本發明涉及化學合成技術領域，具體是一種1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物及其合成方法和應用。

背景技術：

真菌感染已經嚴重威脅到人類健康，目前臨床上使用的一些抗真菌藥物，由于光譜活性較窄、腎毒副作用較大等缺點，使這些抗真菌藥物的應用受到極大的限制，因此，迫切需要開發出光譜、高效、對人體無毒的抗真菌藥物。幾丁質是真菌細胞壁的主要組成成分，不存在于人體和哺乳動物當中。幾丁質合成酶是生物合成幾丁質的關鍵酶，幾丁質合成酶抑制劑可以抑制幾丁質合成酶的活性，阻斷幾丁質的生物合成，從而達到殺菌的目的。幾丁質因其在真菌細胞壁中特殊的存在形式，使得幾丁質合成酶作為藥物作用靶點，設計和開發新型結構的幾丁質合成酶抑制劑成為當前醫藥領域的研究熱點。

喹唑啉的環結構是多種生物堿的骨架。喹唑啉酮類藥物具有多重生物活性，近年來，喹唑啉酮類化合物在抗艾滋、抗腫瘤、抗癌、抗病毒、抗菌等方面的應用均有報道，這類化合物的研究文章可見：Eur J Med Chem.2009,3046-3055；Expert Opin Ther Pat..2015,789-804；American Journal of PharmTech Research.2013,466-475；Eur J Med Chem.2010,1200-1205；Chin J Chem.2003,339-346；International Research Journal of Pharmacy.2014,476-480；Prog Nat Sci.1998,359-365；Chem Biol Drug Des.2015,672-684.

研究發現，氟原子引入到有機化合物中，其電效應和模擬效應不僅能改變分子內部電子密度分布，而且能夠提高化合物的脂溶性和滲透性，使化合物在生物膜上的溶解性得到增強，促進其在生物體內的吸收和傳遞速度，使生理作用發生變化。不少含氟化合物在醫藥農藥等藥物性能上具有用提高生物活性，改善藥物新陳代謝穩定性，提高藥物的生物利用度等優點。隨著對氟化作用對分子生物學特征影響的認識不斷深入，越來越多的含氟藥物被合成，這些藥物可用于抗癌、抗腫瘤、抗病毒、消炎、抗菌等方面。這類化合物的研究文章可見：Chem.Eng.Res.Des.2014,92(7):1296-1303；J.Fluorine Chem.2015,171:148-161；Bioorg.Med.Chem.2005,13(5):1641；Bioorg.Med.Chem.Let.2009,19(22)：6264；Eur.J.Pharm.Sci.2008,35(4):247.

這些文獻均未覆蓋或包括本發明所涉及的新型化合物的結構、合成方法和用途。本發明設計合成了一類1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物。以多氧霉素B為對照，測定了新化合物對幾丁質合成酶的抑制作用，并測定了其在抗真菌，抗細菌方面的活性，拓展了喹唑啉的應用研究。到目前為止，本發明所涉及的新型化合物在抑制幾丁質合成酶活性方面還未見報道，所以將其作為幾丁質合成酶的抑制劑，開發成新型的抗真菌制劑，為人類的健康做出更大的貢獻。

技術實現要素：

本發明的目的在于提供一種1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物及其合成方法和應用，以解決上述背景技術中提出的問題。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

一種1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物，所述化合物的結構通式為：

式中R₁為氫或乙基；R₂為苯環、苯環衍生物、雜環或脂肪烴。

進一步的，所述化合物的結構通式具體為：

其中，R₁為H或CH₂CH₃；

R₂包括但不限于4-CH₃℃₆H₄、4-CH₃C₆H₄、4-FC₆H₄、4-ClC₆H₄、4-CF₃C₆H₄、2-ClC₆H₄、CH₂CH₃。

再進一步的，1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物為下述化合物的任意一種，

一種所述的1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物的合成方法，所述化合物按如下方式進行合成：

