技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域,特別涉及二代測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建技術(shù)。該方案中利用兩輪多重PCR來建庫(kù)。針對(duì)每個(gè)靶標(biāo)區(qū)域或者靶標(biāo)位點(diǎn),設(shè)計(jì)兩條特異性引物,上游的引物OP用于第一輪多重PCR,下游的引物IP用于第二輪多重PCR。將第二輪PCR產(chǎn)物純化后,進(jìn)行Q?PCR定量,稀釋到合適的濃度用于二代測(cè)序。本發(fā)明能夠有效的縮短Ampliseq試劑盒存在的問題,對(duì)于客戶定制化的panel設(shè)計(jì)生產(chǎn)周期只需要兩周,并降低單個(gè)樣本建庫(kù)的成本,且Ion?Torrent和Illumina測(cè)序平臺(tái)都通用。
技術(shù)研發(fā)人員:王筱恬;徐峰
受保護(hù)的技術(shù)使用者:上海美迪維康生物科技有限公司
文檔號(hào)碼:201611145969
技術(shù)研發(fā)日:2016.12.13
技術(shù)公布日:2017.03.15