本發明的領域是組合免疫治療技術。

背景技術：

1、主要組織相容性復合物(mhc)蛋白存在于所有有核細胞的表面。它們負責在細胞表面上呈遞細胞內消化的肽，由此通過t細胞篩選它們的非自身肽序列。來自非自身來源(如癌癥和感染性病原體)的肽序列呈遞在與mhc結合的細胞表面上，由此t細胞與此類被占據的mhc蛋白結合并啟動各種免疫防御程序，包括細胞因子產生和直接細胞毒性。細胞內蛋白通過mhc-i呈遞在細胞表面上，而細胞外蛋白通過吞噬作用被攝取并被加工以供mhc-ii呈遞。mhc-i在所有有核細胞的表面上表達，并且負責呈遞細胞來源的突變(非自身)肽。

2、可替代地，自然殺傷(nk)細胞介導的細胞毒性通過靶細胞表面上表達的mhc-i的存在而被抑制。由于感染因子具有降低受感染細胞中mhc表達的機制，從而減輕宿主建立t細胞介導的免疫防御的能力，因此通過降低受感染細胞中的mhc表達來實現nk細胞介導的防御。

3、已經描述了在癌細胞中mhc蛋白的喪失，由此t細胞活性降低。典型地，mhc的喪失與較低量的腫瘤浸潤淋巴細胞相關。因此，患者不能產生針對癌組織或感染組織中的非自身肽的有效免疫應答。mhc-i表達是可誘導的，可通過多種藥劑進行充分表征的誘導，其中突出的是干擾素-g。誘導mhc-i然后進行t細胞療法可能是一種有效的治療方法。

4、因此，仍然需要能夠產生并增加宿主針對癌組織的免疫應答的有效療法。

技術實現思路

1、本發明主題提供了組合物、方法和試劑盒，通過這些組合物、方法和試劑盒可以能夠產生或增強針對癌癥或感染性疾病的免疫應答。

2、在實施例中，本發明主題包括治療癌癥的方法，該方法包括測定腫瘤中的mhc-i表達水平。在確定mhc-i水平相對于至少對照非癌組織較低時，向患者施用多種nk細胞，其中這些nk細胞包括ank細胞、hank細胞、t-hank細胞、或原代cenk或記憶樣cenk(m-cenk)細胞中的至少一種。nk細胞可以靜脈內或腫瘤內施用。一段時間后，向患者施用多種t細胞。t細胞可以是自體的或異源的。可以進一步對t細胞進行基因工程化以表達靶向劑，其中該劑包含car或tcr。在非限制性實例中，可以在施用nk細胞后至多1小時，或在施用nk細胞后至多2小時，或在施用nk細胞后至多5小時，或在施用nk細胞后至多10小時，或在施用nk細胞后至多1天，或在施用nk細胞后至多5天，或施用nk細胞后至多1周，或施用nk細胞后至多2周，或施用nk細胞后至多1個月，或施用nk細胞后至多2個月，或施用nk細胞后至多6個月，或施用nk細胞后至多1年，或施用nk細胞后至多2年向患者施用t細胞。

3、在實施例中，本發明主題包括治療感染性疾病的方法，該方法包括測定受影響組織中的mhc-i表達水平。在確定mhc-i水平相對于對照健康正常組織較低時，向患者施用多種nk細胞，其中這些nk細胞包括ank細胞、hank細胞、t-hank細胞或原代cenk或記憶樣cenk(m-cenk)細胞中的至少一種。nk細胞可以靜脈內或腫瘤內施用。一段時間后，向患者施用多種t細胞。t細胞可以是自體的或異源的。可以進一步對t細胞進行基因工程化以表達靶向劑，其中該劑包含car或tcr。

4、在實施例中，本發明主題包括免疫治療組合物，該組合物包含多種nk細胞，其中這些nk細胞包括ank細胞、hank細胞、t-hank細胞、cenk細胞或m-cenk細胞中的至少一種。可以將nk細胞配制成用于靜脈內施用的多個全細胞，或者可以將其配制成用于腫瘤內施用的細胞裂解物。該組合物進一步包含多種t細胞，其中這些t細胞被配制用于靜脈內施用。t細胞可以是自體的或異源的。可以進一步對t細胞進行基因工程化以表達靶向劑，其中該劑包含car或tcr。