a)以甘露醇為起始原料，與丙酮縮合，形成保護的甘露醇；

b)甘露醇通過高碘酸鈉氧化，得化合物R-甘露醛縮丙酮13；

c)化合物13與二氟溴乙酸乙酯經Reformatsky反應得2,2-二氟-3-羥基-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)丙酸乙酯14；

d)化合物14再與胺15a-15t反應，通過酯的氨解，生成中間體16a-16t；

e)中間體16a-16t和中間體6經縮合反應生成最終產物17a-17t。

進一步的，上述合成過程的具體反應條件為：

1)在反應器中，依次加入丙酮，無水氯化鋅，冰浴降溫攪拌25～35min，加入甘露醇室溫反應16～18h后，得白色渾濁液體；

2)化合物12與NaIO₄的KHCO₃摩爾比為1：1：1.8～2.2，17～19℃反應1.5～2.5h，水和THF為溶劑；

3)在反應器中加入鋅粉、THF、乙醚、1,2-二溴乙烷和三甲基氯硅烷為引發劑，滴加二氟溴乙酸乙酯、R-甘油醛縮丙酮混合物，48～52℃反應3.5～4.5h；

4)化合物14、DMAP、苯胺、摩爾比為1：1.8～2.2：1，甲苯為溶劑，105～115℃反應11～13h；

5)化合物6、17a-17t、DMAP、DCC的摩爾比為1：1：0.22～0.28：1，二氯甲烷為溶劑，冰浴反應2h。

一種所述1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物在制備抗病原微生物藥物中的應用。

進一步的，所述微生物包括但不限于大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、變形桿菌、銅綠色假單胞菌、白色念珠菌、新型隱球菌、黃曲霉菌、煙曲霉菌。

一種所述的1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物在幾丁質合成酶抑制劑藥物中的應用。

一種藥物組合物，其含有權利要求1或2所述的1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物以及藥學上可接受的載。

作為本發明進一步的方案：

作為本發明再進一步的方案：

與現有技術相比，本發明的有益效果是：

經生物活性測試實驗證明，部分化合物對白色念珠菌、黃曲霉菌、新型隱球菌和煙曲霉菌表現出較好的抑制活性。而且對幾丁質合成酶抑制活性明顯，抑菌效果較好，可用于制備抗病原微生物的藥物。

附圖說明

圖1為測試化合物濃度為150μg/ml時的幾丁質合成酶抑制率對比圖。

具體實施方式

下面將結合本發明實施例中的附圖，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

實施例1

在500mL圓底燒瓶中加入240mL丙酮，冰浴降溫，加入無水氯化鋅(35g，260mmol)攪拌30min，撤去冰浴，加入D-甘露醇(23g，130mmol)，室溫反應17h后，得白色渾濁液體。加入碳酸鉀溶液(35g碳酸鉀溶解到35mL水中)，攪拌30min后抽濾，濾液用CH₂Cl₂(50mL)洗滌得無色濾液,在濾液中滴加氨水調節pH＝7.5左右，有白色沉淀生成，過濾得無色液體，濾液經旋轉蒸發得油狀物質，再加CH₂Cl₂(50mL)，部分沉淀溶解，抽濾得濾液，取CH₂Cl₂層，用無水硫酸鎂干燥，旋蒸得白色固體，用400mL乙酸乙酯和石油醚的混合溶劑(1:10)重結晶，得白色固體27.6g，產率為83.0％，熔點119.3℃。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ4.22–4.15(m,2H),4.12(dd,J＝10.8,4.0Hz,2H),3.97(dd,J＝8.4,5.8Hz,2H),3.75(d,J＝6.4Hz,2H),2.57(s,2H),1.42(s,6H),1.36(s,6H).

實施例2

在250mL圓底燒瓶中加入NaIO₄(15g,70mmol)，水(80mL)攪拌，冰水浴條件下分批加入KHCO₃(14g,140mmol)，滴加化合物12(17.75g，70mmol)的THF(55mL)溶液，30min滴完，撤去冰浴，18℃下反應2h,抽濾得渾濁溶液，用20mL乙酸乙酯萃取3次，合并有幾層，加入無水硫酸鎂干燥，旋蒸出去溶劑得淡黃色色油狀液體，減壓蒸餾收集65℃餾分，得無色油狀液體7.135g，產率為40.1％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ4.35(s,2H),1.47(s,6H)；¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ167.54,119.01,65.03,26.80.

