內子粉末進行脫脂，添加的活性劑可保證脫脂過程中內子粉末中活性蛋白的活性。
3）提取活性蛋白：往過篩后的粉末中加入Tris—HCl緩沖液，攪拌，水浴加熱，加入酶解劑和助溶劑，繼續攪拌，離心取上清液，上清液中加入析出劑，靜置過濾得印度辣木籽中活性蛋白；將粉末中的活性蛋白充分酶解出來，提高活性蛋白的提取率。
4）凍干保存，由于活性蛋白對環境的要求很高，常溫下高濃度的生物蛋白很容易失去活性，為確保活性采用凍干工藝。
脫脂劑劑體積為內子粉末2~4倍，可保證充分脫脂，攪拌靜置1~2天后用50~150目篩子過篩，便于后續步驟提取活性蛋白。
脫脂劑由以下成分及重量份組成：正己烷68~80份、硼氫化鉀5~15份和環烯醚萜3~8份。將內子粉末中的油脂充分脫離，脫脂效果優異，使用脫脂劑獲得的內子粉末蛋白含量高、脂肪充分去除，經過濾風干可使水分也降低且易篩，提升后續的酶解的效果。
活性劑由以下成分及重量份組成：脂肪酸甲酯乙氧基化物8~15份、烷基酚聚氧乙烯醚2~10份、異丙醇2~10份、丁基二甘醇3~10份、氯化鈉1~4份、N-乙酰鄰氨基苯酸1~3份、三聚磷酸鈉2~4份。在脫脂的過程中肯會對蛋白的活性產生影響，加入活性劑保證蛋白活性，同時起到提升蛋白活性，效果優異。
Tris-Hcl緩沖液pH值為8.6~8.9，濃度為1.3~1.6mol/L，pH值和濃度在此范圍緩沖液效果優異。
步驟3中離心機轉速為3000~4000r/min，離心時間10~20min，進行固液分離將雜質去除便于活性蛋白的提取。
步驟1中內子在去離子水中浸泡30~50min后置于干燥器內干燥，充分將內子表面雜質浸泡出來，再進行干燥保證雜質充分去除。
實施例2：
提高印度辣木籽脫脂率的方法，制備步驟如下：
1）預處理：將辣木籽曬干，去皮，得到白色球狀的內子，去離子水浸泡，干燥，超微粉碎，過篩；內子在去離子水中浸泡優選時間為50min后置于干燥器內干燥，充分將內子表面雜質浸泡出來，再進行干燥保證雜質充分去除，去離子水可充分的將去皮后的內子表面可溶雜質與內子分離，避免在后續步驟中雜質對提取的影響，保證提取過程無雜質干擾。
2）脫脂：往內子粉末中加入脫脂劑和活性劑，攪拌，靜置，過濾得塊狀粉末，再將粉末風干后過篩；內子中的油脂會影響活性蛋白的提取率故用脫脂劑對內子粉末進行脫脂，添加的活性劑可保證脫脂過程中內子粉末中活性蛋白的活性。
3）提取活性蛋白：往過篩后的粉末中加入Tris—HCl緩沖液，Tris-Hcl緩沖液pH值優選為8.8，濃度優選為1.5mol/L，pH值和濃度在此范圍緩沖液效果優異。攪拌，水浴加熱，加入酶解劑和助溶劑，繼續攪拌，離心取上清液，放入離心機進行離心，離心轉速優選為4000r/min，離心時間優選為15min，進行固液分離將雜質去除便于活性蛋白的提取。上清液中加入析出劑，靜置過濾得印度辣木籽中活性蛋白；將粉末中的活性蛋白充分酶解出來，提高活性蛋白的提取率。
4）凍干保存，由于活性蛋白對環境的要求很高，常溫下高濃度的生物蛋白很容易失去活性，為確保活性采用凍干工藝。
脫脂劑劑體積為內子粉末優選3倍，可保證充分脫脂，攪拌靜置優選2天后優選用80目篩子過篩，便于后續步驟提取活性蛋白。
脫脂劑由以下成分及重量份組成：優選正己烷75份、優選硼氫化鉀10份和優選環烯醚萜7份。將內子粉末中的油脂充分脫離，脫脂效果優異，使用脫脂劑獲得的內子粉末蛋白含量高、脂肪充分去除，經過濾風干可使水分也降低且易篩，提升后續的酶解的效果。
活性劑由以下成分及重量份組成：優選脂肪酸甲酯乙氧基化物10份、優選烷基酚聚氧乙烯醚8份、優選異丙醇8份、優選丁基二甘醇8份、優選氯化鈉3份、優選N-乙酰鄰氨基苯酸2份、優選三聚磷酸鈉2份。在脫脂的過程中肯會對蛋白的活性產生影響，加入活性劑保證蛋白活性，同時起到提升蛋白活性，效果優異。實驗表明0.1-0.5重量份的磷脂酰膽堿在試劑體系中起到了耦合增效的效果。本發明采用的去離子水可充分的將去皮后的內子表面可溶雜質與內子分離，避免在后續步驟中雜質對提取的影響，保證提取過程無雜質干擾，內子中的油脂會影響活性蛋白的提取率，用脫脂劑將內子粉末中的油脂充分脫離，脫脂效果優異，使用脫脂劑獲得的內子粉末蛋白含量高、脂肪充分去除，經過濾風干可使水分也降低且易篩，提升后續的酶解的效果。添加的活性劑可保證脫脂過程中內子粉末中活性蛋白的活性，由于活性蛋白對環境的要求很高，常溫下高濃度的生物蛋白很容易失去活性，為確保活性采用凍干工藝，本發明制備的脫脂劑顯著提高了印度辣木籽的油脂脫脂率，且脫脂率較高，從而提高了提取到的活性蛋白含量。
以上所述，僅是本發明的較佳實施例，并非對本發明作任何限制。凡是根據發明技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、變更以及等效變化，均仍屬于本發明技術方案的保護范圍內。