本發明屬于天然產物提取與分離，具體涉及一種利用des結合大孔吸附樹脂層析柱技術，從沙苑子中得到沙苑子苷的方法。

背景技術：

1、沙苑子為豆科植物扁莖黃芪astragalus?complanatus?r.br.的干燥成熟種子，為我國的傳統中藥，主要產于陜西、山西、河北、內蒙古等地區。據《中國藥典》2020版記載，沙苑子性甘、溫，歸肝、腎經，被廣泛用于腎虛腰痛、遺精早泄、遺尿尿頻、白濁帶下、眩暈、目暗昏花等病癥的治療。近年來研究表明，沙苑子富含黃酮類功能活性成分，包括沙苑子苷、沙苑子苷b等。沙苑子苷具有抗炎、保肝、抗癌、抗衰老、干預肺纖維化、治療白癜風、美白皮膚等多種生物活性。因此，開發沙苑子中沙苑子苷的提取方法具有很大的實用價值。

2、目前已有沙苑子苷的提取方法主要是以乙醇為提取溶劑，采用加熱回流提取法、超聲提取法、微波提取、滲漉提取法等方法。然而，有機溶劑有許多缺點，如效率低、不環保、存在安全隱患等。因此，開發新型綠色溶劑替代有機溶劑提取沙苑子中的沙苑子苷是亟需解決的問題。

3、des于2001年首次提出，主要由氫鍵受體(hba)與氫鍵供體(hbd)組成。作為一種新型溶劑，des具有易制備、成本低、毒性低、不易揮發、提取率高等顯著優點。雖然des運用于天然產物的提取有諸多報道，但是針對沙苑子苷的提取制備目前還沒有報道。

4、此外，作為一類常用于天然產物分離的材料，大孔吸附樹脂具有吸附選擇好、可循環利用、操作簡便、成本低等多方面的優點。中國專利申請號cn200910057073.3的發明專利中，公開了一種從沙苑子80％乙醇水提液中使用大孔吸附樹脂進行吸附分離沙苑子苷的方法。中國專利申請號cn201010603920.4的發明專利中，公開了一種從沙苑子的堿性水或堿性稀醇提液中采用大孔吸附樹脂吸附分離沙苑子苷的方法。因而大孔吸附樹脂應用于des提取后沙苑子苷的富集具有可行性。

技術實現思路

1、針對現有技術存在的問題，本發明的目的在于設計提供從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，采用des和大孔吸附樹脂從沙苑子中提取沙苑子苷。該方法首先通過優選的深度共熔溶劑與提取條件優化，高效獲得沙苑子苷提取液；然后采用大孔吸附樹脂進行吸附分離，從沙苑子苷提取液中分離獲得沙苑子苷。該方法充分發揮des和大孔吸附樹脂的特點，能夠有效獲得沙苑子苷。

2、本發明是通過以下技術方案實現的：

3、一種從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，包括以下步驟：

4、1)制備des：將氫鍵受體與氫鍵供體共熔，得到des(deep?eutectic?solvents，深度低共熔溶劑)，靜置，所述氫鍵受體為氯化膽堿、l-脯氨酸和甜菜堿中的至少一種；所述氫鍵供體為乙酰丙酸、乙二醇、果糖、葡萄糖、三乙二醇、乳酸、尿素、檸檬酸、甘油、丙二醇和蔗糖中的至少一種；所述氫鍵受體與氫鍵供體的摩爾比為(1～2):(1～3)；

5、2)des提?。喝〔襟E1)得到的des與水配成提取溶劑，再將沙苑子粉末與提取溶劑混合均勻，震蕩提取，得到沙苑子苷的提取液；

6、3)大孔吸附樹脂分離沙苑子苷：取步驟2)得到的沙苑子苷提取液，上樣于大孔吸附樹脂，用洗脫液洗脫，濃縮獲得沙苑子苷粗；

7、4)重結晶法純化沙苑子苷：取步驟3)得到的沙苑子苷粗品，用有機溶劑重結晶，得沙苑子苷純品。

8、進一步地，還包括5)des回收：收集步驟3)上樣流出液，將流出液中的水蒸發后，可重新用于沙苑子中沙苑子苷的提取，即完成低共熔溶劑的回收。

9、進一步地，所述步驟1)中所述氫鍵受體為l-脯氨酸；所述氫鍵供體為乙酰丙酸；所述l-脯氨酸與乙酰丙酸的摩爾比為1:(1～3)，具體地，l-脯氨酸與乙酰丙酸的摩爾比為1:2。

10、進一步地，所述步驟1)中共熔處理條件為：60～80℃水浴中攪拌1～3小時。靜置時間為8～15小時。

11、進一步地，所述步驟2)中沙苑子粉末的粒徑小于1mm。

12、進一步地，所述步驟2)中，des與水配成含水率為10～50％的提取溶劑；提取溶劑與沙苑子粉末液料比為5～30ml/g；提取條件為：30～40℃，100～500w超聲下提取20～60min。