實施例3

溶液配置：稱取二氟溴乙酸乙酯(9.472g，50mmol)，R-甘油醛縮丙酮13(6.812g,50mmol)，重蒸THF(10mL)，乙醚(10mL)，混合均勻，得無色透明溶液。

稱取鋅粉(3.102g,50mmol)加入到100mL三口圓底燒瓶中，加入6mL重蒸THF,6mL乙醚，3滴1，2-二溴乙烷，3滴三甲基氯硅烷，48℃加熱回流30min,滴加配置好的上述溶液，半h滴加完，50^℃反應4h,停止反應，冷卻至室溫，將反應液倒入60mL 1mol/L的HCl溶液和60g冰中，攪拌使冰完全溶解，用20mL乙醚萃取3次，合并有機層。依次用飽和氯化鈉(15mL),飽和碳酸氫鈉(15mL)分別洗滌三次，無水硫酸鎂干燥，旋蒸得油狀黃色液體8.798g，產率為74.1％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ4.43–4.36(m,1H),4.33(q,J＝5.8Hz,1H),4.11(t,J＝5.6Hz,2H),3.86(q,J＝6.3Hz,2H),2.86(s,1H),1.35(s,3H),1.31(s,3H),1.28(t,J＝6.4Hz,3H).

實施例4

在50mL圓底燒瓶中依次加入上述化合物14(0.508g,2mmol)，甲苯(25mL)，DMAP(0.488g,4mmol)，苯胺(0.186g,2mmol)，室溫攪拌30min后升溫至110^℃反應12h,反應結束后，將反應液冷卻至室溫，滴加0.1mol/L的鹽酸，調節pH至2-3，用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并有機層，用無水硫酸鎂干燥，旋蒸得化合物16a(0.199g)。

化合物16b-16t的合成方法同上。

實施例5

在50mL圓底燒瓶中加入化合物6(0.180g,0.82mmol)，CH₂Cl₂(20mL),DMAP(0.010g,0.082mmol)，DCC(0.168g,0.82mmol)，冰水浴攪拌20min后，滴加化合物16a(0.262g,0.82mmol)的CH₂Cl₂(10mL)溶液，滴加完畢，撤去冰水浴，室溫反應2h，放-20^℃冰箱冷藏2h，抽濾，濾餅用CH₂Cl₂洗滌，取濾液旋蒸得淡黃色固體，干法上樣，過柱(乙酸乙酯：石油醚＝1:3)，即得產物17a(0.326g)。

化合物17b-17t的合成方法同上，17a-17t的物理常數及光譜數據如下所示。

白色粉末，收率77％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.23(d,J＝8.1Hz,1H),7.98(s,1H),7.86(s,1H),7.81(d,J＝8.1Hz,1H),7.48(d,J＝7.9Hz,2H),7.30(t,J＝7.8Hz,2H),7.14(t,J＝7.4Hz,1H),5.99–5.92(m,1H),4.55(dd,J＝11.3,5.5Hz,1H),4.16–4.10(m,1H),4.06(dd,J＝9.0,5.1Hz,1H),3.56(s,3H),3.43(s,3H),1.25(s,3H),1.21(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.65,161.13,159.83,150.93,140.46,134.43,131.88,129.45,123.34,122.24,118.98,116.11,115.57,110.23,72.78,65.65,33.92,30.74,28.66,26.08,24.87.HRMS:calcd for C₂₅H₂₅F₂N₃O₇[M+Na]⁺,540.1559,found,540.1560。