5、在實施例中，本發明主題包括免疫治療組合物在治療癌癥或感染性疾病中的用途，該用途包括測定受影響組織中的mhc-i表達水平，并且該組合物包含多種nk細胞，其中這些nk細胞包括ank細胞、hank細胞、t-hank細胞、cenk細胞或m-cenk細胞中的至少一種。可以將nk細胞配制成用于靜脈內施用的多個全細胞，或者可以將其配制成用于腫瘤內施用的細胞裂解物。該組合物進一步包含多種t細胞，其中這些t細胞被配制用于靜脈內施用。t細胞可以是自體的或異源的。可以進一步對t細胞進行基因工程化以表達靶向劑，其中該劑包含car或tcr。

6、治療癌癥或感染性疾病的方法可以進一步包括施用待與nk細胞同時施用的第二藥劑。該藥劑可包含至少一種選自由以下組成的組的治療劑：吉西他濱，ifng，hdac抑制劑，5-氮雜-2’-脫氧胞苷，dna甲基轉移酶抑制劑，肼屈嗪，丙戊酸，微小rna(mirna)，或alk、ret或mapk激酶的抑制劑，糖基轉移酶抑制劑，胸苷酸合成酶抑制劑，地塞米松、smac模擬物，il-15、n-803，il-15衍生物和自噬抑制劑。

7、免疫治療組合物可以進一步包含待與nk細胞同時施用的第二藥劑。該藥劑可包含至少一種選自由以下組成的組的治療劑：吉西他濱，ifng，hdac抑制劑，5-氮雜-2’-脫氧胞苷，dna甲基轉移酶抑制劑，肼屈嗪，丙戊酸，微小rna(mirna)，或alk、ret或mapk激酶的抑制劑，糖基轉移酶抑制劑，胸苷酸合成酶抑制劑，地塞米松、smac模擬物，il-15、n-803，il-15衍生物和自噬抑制劑。

8、用于在治療癌癥或感染性疾病中使用的免疫治療組合物可以進一步包含待與nk細胞同時施用的第二藥劑。該藥劑可包含至少一種選自由以下組成的組的治療劑：吉西他濱，ifng，hdac抑制劑，5-氮雜-2’-脫氧胞苷，dna甲基轉移酶抑制劑，肼屈嗪，丙戊酸，微小rna(mirna)，或alk、ret或mapk激酶的抑制劑，糖基轉移酶抑制劑，胸苷酸合成酶抑制劑，地塞米松、smac模擬物，il-15、n-803，il-15衍生物和自噬抑制劑。

9、在實施例中，本發明主題包括在癌癥中誘導mhc-i的方法，該方法包括測定腫瘤中的mhc-i表達水平。在確定mhc-i水平相對于對照非癌組織較低時，向患者施用多種nk細胞，其中這些nk細胞包括ank細胞、hank細胞、t-hank細胞、cenk細胞或m-cenk細胞中的至少一種。nk細胞可以靜脈內或腫瘤內施用。

10、在實施例中，本發明主題包括增加癌癥中ifng水平的方法，該方法包括測定腫瘤中的ifng表達水平。在確定ifng水平相對于對照非癌組織較低時，向患者施用多種nk細胞，其中這些nk細胞包括ank細胞、hank細胞、t-hank細胞、cenk細胞或m-cenk細胞中的至少一種。nk細胞可以靜脈內或腫瘤內施用。

11、在實施例中，本發明主題包括用于測定腫瘤的mhc-i誘導性的方法。在本發明的一個方面，將患者活檢樣品離體酶促和/或機械解離，并且將各個等分試樣接種到多壁微孔板的各個孔中。然后將樣品暴露于已知誘導mhc-i的藥劑，其中這些藥劑包括吉西他濱，ifng，hdac抑制劑，5-氮雜-2’-脫氧胞苷，dna甲基轉移酶抑制劑，肼屈嗪，丙戊酸，微小rna(mirna)，或alk、ret或mapk激酶的抑制劑，糖基轉移酶抑制劑，胸苷酸合成酶抑制劑，地塞米松，smac模擬物，il-15，n-803，il-15衍生物和自噬抑制劑。一段時間后，測定樣品的mhc-i的表面表達。

12、根據優選實施例的以下詳細描述以及附圖(其中相同的數字代表相同的組分)，本發明主題的各種目的、特征、方面和優點將變得更加清楚。