本發明屬于生物制藥領域,具體地說是采用磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液制造絨促性素精品的方法。

背景技術：

絨促性素是從健康孕婦尿中提取、精制而成的一種天然促性腺激素，具有類似黃體生成素的功能。對女性可促進卵泡的成熟及排卵，并維持黃體的功能。對男性，能刺激睪丸間質細胞的發育，增加雄激素分泌，促使睪丸下降和男性第二性征發育。與尿促性素合用，可模擬生理性的促黃體生成素高峰，而觸發排卵。臨床上絨促性素至今仍是治療月經失調、無排卵性不孕癥、先兆流產和習慣性流產、隱睪癥、男性性功能低下等的首選藥物。

國際上從20年代就開始研究，1927年Zondek和Ascbheim首先發現妊娠婦女尿中存在著促性腺激素，1936年Brown和Venning找到在妊娠第60-80天，尿中絨促性素分泌達到最高峰。

1928年Zondek和Ascbheim 首先用乙醇沉淀法，從孕婦尿中取得了活性物質，其它研究者則進行應用吸附劑從尿中直接吸附絨促性素的研究，這包括1932年Katzman和Doisy用苯甲酸吸附法，1943年Katzman等人用人造沸石層析吸附法，1954年Loraine和Brown用高嶺土吸附法，1959年難波修一等人用離子交換樹脂吸附法等，用這些方法所取得的絨促性素再用各種純化方法進行純化。

技術實現要素：

本發明公開了采用磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液制造絨促性素精品的技術方法，它包括以下步驟：溶解、預過濾、超濾、納濾、凍干。

1、溶解：溫度8-12℃條件下，并且在此后的預過濾、超濾、納濾步驟維持這個溫度，用pH值7.0的0.1mol/L磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液溶解絨促性素粗品，比例為每kg絨促性素粗品加入15-25L pH值7.0的 0.1mol/L磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液，攪拌20-40分鐘，得到絨促性素料液。

2、預過濾：將絨促性素料液用0.22μm濾芯預過濾，壓力不超過0.2MPa，得到絨促性素過濾液。

3、超濾：將絨促性素過濾液用10KD超濾膜進行超濾濃縮，壓力不超過0.1MPa，濃縮體積至原體積的15%-20%，得到絨促性素超濾液。

4、納濾：將絨促性素超濾液用20nm的濾芯進行納濾，壓力不超過0.3MPa，得到絨促性素納濾液。

5、凍干：將絨促性素納濾液放入真空冷凍干燥機速凍至溫度為-50℃，開始抽真空至真空度為-0.1MPa，繼續維持制冷2-3小時，然后將制冷變為加熱，緩慢加熱使納濾液溫度上升至30-35℃時即得絨促性素精品。

所述制得的絨促性素精品：收率≥80%，效價≥6000IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低≤5%。

與現有技術相比，本發明的優點和積極效果是：

采用磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液制造絨促性素精品, 制造過程在低溫條件下進行，能有效減少長期高溫條件對絨促性素活性的影響；通過一系列過濾方式，顯著降低雜質含量；制造的絨促性素精品，收率≥80%，效價≥6000IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低≤5%，外觀、理化、微生物限度等指標均達到或超過國內外相關藥品標準；方法工藝簡單，生產成本低，產量高，可工業化生產。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明做進一步說明。

實施例1

（1）溫度8℃條件下，并且在此后的預過濾、超濾、納濾步驟維持這個溫度，1kg絨促性素粗品加入18L pH值7.0的0.1mol/L磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液，攪拌20分鐘，得到絨促性素料液。

（2）將絨促性素料液用0.22μm濾芯預過濾，壓力不超過0.2MPa，得到絨促性素過濾液。

（3）將絨促性素過濾液用10KD超濾膜進行超濾濃縮，壓力不超過0.1MPa，濃縮體積至原體積的15%，得到絨促性素超濾液。

（4）將絨促性素超濾液用20nm的濾芯進行納濾，壓力不超過0.3MPa，得到絨促性素納濾液。

（5）將絨促性素納濾液放入真空冷凍干燥機速凍至溫度為-50℃，開始抽真空至真空度為-0.1MPa，繼續維持制冷2小時，然后將制冷變為加熱，緩慢加熱使納濾液溫度上升至30℃時即得絨促性素精品。

檢測制得的絨促性素精品：收率86%，效價6470IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低2%。

實施例2

（1）溫度10℃條件下，并且在此后的預過濾、超濾、納濾步驟維持這個溫度，1kg絨促性素粗品加入20L pH值7.0的 0.1mol/L磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液，攪拌30分鐘，得到絨促性素料液。

（2）將絨促性素料液用0.22μm濾芯預過濾，壓力不超過0.2MPa，得到絨促性素過濾液。

（3）將絨促性素過濾液用10KD超濾膜進行超濾濃縮，壓力不超過0.1MPa，濃縮體積至原體積的18%，得到絨促性素超濾液。

（4）將絨促性素超濾液用20nm的濾芯進行納濾，壓力不超過0.3MPa，得到絨促性素納濾液。

（5）將絨促性素納濾液放入真空冷凍干燥機速凍至溫度為-50℃，開始抽真空至真空度為-0.1MPa，繼續維持制冷2.5小時，然后將制冷變為加熱，緩慢加熱使納濾液溫度上升至32℃時即得絨促性素精品。

檢測制得的絨促性素精品：收率89%，效價6395IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低3%。

實施例3

（1）溫度12℃條件下，并且在此后的預過濾、超濾、納濾步驟維持這個溫度，1kg絨促性素粗品加入24L pH值7.0的 0.1mol/L磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉緩沖液，攪拌40分鐘，得到絨促性素料液。

（2）將絨促性素料液用0.22μm濾芯預過濾，壓力不超過0.2MPa，得到絨促性素過濾液。

（3）將絨促性素過濾液用10KD超濾膜進行超濾濃縮，壓力不超過0.1MPa，濃縮體積至原體積的20%，得到絨促性素超濾液。

（4）將絨促性素超濾液用20nm的濾芯進行納濾，壓力不超過0.3MPa，得到絨促性素納濾液。

（5）將絨促性素納濾液放入真空冷凍干燥機速凍至溫度為-50℃，開始抽真空至真空度為-0.1MPa，繼續維持制冷3小時，然后將制冷變為加熱，緩慢加熱使納濾液溫度上升至34℃時即得絨促性素精品。

檢測制得的絨促性素精品：收率87%，效價6428IU/mg，25℃溫度條件下存放6個月效價降低3%。

以上所述，僅是本發明的較佳實施例而已，并非是對本發明作其它形式的限制，任何熟悉本專業的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發明技術方案內容，依據本發明的技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于本發明技術方案的保護范圍。