黃色粉末，收率70％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.30(d,J＝8.1Hz,1H),7.94(d,J＝6.0Hz,2H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.44(d,J＝8.8Hz,2H),6.88(d,J＝8.8Hz,2H),6.07–5.99(m,1H),4.63(dd,J＝11.1,5.5Hz,1H),4.22–4.17(m,1H),4.14(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),3.80(s,3H),3.63(s,3H),3.50(s,3H),1.33(s,3H),1.28(s,3H)；¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.63,161.14,159.81,150.93,140.48,134.53,133.17,129.78,129.50,123.40,120.24,119.00,115.57,110.16,72.87,71.90,65.63,55.82,33.82,30.93,28.66,24.86.HRMS:calcd for C₂₆H₂₇F₂N₃O₈[M+Na]⁺,570.1664,found,570.1663。

3-((4-chlorophenyl)amino)-1-(2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)-2,2-difluoro-3-oxopropyl1,3-dimethyl-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydroquinazoline-7-carboxylate(17c)

淡黃色粉末，收率67％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.31(d,J＝8.1Hz,1H),8.04(s,1H),7.93(s,1H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.52(d,J＝8.7Hz,2H),7.33(t,J＝6.8Hz,2H),6.03–5.96(m,1H),4.59(dd,J＝11.3,5.8Hz,1H),4.22–4.16(m,1H),4.11(dd,J＝9.0,5.0Hz,1H),3.65(s,3H),3.50(s,3H),1.31(s,3H),1.27(s,3H)；¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.68,161.16,159.80,150.93,140.49,134.36,131.12,129.52,129.39,123.37,121.44,119.06,115.61,110.38,72.75,71.75,65.83,30.97,28.69,26.09,24.90.HRMS:calcd for C₂₅H₂₄ClF₂N₃O₇[M+Na]⁺,574.1169,found,574.1168。

白色粉末，收率66％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.23(s,1H),8.20(d,J＝8.1Hz,1H),7.84(s,1H),7.79(d,J＝8.1Hz,1H),7.47(dd,J＝8.2,4.5Hz,2H),6.97(t,J＝8.3Hz,2H),5.97–5.88(m,1H),4.56–4.50(m,1H),4.17–4.09(m,1H),4.05(dd,J＝8.9,5.0Hz,1H),3.55(s,3H),3.41(s,3H),1.24(s,3H),1.19(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.69,161.15,159.83,150.90,140.46,134.43,131.89,129.45,123.34,122.24,118.98,116.13,116.08,115.93,115.57,110.23,72.78,65.66,33.92,30.94,28.66,26.08,24.87.HRMS:calcd for C₂₅H₂₄F₃N₃O₇[M+Na]⁺,558.1464,found,558.1465。

白色粉末，收率73％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.32(d,J＝7.6Hz,1H),8.09(s,1H),7.94(s,1H),7.88(d,J＝7.1Hz,1H),7.73(s,1H),7.40(s,1H),7.15(s,1H),5.99(s,1H),4.58(s,1H),4.19(s,1H),4.12(s,1H),3.66(s,3H),3.51(s,3H),1.32(s,3H),1.28(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.68,161.16,159.80,150.93,140.49,134.36,131.12,129.52,129.39,123.37,122.28,121.44,119.06,117.90,115.61,110.38,72.75,71.75,65.83,30.97,28.69,26.09,24.90.HRMS:calcd for C₂₅H₂₃Cl₂F₂N₃O₇[M+Na]⁺,608.0779,found,608.0780。

白色粉末，收率69％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.29(d,J＝8.2Hz,1H),8.27–8.17(m,1H),7.91(d,J＝11.9Hz,1H),7.87(d,J＝8.2Hz,1H),7.66(s,1H),7.42(dd,J＝21.3,8.0Hz,1H),7.31–7.28(m,1H),7.18(d,J＝8.0Hz,1H),6.05–5.80(m,1H),4.73–4.55(m,1H),4.26–4.16(m,1H),4.16–4.07(m,1H),3.65–3.54(m,3H),3.49(d,J＝9.7Hz,3H),1.40(s,1H),1.35(s,2H),1.32(s,2H),1.28(s,2H)；¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.68,161.16,160.67,150.93,140.49,136.92,135.03,134.38,130.28,129.52,125.97,123.38,120.44,119.06,118.24,115.60,110.37,72.75,65.79,33.90,30.96,28.68,26.09,24.90.HRMS:calcd for C₂₅H₂₄ClF₂N₃O₇[M+Na]⁺,574.1169,found,574.1168。

