本發明屬于生物醫藥，具體涉及一種曲霉屬真菌及其應用。

背景技術：

1、公開該背景技術的信息旨在增加對本發明總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

2、帕金森?。╬d）是一種常見的中老年神經系統退行性疾病，主要以黑質多巴胺能神經元進行性退變為特征。隨著疾病的進展，帕金森病的運動和非運動癥狀會逐漸加重，一方面會影響患者的日常生活，另一方面也帶來巨大的社會和醫療負擔。近年來，外源性神經毒素誘導的神經細胞模型已成為帕金森病研究的基本手段，其中6-ohda誘導的pc-12細胞（大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞）損傷模型已成為防治帕金森病藥物體外基礎研究的理想模型。

3、由于各種沉積作用，海底常覆蓋著一層厚度不等的沉積物，沉積物與底層海水間產生不斷的物質交換，使海洋沉積物兼有海洋和陸地的性質又有其獨特的特點，孕育著豐富的微生物資源。真菌是海洋沉積物微生物中的一個主要類群，能夠產生種類豐富的生理活性物質，具有產生各種新型化合物的潛力，是抗炎、抗腫瘤等藥用價值活性代謝物的重要來源，從其發酵產物中篩選出能改善pc-12細胞損傷的代謝產物，對開發具有治療、預防帕金森疾病作用的藥物方面具有重要意義。

技術實現思路

1、針對目前帕金森疾病藥物的迫切需求，本發明提供一種曲霉屬真菌（ aspergillus? tanneir）ujnmf0417，其發酵產物具有改善6-ohda誘導的pc-12細胞損傷的作用，可以用于治療、預防帕金森疾病作用的藥物的研發。

2、本發明的另一目的是提供一種曲霉屬真菌發酵物中分離的能夠改善6-ohda誘導的pc-12細胞損傷的吲哚哌嗪類化合物及其制備方法。

3、為實現上述目的，本發明采用如下技術方案。

4、一種曲霉屬真菌 aspergillus?tanneir?ujnmf0417，保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心（cgmcc），保藏編號為cgmcc?no.41647。

5、上述曲霉屬真菌 aspergillus?tanneirujnmf0417可用于生產防治帕金森疾病作用的藥物或藥物中間體中。所述曲霉屬真菌 aspergillus?tanneirujnmf0417培養后可產生發酵產物，所述發酵產物能夠改善6-ohda誘導的pc-12細胞損傷，可作為開發防治帕金森疾病的藥物或先導化合物。

6、一種上述曲霉屬真菌的發酵產物，通過發酵 aspergillus?tanneirujnmf0417獲得。

7、本發明還提供了上述曲霉屬真菌的提取物。

8、所述提取物為發酵產物經有機溶劑提取后獲得，所述有機溶劑為乙醇和乙酸乙酯；優選地，所述乙醇的濃度為90%-95%。

9、所述提取物為發酵產物經90%-95%乙醇提取，提取液經過乙酸乙酯萃取，萃取液去除溶劑后通過d101大孔樹脂柱層析分離，用30%、50%、75%、95%的乙醇洗脫，保留第二餾分，去除溶劑獲得。

10、所述提取物為發酵產物經90%-95%乙醇提取，提取液經過乙酸乙酯萃??；萃取液去除溶劑后通過d101大孔樹脂柱層析分離，用30%、50%、75%、95%的乙醇洗脫，保留第二餾分；第二餾分以體積比為1:0-0:1的二氯甲烷/甲醇為梯度洗脫的流動相進行正相硅膠柱層析，保留第七餾分，去除溶劑獲得。

11、所述提取物為發酵產物經90%-95%乙醇提取，提取液經過乙酸乙酯萃??；萃取液去除溶劑后通過d101大孔樹脂柱層析分離，用30%、50%、75%、95%的乙醇洗脫，保留第二餾分；第二餾分以體積比為1:0-0:1的二氯甲烷/甲醇為梯度洗脫的流動相進行正相硅膠柱層析，保留第七餾分；然后經過sephadex?lh-20層析柱，保留第三餾分，去除溶劑獲得。

12、所述提取物為發酵產物經90%-95%乙醇提取，提取液經過乙酸乙酯萃取；萃取液去除溶劑后通過d101大孔樹脂柱層析分離，用30%、50%、75%、95%的乙醇洗脫，保留第二餾分；第二餾分以體積比為1:0-0:1的二氯甲烷/甲醇為梯度洗脫的流動相進行正相硅膠柱層析，保留第七餾分；然后經過sephadex?lh-20層析柱，保留第三餾分；第三餾分通過反相c18液相色譜，以體積比為30:70-90:10的甲醇/水梯度洗脫，保留第三餾分，去除溶劑獲得。

13、一種吲哚哌嗪類化合物，其結構如式（i）所示：

14、

15、式（i）。

16、上述吲哚哌嗪類化合物的制備方法，包括以下步驟：

17、（1）發酵曲霉屬真菌 aspergillus?tanneirujnmf0417，獲得發酵物；

18、（2）將步驟（1）所得發酵物依次經乙醇和乙酸乙酯提取得到粗提物；

19、（3）將步驟（2）獲得的粗取物通過d101大孔樹脂柱層析分離，用30%、50%、75%、95%的乙醇洗脫，依次得到fr.1-fr.4四個部分；

20、將fr.2以體積比為1:0-0:1的二氯甲烷/甲醇為梯度洗脫的流動相進行正相硅膠柱層析，依次得到fr.2.1-fr.2.8八個餾分；

21、將餾分fr.2.7經過sephadex?lh-20層析柱，依次得到fr.2.7.1-fr.2.7.5五個餾分；

22、fr.2.7.3通過反相c18液相色譜，以體積比為30:70-90:10的甲醇/水梯度洗脫，依次得到fr.2.7.3.1-fr.2.7.3.5餾分；

23、將fr.2.7.3.3通過制備高效液相色譜，以體積比為60:40的甲醇/水為流動相，流速3.0?ml/min截留tr為27?min的流出液，去除流動相獲得。

24、所述步驟（2）中的乙醇的濃度為90%-95%。

25、本發明提供一種上述曲霉屬真菌、發酵產物、提取物，或如式（i）所示化合物在制備治療帕金森病的藥物、藥物中間體中的用途。

26、一種含有上述如式（i）所示化合物及其醫藥上可接受的鹽的組合物。優選地，所述鹽為吲哚哌嗪類化合物中的-nh-形成的鹽酸鹽、硫酸鹽。

27、本發明具有以下優點：

28、本發明提供的曲霉屬真菌來源于自然界，安全性高，發酵后的產物依次經過乙醇和乙酸乙酯提取后的粗提物具有良好的神經保護活性。本發明提供的的吲哚哌嗪類化合物可以通過 aspergillus?tanneir?ujnmf0417的發酵提取分離獲得，能夠改善6-ohda誘導的pc-12細胞損傷，在制備防治pd的藥物方面具有應用潛力。

29、生物保藏信息

30、 aspergillus?tanneir?，于2024年12月02日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（cgmcc），保藏地址為中國北京，北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏編號為cgmcc?no.41647。