本發明涉及基因工程領域，特別涉及ppp1r3b基因在制備動脈粥樣硬化檢測試劑或治療藥物中的應用。

背景技術：

1、心血管疾病(cvd)作為威脅人類生命健康的“頭號殺手”，具有高發病率和高死亡率的特點。最新數據顯示，截至2021年，全球cvd患者數量約為5.23億，死亡人數達2050萬，占當年總死亡人數的近三分之一。由動脈粥樣硬化(as)引起的動脈粥樣硬化心血管疾病(ascvd)是cvd患者高發病率和死亡率的主要原因。隨著肥胖和心臟代謝疾病的流行，ascvd的發病率持續上升，尤其在65歲以下成年人中增長最為迅速。因此，深入研究ascvd的發病機制是降低cvd患者發病率和死亡率的首要任務。

2、?ascvd是一種慢性血管炎癥疾病，病程涉及內膜損傷、炎癥細胞招募和脂質積累，終末期鈣化和斑塊破裂易造成不可逆器官損傷。ascvd持續惡化的主要原因是斑塊內各種表型的巨噬細胞(mφs)組成了復雜的動脈粥樣硬化炎癥免疫微環境。在這個復雜的斑塊環境中，先天免疫系統中的mφs主要極化為促炎的m1型mφs和抗炎的m2型mφs，它們的代謝調節失衡是as惡化的關鍵因素。mφs代謝重編程主要涉及糖酵解、三羧酸(tca)循環、脂肪酸和氨基酸代謝。不同的代謝途徑滿足不同表型mφs的能量代謝需求。

技術實現思路

1、本發明的目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種ppp1r3b基因在制備動脈粥樣硬化檢測試劑中的應用。

2、本發明的另一目的在于，提供一種ppp1r3b基因在制備動脈粥樣硬化治療藥物中的應用。

3、本發明的目的通過下述技術方案實現：

4、ppp1r3b基因在制備動脈粥樣硬化檢測試劑中的應用。

5、所述的ppp1r3b基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

6、一種ppp1r3b基因在制備動脈粥樣硬化檢測試劑，包括檢測ppp1r3b基因表達水平的試劑。

7、上調ppp1r3b基因表達水平的試劑在制備動脈粥樣硬化治療藥物中的應用。

8、上調ppp1r3b基因表達水平的試劑在制備m2型mφ巨噬細胞極化誘導劑中的應用。

9、一種動脈粥樣硬化治療藥物，包括上調ppp1r3b基因表達水平的試劑。

10、所述的上調ppp1r3b基因表達水平的試劑為ppp1r3b過表達載體。

11、所述的ppp1r3b過表達載體為將ppp1r3b基因插入質粒后得到的載體；優選為插入慢病毒過表達質粒得到的載體；更優選為插入慢病毒過表達質粒pgmlv-cmv-mcs-3×flag-ef1-zsgreen1-t2a-puro得到的載體。

12、所述的ppp1r3b過表達載體的制備方法包括如下步驟：

13、以pgmlv-cmv-mcs-3×flag-ef1-zsgreen1-t2a-puro為出發質粒，將ppp1r3b基因（seq?id?no.1）插入多克隆位點，構建得到ppp1r3b過表達載體pgmlv-cmv-ovppp1r3b-3×flag-ef1-zsgreen1-t2a-puro，表達測序驗證通過后提取得到ppp1r3b過表達載體。

14、所述的上調ppp1r3b基因表達水平的試劑為ppp1r3b過表達載體與包裝質粒共同轉染制備得到的ppp1r3b過表達慢病毒。

15、所述的ppp1r3b過表達慢病毒的制備方法包括如下步驟：

16、在培養皿中培養aav?pro-293t細胞，使用hg-transgene?transfection?reagen轉染試劑將包裝質粒和ppp1r3b過表達載體轉染到細胞中，培養后離心收集得到ppp1r3b過表達病毒。

17、所述的動脈粥樣硬化治療藥物，還包括stat3?agonist?1。

18、所述的動脈粥樣硬化治療藥物，還包括藥學上可接受的輔料。

19、本發明相對于現有技術具有如下的優點及效果：

20、本發明聚焦于關鍵基因ppp1r3b，作為動脈粥樣硬化診療的可靠靶點，通過外源上調ppp1r3b表達，誘導m2型mφ巨噬細胞極化，能夠減輕斑塊炎性微環境，促進糖脂代謝重編程，支持細胞所需能量負荷，延緩動脈粥樣硬化斑塊進展，改善心血管疾病患者生存質量，降低心腦血管事件發病率，可應用于制備動脈粥樣硬化診斷試劑和治療藥物中。。

技術特征：

1.ppp1r3b基因在制備動脈粥樣硬化檢測試劑中的應用。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：

3.一種ppp1r3b基因在制備動脈粥樣硬化檢測試劑，其特征在于：

4.上調ppp1r3b基因表達水平的試劑在制備動脈粥樣硬化治療藥物中的應用。

5.上調ppp1r3b基因表達水平的試劑在制備m2型mφ巨噬細胞極化誘導劑中的應用。

6.一種動脈粥樣硬化治療藥物，其特征在于：

7.根據權利要求6所述的動脈粥樣硬化治療藥物，其特征在于：

8.根據權利要求6所述的動脈粥樣硬化治療藥物，其特征在于：

9.根據權利要求6～8任一所述的動脈粥樣硬化治療藥物，其特征在于：

10.根據權利要求6～8任一所述的動脈粥樣硬化治療藥物，其特征在于：

技術總結
本發明公開了PPP1R3B基因在制備動脈粥樣硬化檢測試劑或治療藥物中的應用。本發明首次發現PPP1R3B基因作為動脈粥樣硬化診療的可靠靶點，通過外源上調PPP1R3B表達，誘導M2型MΦ巨噬細胞極化，能夠減輕斑塊炎性微環境，促進糖脂代謝重編程，支持細胞所需能量負荷，延緩動脈粥樣硬化斑塊進展，改善心血管疾病患者生存質量，降低心腦血管事件發病率，可應用于制備動脈粥樣硬化診斷試劑和治療藥物中。

技術研發人員：紀建松,沈霖,盧陳英,陳敏江,虞俊超,畢嫣然,蔣承立,鐘屹,翟夢倩,李君艷,胡偉銘,馬成,楊張瑜,龐梓煜
受保護的技術使用者：麗水市中心醫院
技術研發日：
技術公布日：2025/4/24