白色粉末，收率72％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.56(s,1H),8.31(d,J＝8.2Hz,1H),8.12(s,2H),7.93(d,J＝9.6Hz,1H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.72(s,1H),5.99(dt,J＝17.2,7.2Hz,1H),4.57(dd,J＝11.3,6.2Hz,1H),4.22–4.16(m,1H),4.10(dd,J＝9.1,4.7Hz,1H),3.66(s,3H),3.51(s,3H),1.31(s,3H),1.28(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.66,161.15,159.83,150.93,140.45,134.43,131.88,129.45,129.38,123.34,122.24,118.98,116.11,115.57,110.23,72.78,65.65,33.92,30.74,28.66,26.08,24.87.HRMS:calcd for C₂₇H₂₃F₈N₃O₇[M+Na]⁺,676.1306,found,676.1307。

白色粉末，收率71％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.27(d,J＝8.1Hz,1H),7.96(s,1H),7.92(s,1H),7.87(d,J＝8.2Hz,1H),7.73(t,J＝10.4Hz,1H),7.23–7.17(m,2H),7.13(t,J＝7.4Hz,1H),6.02(ddd,J＝15.1,9.7,5.3Hz,1H),4.63(dd,J＝11.4,5.5Hz,1H),4.20–4.16(m,1H),4.13(dd,J＝9.0,5.2Hz,1H),3.61(s,3H),3.47(s,3H),2.24(s,3H),1.32(s,3H),1.26(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.66,161.15,159.83,150.91,140.45,134.51,133.54,130.75,129.57,129.46,127.00,126.55,123.36,122.97,118.99,115.60,110.19,72.86,72.79,65.63,30.94,28.65,26.12,24.93,17.33.HRMS:calcd for C₂₆H₂₇F₂N₃O₇[M+Na]⁺,554.1715,found,554.1718。

黃色粉末，收率74％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.68(s,1H),8.29(d,J＝8.1Hz,2H),7.92(s,1H),7.88(d,J＝8.2Hz,1H),7.13(t,J＝7.8Hz,1H),6.97(t,J＝7.7Hz,1H),6.90(d,J＝8.3Hz,1H),6.16–6.02(m,1H),4.65(dd,J＝10.9,5.5Hz,1H),4.22–4.18(m,1H),4.16(dd,J＝8.9,5.6Hz,1H),3.87(s,3H),3.61(s,3H),3.50(s,3H),1.32(s,3H),1.26(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.66,161.15,159.81,150.91,140.45,134.51,133.54,130.75,129.57,129.46,127.00,126.55,123.36,122.97,118.99,115.60,110.19,72.86,72.79,65.63,55.81,30.94,28.65,26.12,24.93.HRMS:calcd for C₂₆H₂₇F₂N₃O₈[M+Na]⁺,570.1664,found,570.1663。

白色粉末，收率78％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.52(s,1H),8.27(d,J＝8.4Hz,1H),7.93–7.85(m,4H),7.80(d,J＝8.3Hz,1H),7.76(d,J＝8.2Hz,1H),7.47(tt,J＝12.2,7.1Hz,3H),6.07(ddd,J＝15.1,9.2,5.7Hz,1H),4.69(dd,J＝11.4,5.6Hz,1H),4.29–4.18(m,1H),4.15(dd,J＝9.0,5.0Hz,1H),3.56(s,3H),3.47(s,3H),1.33(s,3H),1.26(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ162.71,160.15,159.50,149.89,139.45,133.48,133.10,129.04,128.47,127.92,126.17,125.96,125.74,125.37,124.60,122.41,120.22,119.10,117.98,114.61,109.39,71.90,70.98,64.80,32.93,29.90,27.65,25.14,23.97.HRMS:calcd for C₂₉H₂₇F₂N₃O₇[M+Na]⁺,590.1715,found,554.1714。

