本發明屬于生防菌劑，具體涉及一株貝萊斯芽孢桿菌、由該芽孢桿菌制成的生防菌劑及其在果蔬抗菌和抑菌保鮮方面的應用。

背景技術：

1、果蔬在種植過程中容易受到土傳病菌的侵害，經常會受到來自于細菌、真菌感染的威脅，尤其以真菌性病害最為常見，常見癥狀有壞死(葉斑、葉枯)、腐爛(根腐、果腐)和萎蔫(根、莖基、維管束組織受侵)等。傳統上大多采用化學殺菌劑、培育抗病品種、間混套作、嫁接等方法進行病害的防治，但這些防治措施各有利弊。

2、另一方面，新鮮果蔬在采后和長期貯藏過程中由于其生理生化特性發生變化，會遭受不同程度的侵染性病害(病原微生物侵染)。果蔬采后侵染性病害是由病原微生物在果蔬田間生長發育期寄主而后發生侵染所引起的，另外運輸貯藏過程中的交叉感染也是引起侵染性病害的原因。大多數果蔬表皮組織間存在孔隙、以及運輸不當造成的傷口，方便了病原微生物通過果蔬表皮入侵內部果肉組織，加重了果蔬采后侵染性病害程度。目前，控制果蔬采后侵染性病害的主要方法是采前噴灑農藥和采后降低貯藏溫度，但農藥的過多使用會造成農藥殘留嚴重超標，危害人們的健康，且長期過多使用農藥會使病原微生物產生耐藥性，大大降低病害防治的效果。

3、生物防治是利用活體生防菌及其代謝活性物質來控制病害發生的一種技術，生防菌可在作物植株及根際定殖生長，形成生物屏障保護作物免受病菌侵害，其代謝活性物質一方面抑制殺死病原真菌，另一方面誘導植株提高病害抗性。

4、生物防治方法與化學防治方法相比更具有優勢，除了生物制劑生產容易，使用方便外，利用生防菌及其代謝產物制成的混合菌劑對環境更加友好，無污染無農藥殘留，符合我國可持續發展的戰略要求。而且生防菌劑對環境變化敏感度小，效果穩定，另外生防菌所分解和轉化的營養元素又可以被作物加以利用，進而提高作物品質、增加產量。

5、然而，現有開發出的生防菌株和生防菌劑雖然表現出了一定的效果，且有些具備廣譜抗菌性，然而現有的芽孢桿菌屬生防菌劑的抑菌率普遍較低，特別是缺乏貝萊斯芽孢桿菌。而且，針對于colletotrichumfioriniae、colletotrichum?citricola等果蔬致病菌，目前發現的生防菌株較少，其抑菌率也不高；以及針對于stemphylium?eturmiunum、clathrospora?diplospora、chaetomium?cochliodes和galactomyces?candidus這四種病原菌，目前并未見有較好的生防菌株報道。

6、因此，有待提供一種具有更廣譜抗菌效果、以及針對colletotrichumfioriniae、colletotrichum?citricola等果蔬致病菌的抑菌率極為顯著，同時對stemphyliumeturmiunum、clathrospora?diplospora、chaetomium?cochliodes和galactomycescandidus四種病原菌具備明顯抑菌效果的貝萊斯芽孢桿菌生防菌株。

技術實現思路

1、針對現有技術中的不足，本發明的目的就是提供一株能夠應用于果蔬病害防治和抑菌保鮮的生防菌株，本發明提供了一株貝萊斯芽孢桿菌，其能夠高效用于果蔬的病害防治和抑菌保鮮，特別是對于colletotrichum?fioriniae和colletotrichum?citricola等病原菌的抑菌率可達100％，并且對stemphylium?eturmiunum、clathrospora?diplospora、chaetomium?cochliodes和galactomyces?candidus四種病原菌具備明顯抑菌效果。本發明還同時提供了由該芽孢桿菌制成的生防菌劑及其在果蔬抗菌和抑菌保鮮方面的應用。

2、本發明的發明人經過大量的實驗研究和摸索，獲得了一株芽孢桿菌，該芽孢桿菌為貝萊斯芽孢桿菌bacillus?velezensis，命名為jk1，保藏單位為：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏中心編號為：cgmcc?no.31375，保藏時間為：2024年7月19日。

3、本發明提供的上述芽孢桿菌jk1的基因序列如seq?no.1所示。

4、本發明還進一步提供了包含上述芽孢桿菌jk1的生防菌劑。

5、本發明還進一步提供了該生防菌劑在果蔬病菌抗菌方面中的應用以及該芽孢桿菌在制備果蔬保鮮劑方面的應用。

6、具體的，所述果蔬病原菌包括colletotrichum?fioriniae、colletotrichumcitricola、colletotrichum?gloeosporioides、diaporthefusicola、pyricularia?oryzae、cladosporium?bruhnei、alternaria?alternata、colletotrichumacutatum、alternaria?angustiovoidea、talaromyces?verruculosus、aspergilluspuulaauensis、stemphylium?eturmiunum、botryosphaeria?dothidea、nigrospora?oryzae、alternaria?porri、penicillium?decumbens、didymosphaeriavariabile、chaetomium?cochliodes、colletotrichum?siamense、curvularia?lunata、aspergillus?tubingensis、clathrospora?diplospora、fusarium?decemcellulare、rhizoctonia?solani、lasiodiplodia?theobromae、phytophthora?capsici、pithomyceschartarum、fusarium?solani、fusarium?oxysporum、galactomyces?candidus、neofusicoccumparvum、fusarium?proliferatum、rhizomucor?variabilis、phomaherbarum、sclerotium?hydrophilum、fusariumincarnatum、fusarium?graminearum和penicillium?oxalicum。

