專利名稱：現場用快速免疫檢測試劑盒及其檢測方法
技術領域：
本發明屬于免疫檢測技術領域，特別是涉及一種現場用快速免疫檢測試劑盒及其檢測方法。
背景技術：
目前，現行的競爭法免疫層析檢測試紙條制作時，在支持板(如PVC板)上依次粘貼有樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜、吸水墊等。在硝酸纖維素膜上劃線包被1條抗原線作為檢測線(T線)，在其下游包被1條二抗線用予捕獲抗體線作為參考線。然后依次粘貼樣品墊、金標墊、吸水墊，即組合為快速檢測試紙。檢測時，于樣品墊上滴加水溶液樣品，5 IOmin內觀察顏色。若檢測線呈現紅顏色，表明樣品為陰性；若檢測線不顯色，表明樣品為陽性。無論樣品是陰性還是陽性，參考線應該顯色，若參考線不顯色，表明該試紙失效。現行的競爭法免疫層析檢測試紙條是“單份”測定而且試紙條上的質控線(C線) 實際上是測定一抗的存在，至于一抗有否失活是測不出來的。假如，待測樣品中目標物不存在(陰性)，而金標抗體失活不能和T線上包埋的抗原結合但照樣會被C線上的二抗捕獲顯色而得出陽性結果。而實際上是因試紙條失效而顯示的假陽性。相反，假如待測樣品中目標物存在，但質控線C線上捕獲抗體(二抗)失活而金標抗體正常，那么金標抗體和目標物結合后不能和T線上包埋的抗原結合(這是正常陽性情景)但由于不能與C線上失活的捕獲蛋白/抗體結合顯色而得出試紙條失效的結論。而實際上應該是陽性。因此現行的競爭法免疫層析檢測試紙條的質控線(C線)的結果不能完全用于評價試紙條質量的好壞。

發明內容
本發明為解決公知技術中存在的技術問題，而提供一種現場用快速免疫檢測試劑盒及其檢測方法。本發明公開一種現場用競爭法免疫檢測試劑盒。該試劑盒包括一個三反應槽測試板或多反應槽測試板，樣品稀釋液反應液，液滴瓶，一組陽性對照和陰性對照，試紙條和顯色液。測試板含有三個或三個以上反應槽的成形板?？捎糜谕瑫r測定陽性對照，陰性對照以及一個或一個以上的待測樣品。測試板是具有固定形狀可盛裝液體、常溫常壓下化學性質穩定不與待測的樣品及檢測系統中的物質發生化學反應的成形板。該測試板可以是一次性使用的也可以是經洗滌后可多次使用的。該測試板的反應槽可以是臥式排列，也可以是立式排列。測試板是一個含有三個或三個以上反應槽的塑膠板(比如聚苯乙烯)或紙質板。反應液含有預先標記好的可特異性地識別待測分子的抗體。該特異抗體的標記可以是膠體金，酶(如過氧化氫酶，堿性磷酸酶)，熒光分子或其它有助于直接或間接地測試被標記抗體的分子。試紙條含有預先包埋好的抗原分子或半抗原偶聯分子。該抗原或半抗原是可以被所述的反應液中含有的抗體所識別的分子。也可以是能與待測分子競爭性地與所述反應液中的抗體相結合的分子。陽性對照和陰性對照試劑盒中的至少有一個已知濃度的陽性對照其所含的待測目標分子的濃度正好是臨床需求或產品質量要求上的界限濃度。比如含有1微克/毫升三聚氰胺的牛奶。因此，這樣的陽性對照可以用于直觀地比較測定樣品是否超標。試劑盒中的至少有一個不含待測目標分子的陰性對照。比如不含三聚氰胺的牛奶。這樣通過比較陰性對照、陽性對照和定測定樣品的顯色程度可以校準確地界定測定樣品所含的待測目標分子的濃度范圍，并可用于判定檢測系統本身有否失效。試劑盒中的可以有一個以上不同濃度的陽性對照組最好其中有一個對照所含的待測目標分子的濃度正好是臨床需求或待測產品質量要求上的界限濃度。比如含有1微克/毫升三聚氰胺的牛奶。這樣的一組陽性對照組可以用于半定量測定樣品中待測目標分子的濃度。顯色液是可以根據稀釋液中的特異抗體的標記來配套的。滴瓶滴瓶的口配有一套蓋子內蓋和外蓋。內蓋是有通道的蓋，通道上裝有一慮膜的以防止細菌進入瓶內，同時在使用瓶內液體時防止瓶內沉淀物被擠出造成濃度不均，也防止液體逆流，所述慮膜的孔徑在0. I-IOu之間；外蓋是可以蓋在內蓋上的蓋子以防液體蒸發而改變瓶內液體濃度。試劑盒中的反應液、陽性對照液、陰性對照夜，待測樣品液、稀釋液和顯色液是分別裝在相同規格的滴瓶里，這樣可根據擠出液體的滴數來確定其添加量。所述滴瓶的口徑控制在一定的范圍，比如每滴50微升誤差不超過+/-3微升。