1-(2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)-2,2-difluoro-3-oxo-3-(m-tolylamino)propyl1,3-dimethyl-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydroquinazoline-7-carboxylate(17k)

白色粉末，收率70％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.31(d,J＝8.1Hz,1H),7.98(s,1H),7.93(s,1H),7.88(dd,J＝8.1,1.0Hz,1H),7.38(s,1H),7.33(d,J＝8.2Hz,1H),7.24(d,J＝7.9Hz,1H),7.02(d,J＝7.5Hz,1H),6.08–5.99(m,1H),4.63(dd,J＝11.3,5.4Hz,1H),4.22–4.18(m,1H),4.16–4.11(m,1H),3.63(s,3H),3.50(s,3H),2.35(s,3H),1.33(s,3H),1.28(s,3H)；¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ164.36,161.18,159.80,150.94,140.96,139.36,135.63,135.15,129.50,129.11,126.71,123.41,120.83,119.01,117.30,115.58,110.17,72.87,65.62,33.82,30.93,28.67,26.11,24.88,21.39.HRMS:calcd for C₂₆H₂₇F₂N₃O₇[M+Na]⁺,554.1715,found,554.1718。

白色固體，收率65％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.23(d,J＝8.1Hz,1H),8.21(d,J＝7.9Hz,1H),7.98(s,1H),7.95(d,J＝7.8Hz,1H),7.86(s,1H),7.81(d,J＝8.1Hz,1H),,7.64(t,J＝7.4Hz,1H),7.04(t,J＝7.4Hz,1H),5.99–5.92(m,1H),4.55(dd,J＝11.3,5.5Hz,1H),4.16–4.10(m,1H),4.06(dd,J＝9.0,5.1Hz,1H),3.54(s,3H),3.43(s,3H),1.25(s,3H),1.21(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.65,161.13,159.83,150.93,140.46,134.43,131.88,129.45,124.4,123.34,122.24,118.98,116.11,115.57,110.23,72.78,65.65,33.92,30.74,28.66,26.08,24.87.HRMS:calcd for C₂₄H₂₄F₂N₄O₇[M+Na]⁺,541.1511,found,541.1513。

白色粉末，收率75％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.32(d,J＝7.6Hz,1H),8.09(s,1H),7.94(s,1H),7.88(d,J＝7.1Hz,1H),7.73(s,1H),7.40(s,1H),7.15(s,1H),5.99(s,1H),4.58(s,1H),4.19(s,1H),4.12(s,1H),3.66(s,3H),3.51(s,3H),1.32(s,3H),1.28(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.68,161.16,159.80,150.93,140.49,134.36,131.12,129.52,129.39,123.37,121.44,119.89,119.06,117.90,115.61,110.38,72.75,71.75,65.83,30.97,28.69,26.09,24.90.HRMS:calcd for C₂₅H₂₃ClF₃N₃O₇[M+Na]⁺,592.1075,found,592.1077。

白色粉末，收率66％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.66(s,1H),8.23(d,J＝8.1Hz,1H),7.98(s,1H),7.86(s,1H),7.30(t,J＝7.8Hz,2H),6.07(s,1H),5.99–5.92(m,1H),4.55(dd,J＝11.3,5.5Hz,1H),4.16–4.10(m,1H),4.06(dd,J＝9.0,5.1Hz,1H),3.80(s,3H),3.56(s,3H),3.43(s,3H),1.25(s,3H),1.21(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.65,161.13,159.83,150.93,150.35,149.32,140.46,138.25,134.43,131.88,122.24,118.98,116.11,110.23,72.78,65.65,54.10,33.92,30.74,28.66,26.08,24.87.HRMS:calcd for C₂₄H₂₅F₂N₅O₈[M+Na]⁺,572.1569,found,572.1570。

