本發(fā)明屬于微生物,具體涉及一株不動(dòng)桿菌及其在煙草促生中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、烤煙是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物,其種植總面積、總產(chǎn)量和總銷售額均居于世界前列。湖北省煙葉種植歷史悠久,是全國(guó)煙葉主產(chǎn)區(qū)之一。近年來,湖北煙區(qū)由于長(zhǎng)期施用化肥導(dǎo)致土壤微生物群落結(jié)構(gòu)失衡,進(jìn)而引起氮磷鉀等營(yíng)養(yǎng)元素在煙區(qū)土壤富集,導(dǎo)致肥料利用率低、煙草產(chǎn)量品質(zhì)下降。
2、促生菌能分解土壤中難溶性的磷、鉀等元素,分泌植物激素,產(chǎn)鐵載體和acc脫氨酶,因此,在促進(jìn)植物生長(zhǎng)方面有重要作用。具體地,促生菌中的溶磷微生物可通過酸化、螯合和交換反應(yīng)將不溶性磷轉(zhuǎn)化為可溶性磷并釋放到土壤中,供給植株吸收利用。促生菌中的解鉀菌產(chǎn)生的有機(jī)酸和無機(jī)酸可以通過降低其周圍環(huán)境的ph,直接促進(jìn)含鉀礦物的風(fēng)化,導(dǎo)致可交換性鉀的緩慢釋放,提高環(huán)境速效鉀含量,從而促進(jìn)植物生長(zhǎng)。促生菌中的微生物可以通過直接分泌植物激素(iaa),從而促進(jìn)植物生長(zhǎng)。促生菌中的微生物可以產(chǎn)生鐵載體形成鐵螯合物,達(dá)到有效吸收環(huán)境中溶解度很低的鐵來促進(jìn)植物生長(zhǎng)的目的。促生菌中的微生物產(chǎn)生acc脫氨酶,其將合成乙烯中的acc分解為α-丁酮酸和nh3,降低植物乙烯水平,緩解植物受到的脅迫,進(jìn)而促進(jìn)植物生長(zhǎng)。
3、目前市場(chǎng)上促生微生物菌劑種類繁多、菌種各異,但由于微生物活性受溫度、濕度、土壤條件等因素影響,加之中國(guó)煙區(qū)分布廣泛,自然條件差異巨大,因此,篩選適宜湖北煙區(qū)的促生菌,重構(gòu)根際有益微生物菌群,是其規(guī)模化推廣應(yīng)用的關(guān)鍵。
4、然而,目前少見不動(dòng)桿菌同時(shí)具有解磷、解鉀、分泌iaa、產(chǎn)鐵載體、產(chǎn)acc脫氨酶、促進(jìn)種子萌發(fā)、植物促生等功能的報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一株不動(dòng)桿菌及其在煙草促生中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的不動(dòng)桿菌fbh8具有較好的解磷、解鉀、分泌iaa、產(chǎn)鐵載體、產(chǎn)acc脫氨酶、促進(jìn)種子萌發(fā)和植物促生的能力,因此,在提高肥料利用率和/或植物促生等方面具有較好的應(yīng)用前景。
2、在第一方面,本發(fā)明提供了一株不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8,不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8的保藏編號(hào)為cctcc?no:m?20241839。
3、該菌株fbh8是從來自湖北省房縣野人谷鎮(zhèn)東坪村典型煙區(qū)中烤煙的根際土壤中分離得到。菌株fbh8在lb固體培養(yǎng)基平板上28℃培養(yǎng)1-2d呈圓形、白色、直徑在2-3mm、表面光滑、質(zhì)地較粘稠、易挑起、菌落不透明、邊緣清晰、有香味。
4、進(jìn)一步地,將該菌株fbh8進(jìn)行16s?rdna測(cè)序,將其16s?rdna序列在ncbi(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中進(jìn)行blast多序列比對(duì),并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該菌株fbh8與不動(dòng)桿菌同源性較高,和ky855390.1 acinetobacter?sp.?strainyl5處于同一分支;結(jié)合形態(tài)特征和分子生物學(xué)鑒定結(jié)果,將菌株fbh8命名為不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8。
5、在第二方面,本發(fā)明提供了一種生物菌劑,包括上述不動(dòng)桿菌( acinetobacter? sp.)fbh8。
6、在一些實(shí)施方案中,生物菌劑為液體菌劑。
7、在一些實(shí)施方案中,液體菌劑中不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8的含量≥1×107cfu/ml。
8、可以理解地是,生物菌劑可以根據(jù)實(shí)際使用需要選擇現(xiàn)有技術(shù)中的常規(guī)劑型,例如還可以為固體菌劑,并且固體菌劑可以采用本領(lǐng)域中的常規(guī)方法進(jìn)行制備。
9、在第三方面,本發(fā)明提供了一種如上述生物菌劑的制備方法,包括如下步驟:將上述不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8接種于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),所得培養(yǎng)物經(jīng)分離后用溶劑重懸,得到生物菌劑。
