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一種快速色譜制備非達霉素的方法與流程

文檔序號:11107433閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種快速色譜制備非達霉素的方法,其特征在于:包括如下具體操作步驟:

(1)、將非達霉素發酵液進行固液分離得到菌絲體,然后加入60%~80%乙醇浸泡菌絲體并離心,得到非達霉素浸提液,待用;

(2)、將步驟(1)所得的非達霉素浸提液用水稀釋至乙醇濃度為10%~40%,之后導入聚苯乙烯樹脂柱內進行吸附,然后采用乙醇進行梯度解吸,收集非達霉素含量45%以上的解吸液;

(3)、將步驟(2)所收集的解吸液合并,并加水稀釋至乙醇濃度為45%~55%,接著導入反相硅膠層析柱中,采用甲醇-水-乙酸進行梯度洗脫,收集非達霉素含量85%以上的洗脫液;

(4)、將步驟(3)所收集到的洗脫液合并,并采用水稀釋至甲醇濃度為55%~65%,再次導入反相硅膠層析柱中,采用乙腈-水-乙酸進行梯度洗脫,收集非達霉素含量98.5%以上的洗脫液并進行合并,進行濃縮、干燥后得到高純度的非達霉素成品。

2.根據權利要求1所述一種快速色譜制備非達霉素的方法,其特征在于:所述步驟(1)中,60%~80%乙醇的加入量為每千克濕的菌絲體中加入1~8升;浸提溫度為10~50℃;浸提時間為2~8h。

3.根據權利要求1所述一種快速色譜制備非達霉素的方法,其特征在于:所述步驟(2)中,聚苯乙烯樹脂柱為DIAION HP-20聚苯乙烯樹脂柱、納微NM-200聚苯乙烯樹脂柱、D101聚苯乙烯樹脂柱、HPD-400聚苯乙烯樹脂柱、AmberliteXAD-8聚苯乙烯樹脂柱或HZ816聚苯乙烯樹脂柱中的任一種。

4.根據權利要求1所述一種快速色譜制備非達霉素的方法,其特征在于:所述步驟(3)中,反相硅膠層析柱的填料選用C4、C8或C18烷基硅膠鍵合相中的任一種,且粒徑為50μm。

5.根據權利要求1所述一種快速色譜制備非達霉素的方法,其特征在于:所述步驟(4)中,反相硅膠層析柱的填料選用C4、C8或C18烷基硅膠鍵合相中的任一種,且粒徑為50μm。

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