本發(fā)明涉及抗體，具體而言，涉及一種抗pivka-ⅱ的抗體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、異常凝血酶原(des-gamma-carboxy?prothrombin，dcp)是維生素k缺乏或拮抗劑-ii誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)(protein?induced?by?vitamin?k?absence?or?antagonist-ii)，又稱pivka-ii，可出現(xiàn)于維生素k缺乏或肝細(xì)胞肝癌(hcc)患者的血清中。它是一種參與凝血的具有類似于凝血酶原的結(jié)構(gòu)的糖蛋白。凝血酶原是一種具有579個(gè)殘基的蛋白質(zhì)，包括由n末端附近10個(gè)谷氨酸(glu)殘基的γ-羧化產(chǎn)生的γ-羧基谷氨酸(gla)殘基。n末端區(qū)域稱為glu-gla區(qū)域。眾所周知，在人體中產(chǎn)生凝血酶原的過程中，由于維生素k缺乏、肝功能不全、服用維生素k拮抗劑、肝細(xì)胞損傷等可能會(huì)導(dǎo)致血液中的糖蛋白的全部或者部分10個(gè)glu殘基未γ-羧化，這些蛋白質(zhì)統(tǒng)稱為pivka-ii。凝血酶原和pivka-ii的結(jié)構(gòu)除了glu-gla區(qū)域外沒有區(qū)別，兩個(gè)蛋白的中間區(qū)域都具有兩個(gè)kringle域(凝血酶原片段1(f1)和凝血酶原片段2(f2)區(qū)域)，凝血酶區(qū)域位于c端。

2、1984年，pivka-ⅱ首次被認(rèn)定為原發(fā)性肝癌的標(biāo)志物，肝細(xì)胞肝癌是一個(gè)全球性的重大健康問題，是癌癥相關(guān)死亡的全球首要原因。肝細(xì)胞肝癌患者血清中pivka-ⅱ濃度水平遠(yuǎn)高于肝硬化和轉(zhuǎn)移性肝癌患者，而且其血清濃度變化和患者肝細(xì)胞癌的動(dòng)態(tài)變化(手術(shù)、治療和復(fù)發(fā)等)相關(guān)。目前，pivka-ⅱ已被列為肝癌檢測極其重要的指標(biāo)。

3、目前，pivka-ii的檢測方法主要有化學(xué)發(fā)光法，其是基于抗體和抗原的特異性反應(yīng)，同時(shí)利用發(fā)光物質(zhì)(如過氧化物酶、異魯米諾等)對被檢測信號進(jìn)行放大和顯示的一種免疫學(xué)檢測方法。類似的免疫學(xué)檢測方法還有生化免疫比濁法、放射免疫法、熒光免疫層析法等。上述免疫學(xué)檢測方法都需要針對于pivka-ii的抗體。

4、因此，本領(lǐng)域?qū)τ谟辛己眯阅艿目筽ivka-ⅱ抗體存在著強(qiáng)烈需求。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本申請?zhí)峁┮环N抗pivka-ⅱ的抗體，為pivka-ⅱ的檢測提供重要的原料來源，且有良好的活性或親和力。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種抗pivka-ⅱ的抗體，所述抗體包含具有氨基酸序列seq?id?no:22、23、24、25任一重鏈可變區(qū)的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)和具有氨基酸序列seq?id?no:30、31、32任一輕鏈可變區(qū)的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)。

3、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供了一種抗pivka-ⅱ的抗體，所述抗體包括如下互補(bǔ)決定區(qū)：

4、hcdr1，其包含seq?id?no:1所示的氨基酸序列，或由其組成；

5、hcdr2，其包含seq?id?no:2所示的氨基酸序列，或由其組成；

6、hcdr3，其包含seq?id?no:3或17所示的氨基酸序列，或由其組成；

7、lcdr1，其包含seq?id?no:4所示的氨基酸序列，或由其組成；

8、lcdr2，其包含seq?id?no:5所示的氨基酸序列，或由其組成；和

9、lcdr3，其包含seq?id?no:6所示的氨基酸序列，或由其組成。

10、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第三個(gè)方面，提供了一種抗pivka-ⅱ的抗體，包括重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:22、23、24、25任一所示；所述輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:30、31、32任一所示。

11、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第四個(gè)方面，提供了一種抗pivka-ⅱ的抗體，包括重鏈和/或輕鏈，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no:26、27、28、29任一所示；所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no:33、34、35任一所示。

12、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第五個(gè)方面，提供了一種抗體偶聯(lián)物，所述抗體偶聯(lián)物包括上述的抗體。

13、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第六個(gè)方面，提供了一種試劑或試劑盒，所述試劑或試劑盒包括上述的抗體或上述的抗體偶聯(lián)物。

14、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的第八個(gè)方面，提供了一種上述的抗體、抗體偶聯(lián)物、試劑或試劑盒在制備檢測pivka-ⅱ產(chǎn)品中的用途。

15、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明還提供了一種核酸、一種載體、一種細(xì)胞及一種制備上述抗體的方法。

技術(shù)特征：

1.一種抗pivka-ⅱ的抗體，所述抗體包含具有氨基酸序列seq?id?no:22、23、24、25任一重鏈可變區(qū)的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)和具有氨基酸序列seq?id?no:30、31、32任一輕鏈可變區(qū)的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體，其特征在于，所述可變區(qū)的互補(bǔ)決定區(qū)由kabat、chothia、imgt、abm或contact任意一種系統(tǒng)或多種系統(tǒng)組合定義。

3.一種抗pivka-ⅱ的抗體，其特征在于，所述抗體包括如下互補(bǔ)決定區(qū)：

4.一種抗pivka-ⅱ的抗體，包含重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)，其特征在于，所述重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no:22、23、24、25任一所示；所述輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seqid?no:30、31、32任一所示；

5.一種抗pivka-ⅱ的抗體，包括重鏈和/或輕鏈，其特征在于，所述重鏈的氨基酸序列如seq?id?no:26、27、28、29任一所示；所述輕鏈的氨基酸序列如seq?id?no:33、34、35任一所示。

6.一種抗體偶聯(lián)物，其特征在于，所述抗體偶聯(lián)物包括權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的抗體；

7.一種試劑或試劑盒，其特征在于，所述試劑或試劑盒包括權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的抗體或權(quán)利要求6所述的抗體偶聯(lián)物。

8.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的抗體、權(quán)利要求6所述的抗體偶聯(lián)物，或者權(quán)利要求7所述的試劑或試劑盒在制備檢測pivka-ⅱ產(chǎn)品中的用途；

9.一種核酸、載體、細(xì)胞或制備權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的抗體的方法，所述核酸編碼權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的抗體；所述載體含有編碼權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述的抗體的核酸；所述細(xì)胞含有上述核酸或載體；所述方法包含上述細(xì)胞。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種抗PIVKA?Ⅱ的抗體及其應(yīng)用，涉及抗體領(lǐng)域。本發(fā)明公開的抗PIVKA?Ⅱ抗體包括重鏈互補(bǔ)決定區(qū)和輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)，該抗體為PIVKA?Ⅱ的檢測提供了重要的原料來源，且具有良好的親和力或活性。

技術(shù)研發(fā)人員：鐘冬梅,孟媛,梁碧,唐麗娜,曹慧方
受保護(hù)的技術(shù)使用者：東莞市朋志生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/28