白色粉末，收率69％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.23(s,1H),8.20(d,J＝8.1Hz,1H),7.84(s,1H),7.79(d,J＝8.1Hz,1H),7.47(t,J＝8.2,2H),7.37(t,J＝8.3Hz,2H),5.97–5.88(m,1H),4.56–4.50(m,1H),4.17–4.09(m,1H),4.05(dd,J＝8.9,5.0Hz,1H),3.56(s,3H),3.41(s,3H),1.24(s,3H),1.20(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.69,161.15,159.83,150.90,140.46,134.43,131.89,129.45,123.34,122.24,122.10,118.98,116.13,116.08,115.93,115.57,110.23,72.78,65.66,33.92,30.94,28.66,26.08,24.87.HRMS:calcd for C₂₆H₂₄F₅N₃O₇[M+Na]⁺,608.1432,found,608.1435。

白色粉末，收率78％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.30(d,J＝8.1Hz,1H),7.98(s,1H),7.93(s,1H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,2H),7.16(d,J＝8.1Hz,2H),6.06–5.98(m,1H),4.63(dd,J＝11.2,5.4Hz,1H),4.23–4.17(m,1H),4.14(dd,J＝8.9,5.1Hz,1H),3.63(s,3H),3.50(s,3H),2.33(s,3H),1.32(s,3H),1.27(s,3H)；¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.67,161.18,159.57,150.94,140.48,134.53,133.17,129.78,129.50,123.40,120.24,119.00,115.57,110.16,72.87,71.90,65.63,33.82,30.93,28.66,24.86,20.89.HRMS:calcd for C₂₆H₂₇F₂N₃O₇[M+Na]⁺,554.1715,found,554.1718。

白色粉末，收率77％。¹H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.27(d,J＝8.1Hz,1H),7.91(s,1H),7.82(d,J＝8.1Hz,1H),7.28–7.21(m,5H),6.86(s,1H),6.03–5.96(m,1H),4.61(dd,J＝10.8,5.4Hz,1H),4.49(d,J＝5.7Hz,2H),4.16(t,J＝7.7Hz,1H),4.13–4.08(m,1H),3.81(s,1H),3.63(s,3H),3.50(s,3H),1.33(s,3H),1.26(s,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl3)δ163.57,161.19,160.59,150.95,140.46,136.43,134.55,129.47,128.89,128.09,127.85,123.34,118.95,115.63,109.94,72.81,65.33,43.71,30.97,28.68,26.10,24.91.HRMS:calcd for C₂₆H₂₇F₂N₃O₇[M+Na]⁺,554.1715,found,554.1716。

白色粉末，收率73％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.30(d,J＝8.1Hz,1H),7.94(d,J＝6.0Hz,2H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.44(d,J＝8.8Hz,2H),6.85(d,J＝8.8Hz,2H),6.07–5.99(m,1H),4.63(dd,J＝11.1,5.5Hz,1H),4.22–4.17(m,1H),4.14(dd,J＝8.8,5.2Hz,1H),3.90(q,J＝6.8Hz,2H),3.63(s,3H),3.50(s,3H),1.35(t,J＝6.8Hz,3H),1.32(s,3H),1.28(s,3H)；¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.63,161.14,159.81,150.93,140.48,134.53,133.17,129.78,129.50,123.40,120.24,119.00,115.57,110.16,72.87,71.90,65.63,60.82,33.82,30.93,28.66,24.86,16.81.HRMS:calcd for C₂₇H₂₉F₂N₃O₈[M+Na]⁺,584.1821,found,584.1823。

白色粉末，收率75％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.22–8.17(m,1H),7.79(d,J＝8.2Hz,1H),5.81–5.73(m,1H),4.46(q,J＝5.6Hz,1H),4.31–4.24(m,1H),4.24–4.18(m,1H),4.13–4.05(m,1H),4.04–3.99(m,1H),3.57(s,3H),3.38(s,3H),3.12(q,J＝6.5Hz,4H)1.27–1.23(m,6H),1.22(t,J＝6.5Hz,6H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.63,161.14,159.81,150.93,140.48,133.17,129.78,123.40,120.24,119.00,111.57,110.16,72.87,71.90,65.63,60.82,33.82,30.93,28.66,24.86,16.80.HRMS:calcd for C₂₃H₂₉F₂N₃O₇[M+Na]⁺,520.1871,found,520.1872。