13、優選地，所述步驟2)中，des與水配成含水率為30～40％的提取溶劑，提取溶劑與沙苑子粉末液料比為20～25ml/g。

14、進一步地，所述步驟3)中大孔吸附樹脂型號為ads-17、xad-76、dm301、nka-9、hpd-1100、d101或ab-8。

15、進一步地，所述步驟3)中大孔吸附樹脂吸附分離條件為：固液比為0.33～3g/ml，初始上樣濃度20～100μg/ml，吸附溫度為20～30℃。

16、進一步地，所述步驟3)中，用洗脫液洗脫是指依次用蒸餾水、50v％乙醇，70v％乙醇、90v％乙醇洗脫，收集70v％乙醇洗脫液，濃縮獲得沙苑子苷粗品。

17、進一步地，所述步驟4)中，有機溶劑是指采用二氯甲烷和甲醇按體積比(1～3):1組成的有機溶劑。

18、本發明能夠簡便、高效地從沙苑子中獲得沙苑子苷化合物，提取的沙苑子苷得率高，是傳統有機溶劑提取率的10倍以上。本發明提供的提取方法，利用的des是由兩種或者幾種廉價且安全的化合物通過彼此之間氫鍵作用相互結合形成的混合鹽溶液。des極性較大，物理化學性質接近于離子液體，但比離子液體更安全、更便宜、更容易制備，提取程序簡單、提取效率高、分析時間短。相比傳統有機溶劑，des具有原料價格低廉、生物相容性好、難揮發、操作過程簡單、可重復利用等優點，充分體現了綠色化學的特點。其次，本發明中所采用的大孔吸附樹脂可以反復利用，且操作過程簡單，具有較好的工業化應用前景。

技術特征：

1.一種從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據權利要求1所述從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，還包括步驟5）des回收：收集步驟3）上樣流出液，將流出液中的水蒸發后，可重新用于沙苑子中沙苑子苷的提取，即完成低共熔溶劑的回收。

3.根據權利要求1所述的從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，所述步驟1）中共熔處理條件為：60~80℃水浴中攪拌1~3小時。

4.根據權利要求1所述的從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，所述步驟2）中沙苑子粉末的粒徑小于1mm。

5.根據權利要求1所述從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，所述步驟2）中，des與水配成含水率為10~50%的提取溶劑；提取溶劑與沙苑子粉末液料比為5~30?ml/g；提取條件為：30~40℃，100~500w超聲下提取20~60?min。

6.根據權利要求1所述從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，所述步驟3）中，大孔吸附樹脂型號為ads-17、xad-76、dm301、nka-9、hpd-1100、d101或ab-8，大孔吸附樹脂吸附分離條件為：固液比為0.33~3g/ml，初始上樣濃度20~100μg/ml。

7.根據權利要求1所述從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，所述步驟3）中，用洗脫液洗脫是指依次用蒸餾水、50%乙醇，70%乙醇、90%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，濃縮獲得沙苑子苷粗品。

8.根據權利要求1所述從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，所述步驟4）中，有機溶劑是指采用二氯甲烷和甲醇按體積比（1~3）:1組成的有機溶劑。

9.根據權利要求1所述從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，所述步驟1）中，所述氫鍵受體為l-脯氨酸；所述氫鍵供體為乙酰丙酸；所述l-脯氨酸與乙酰丙酸的摩爾比為1:（1~3）。

10.根據權利要求5所述從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，其特征在于，des與水配成含水率為30~40%的提取溶劑；提取溶劑與沙苑子粉末液料比為20~30ml/g；提取條件為：30~40℃，100~500w超聲下提取20~60?min。

技術總結
本發明公開一種從沙苑子中提取沙苑子苷的方法，包括以下步驟：將氫鍵受體與氫鍵供體共熔，得到DES；將DES與水配成提取溶劑，再將沙苑子粉末與提取溶劑混合均勻，超聲提取，得到沙苑子苷的提取液，上樣于大孔吸附樹脂，依次用蒸餾水、50%乙醇，70%乙醇、90%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓濃縮得沙苑子苷粗品；將沙苑子苷粗品重結晶，得沙苑子苷純品；將大孔吸附樹脂的上樣流出液中的水蒸發后，重新用于沙苑子中沙苑子苷的提取，至少可以重復利用三次，實現了低共熔溶劑的重復利用。本發明能夠簡便、高效地從沙苑子中獲得沙苑子苷，提取的沙苑子苷得率是傳統有機溶劑提取率的10倍以上，且具有操作簡便、安全快速、成本低等優點，可實現工業化生產。

技術研發人員：舒朋華,鄒文豪,王慧瑩,賀佳琦,郭婷婷,孟玉,魏夏蘭,黃繼紅,胡鏑,王娜,樊淑賢,劉思敏,鄭晶晶
受保護的技術使用者：許昌學院
技術研發日：
技術公布日：2025/4/28