7、本發明的生防菌劑中芽孢桿菌jk1的濃度為1×106-8cfu/ml。

8、本發明的有益效果在于：

9、(1)本發明的芽孢桿菌jk1活菌體對多種不同病原菌均有極高的抑菌作用，其廣譜抗菌性極為優異。其中芽孢桿菌jk1活菌體對colletotrichumfioriniae、colletotrichumcitricola、colletotrichum?gloeosporioides、diaporthe?fusicola和pyriculariaoryzae的抑菌效果最為顯著，抑菌率為100％，可以完全抑制病原真菌的生長。其中，jk1活菌體對cladosporium?bruhnei、alternaria?alternata、colletotrichum?acutatum、alternaria?angustiovoidea、talaromyces?verruculosus、aspergillus?puulaauensis、stemphylium?eturmiunum、botryosphaeria?dothidea、nigrospora?oryzae、alternariaporri、penicillium?decumbens、didymosphaeria?variabile、chaetomium?cochliodes、colletotrichum?siamense、curvularia?lunata、aspergillus?tubingensis、clathrospora?diplospora和fusarium?decemcellulare的抑菌率大于90％，具有較好的抑制作用；對rhizoctonia?solani、lasiodiplodia?theobromae、phytophthora?capsici、pithomyces?chartarum、fusarium?solani、fusarium?oxysporum、galactomycescandidus、neofusicoccumparvum、fusarium?proliferatum、rhizomucor?variabilis和phoma?herbarum的抑菌效果一般，抑菌率大于80％。

10、(2)本發明的芽孢桿菌jk1上清液對不同病原真菌均具有一定的抑菌效果。其中芽孢桿菌jk1上清液對colletotrichumfioriniae、colletotrichum?citricola、colletotrichum?gloeosporioides、diaporthe?fusicola、pyricularia?oryzae、cladosporium?bruhnei、alternaria?alternata、colletotrichum?acutatum、alternariaangustiovoidea、talaromyces?verruculosus、aspergilluspuulaauensis、stemphyliumeturmiunum、botryosphaeria?dothidea、nigrospora?oryzae、alternaria?porri、penicillium?decumbens、didymosphaeria?variabile、chaetomium?cochliodes、colletotrichum?siamense、curvularia?lunata、aspergillus?tubingensis和clathrospora?diplospora的抑菌效果最好，抑菌率均大于90％。芽孢桿菌jk1上清液對fusarium?decemcellulare、rhizoctonia?solani、lasiodiplodia?theobromae、phytophthora?capsici、pithomyces?chartarum、fusarium?solani、fusarium?oxysporum、galactomyces?candidus、neofusicoccum?parvum、fusarium?proliferatum和rhizomucorvariabilis具有一定的抑菌作用，抑菌率均大于80％。

11、(3)本發明的芽孢桿菌jk1細胞裂解液對不同病原真菌均有一定的抑菌效果，但抑菌效果均略低于jk1菌株上清液。其中，芽孢桿菌jk1細胞裂解液對colletotrichumfioriniae、colletotrichum?citricola、colletotrichum?gloeosporioides、diaporthefusicola、pyricularia?oryzae、cladosporium?bruhnei、alternariaalternata、colletotrichum?acutatum、alternaria?angustiovoidea、talaromycesverruculosus、aspergilluspuulaauensis、stemphylium?eturmiunum、botryosphaeriadothidea、nigrospora?oryzae、alternaria?porri和penicillium?decumbens的抑菌效果較好，抑菌率大于90％。jk1細胞裂解液對didymosphaeria?variabile、chaetomiumcochliodes、colletotrichum?siamense、curvularia?lunata、aspergillus?tubingensis、clathrospora?diplospora、fusarium?decemcellulare、rhizoctonia?solani、lasiodiplodia?theobromae、phytophthora?capsici、pithomyces?chartarum、fusariumsolani、fusarium?oxysporum、galactomyces?candidus和neofusicoccumparvum具有一定的抑菌作用，抑菌率均大于80％。

12、(4)本發明提供的芽孢桿菌jk1的抗菌譜廣，涉及的果蔬病原菌達到38種，而現有技術(cn114369556b-一株芽孢桿菌、由該芽孢桿菌制成的生防菌劑及其應用)雖然也提供了一株芽孢桿菌生防菌株，但其涉及的果蔬病原菌僅有32種。