白色粉末，收率76％。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ8.22–8.17(m,1H),7.83(s,1H),7.79(d,J＝8.2Hz,1H),5.81–5.73(m,1H),4.46(q,J＝5.6Hz,1H),4.31–4.24(m,1H),4.24–4.18(m,1H),4.13–4.06(m,1H),4.04–3.99(m,1H),3.57(s,3H),3.38(s,3H),3.11(q,J＝6.5Hz,2H)1.27–1.23(m,6H),1.22(t,J＝6.5Hz,3H).¹³C NMR(151MHz,CDCl₃)δ163.63,161.14,159.81,150.93,140.48,133.17,129.78,123.40,120.24,119.00,111.57,110.16,72.87,71.90,65.63,60.82,33.82,30.93,28.66,24.86,16.80.HRMS:calcd for C₂₁H₂₅F₂N₃O₇[M+Na]⁺,492.1559,found,492.1557。

實施例9：1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物抗微生物活性實驗

本發明的化合物用DMSO溶解后，用高壓滅菌的蒸餾水制成溶液備用，將96孔板，西林瓶，槍頭等物品高壓滅菌，用移液槍移取稀釋好的菌液溶液100μL到96孔板中，用氧氟沙星、鏈霉素、氟康唑、多氧霉素B作為參比對照。細菌，真菌在37℃培養24h，觀察現象，結果見附表。

附表1 1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物抗細菌微生物活性數據(MIC ug/mL)

附表2 1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物抗真菌微生物活性數據(MIC ug/mL)

上述實驗以鏈霉素，氧氟沙星；氟康唑，多氧霉素B為對照藥，屬抗生素藥物，是公認的抗微生物活性很強的抗生素，但它目前已出現微生物耐藥現象。本發明新化合物無耐藥性，上述活性數據結果表明，本發明新化合物具有較明顯的抑菌作用，特別地，其中化合物化合物17t具有非常好的抗白色念珠菌活性，MIC值為16μg/mL，抑制活性與氟康唑(MIC＝16μg/mL)相當，優于多抗霉素B(MIC＝32μg/mL)。化合物17c和17d對黃曲霉菌有較好的抑制效果。MIC值均為32μg/mL，抑制活性與氟康唑(MIC＝32μg/mL)相當，表現出比多抗霉素B(MIC＝64μg/mL)更好的抑制效果。化合物17e對煙曲霉菌的MIC值為8μg/mL，抑制活性優于多抗霉素B(MIC＝16μg/mL)和氟康唑(MIC＝16μg/mL)。化合物17e對新型隱球菌的MIC值為32μg/mL，抑制活性與多抗霉素B(MIC＝32μg/mL)和氟康唑(MIC＝32μg/mL)相當。

實施例10：1,3-二甲基-7-取代喹唑啉-2,4-二酮含氟酰胺類化合物幾丁質酶抑制活性實驗

幾丁質合成酶來源于啤酒酵母細胞膜，酶與底物在微孔板上一起孵化反應，產生的幾丁質與板上包被的WGA結合在一起而被固定，然后加入WGA-HRP，WGA-HRP可與固定在板上的幾丁質結合，將多余的試劑用蒸餾水洗掉，然后使用TMB底物溶液檢測HRP的活性，使用2M的硫酸終止反應后在450nm處檢測其OD，計算出化合物的IC₅₀值。結果見附圖1。

從圖中可以看出以及分析出，大多數化合物對幾丁質合成酶有一定的抑制作用，化合物17d、17o在濃度為150μg/ml時，其抑制率分別為46.2％和46.3％，但是與多抗霉素B相比還存在一定的差距。

對于本領域技術人員而言，顯然本發明不限于上述示范性實施例的細節，而且在不背離本發明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實現本發明。因此，無論從哪一點來看，均應將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發明的范圍由所附權利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權利要求的等同要件的含義和范圍內的所有變化囊括在本發明內。不應將權利要求中的任何附圖標記視為限制所涉及的權利要求。