10、本發(fā)明提供的生物菌劑的制備方法簡(jiǎn)單,對(duì)環(huán)境友好,具有較好的生物安全性。
11、可以理解地是,液體培養(yǎng)基可以為本領(lǐng)域中常見的培養(yǎng)基,只要能滿足該不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8的正常生長(zhǎng)即可。培養(yǎng)條件可以選擇常規(guī)的條件。本發(fā)明中,液體培養(yǎng)基優(yōu)選為lb培養(yǎng)基。
12、在一些實(shí)施方案中,分離包括:在5000-7000r/min的條件下,離心3-10min。
13、在一些實(shí)施方案中,溶劑包括pbs緩沖液、無菌水中的至少一種。
14、在第四方面,本發(fā)明提供了如上述不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8、上述任一項(xiàng)生物菌劑或上述制備方法得到的生物菌劑在如下至少一種中的應(yīng)用:a1)解磷;a2)解鉀;a3)分泌iaa;a4)產(chǎn)鐵載體;a5)產(chǎn)acc脫氨酶。
15、在第五方面,本發(fā)明提供了如上述不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8、上述任一項(xiàng)生物菌劑或上述制備方法得到的生物菌劑在促進(jìn)種子萌發(fā)中的應(yīng)用。
16、在一些實(shí)施方案中,種子包括油菜種子、小白菜種子、水稻種子、烤煙種子中的至少一種。
17、可以理解地是,種子可以為現(xiàn)有技術(shù)中常規(guī)的植物種子,本發(fā)明中,種子優(yōu)選包括油菜種子、小白菜種子、水稻種子、烤煙種子中的至少一種。
18、在第六方面,本發(fā)明提供了如上述不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8、上述任一項(xiàng)生物菌劑或上述制備方法得到的生物菌劑在提高肥料利用率和/或植物促生中的應(yīng)用。
19、在一些實(shí)施方案中,植物包括煙草。
20、可以理解地是,植物可以為現(xiàn)有技術(shù)中常規(guī)的植物,本發(fā)明中,植物優(yōu)選包括煙草。
21、本發(fā)明的有益效果是:區(qū)別于現(xiàn)有技術(shù)的情況,本發(fā)明首次分離得到一株不動(dòng)桿菌( acinetobacter?sp.)fbh8,該菌株fbh8具有較好的解磷、解鉀、分泌iaa、產(chǎn)鐵載體、產(chǎn)acc脫氨酶的能力,通過顯著提高種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、苗長(zhǎng)和根長(zhǎng),從而促進(jìn)種子萌發(fā),并且能顯著促進(jìn)植物生長(zhǎng),同時(shí)可以降低磷、鉀等元素在植煙耕層土壤的富集,提高肥料利用效率,因此,具有良好的應(yīng)用前景。
1.?一株不動(dòng)桿菌fbh8,其特征在于,所述不動(dòng)桿菌fbh8的保藏編號(hào)為cctcc?no:m20241839。
2.一種生物菌劑,其特征在于,包括權(quán)利要求1所述的不動(dòng)桿菌fbh8。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物菌劑,其特征在于,所述生物菌劑為液體菌劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物菌劑,其特征在于,所述液體菌劑中不動(dòng)桿菌fbh8的含量≥1×107cfu/ml。
5.一種如權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)所述的生物菌劑的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:將權(quán)利要求1所述的不動(dòng)桿菌fbh8接種于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),所得培養(yǎng)物經(jīng)分離后用溶劑重懸,得到生物菌劑。
6.如權(quán)利要求1所述的不動(dòng)桿菌fbh8、權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)所述的生物菌劑或權(quán)利要求5中制備方法得到的生物菌劑在如下至少一種中的應(yīng)用:
7.如權(quán)利要求1所述的不動(dòng)桿菌fbh8、權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)所述的生物菌劑或權(quán)利要求5中制備方法得到的生物菌劑在促進(jìn)種子萌發(fā)中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,所述種子包括油菜種子、小白菜種子、水稻種子、烤煙種子中的至少一種。
9.如權(quán)利要求1所述的不動(dòng)桿菌fbh8、權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)所述的生物菌劑或權(quán)利要求5中制備方法得到的生物菌劑在提高肥料利用率和/或植物促生中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于,所述植物包括煙草。