本發明的目的之一是提供一種具有結構簡單，使用方便，檢測效率高，實現在一次實驗中同時測定未知濃度的樣品和已知濃度的陽性對照和陰性對照以便正確地界定檢測結果和有效性，便捷進行半定量地界定被檢樣品中所含目標分子的濃度等特點的現場用快速免疫檢測試劑盒。本發明現場用快速免疫檢測試劑盒為解決現有技術問題所采取的技術方案是一種現場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是試劑盒包括一個測試板，反應液，液滴瓶，一組陽性對照和陰性對照，試紙條。本發明現場用快速免疫檢測試劑盒還可以采用如下技術措施所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是試劑盒還包括洗滌液，顯色液和塑料吸管。所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是測試板為三反應槽測試板或多反應槽測試板；測試板具有固定形狀可盛裝液體，常溫常壓下化學性質穩定不與待測的樣品及檢測系統中的物質發生化學反應的成形板。所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是測試板有反應槽、顯色槽和洗滌槽。所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是測試板上槽的排列方式是臥式排列或立式排列；測試板上的槽是固定型或可拆撤型設置。所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是液滴瓶的濾膜孔徑為0. I-IOu0所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是液滴瓶的內蓋的外形為圓柱形或錐形，外蓋的內側形狀與內蓋的外形相一致。所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特點是液滴瓶的口徑一致，每滴液40-60 微升，誤差小于3微升。本發明的目的之二是提供一種操作便捷，檢測效率高，在一次現場用競爭法免疫檢測實驗中，同時測定未知濃度的樣品和已知濃度(一個或一組)的陽性對照和陰性對照， 從而能正確地界定檢測結果及有效性，或進行半定量地界定被檢樣品中所含目標分子的濃度等特點的現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法。本發明現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法為解決現有技術問題所采取的技術方案是現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，其特征是檢測方法包括以下過程在測試板上的各反應槽中加入反應液；反應液含有預先標記好的可特異性地識別待測分子的抗體；再分別在兩個反應槽中加入陽性對照和陰性對照，其它反應槽中加入待測樣品， 混勻；然后，取試紙條并標記，分別用于測試陽性對照，陰性對照和待測樣品，分別置于測試板上的反應槽中；搖混勻后在室溫下進行孵育；取洗滌液或蒸餾水置于洗滌槽，取顯色液置于顯色槽；當反應液中所含預標記抗體為金標抗體時，孵育直至試紙條上有清晰的色帶出現；取出試紙條轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色；或當反應液中所含預標記抗體為酶標(如過氧化氫酶標記)抗體時，將孵育好的試紙條轉移到洗滌槽中，漂洗后轉移到顯色槽；輕晃或靜置顯色，直至試紙條上有清晰的色帶出現；取出試紙條轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色；比較試紙條上陽性對照、陰性對照和待測樣品的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。本發明現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法還可以采用如下技術措施所述的現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，其特點是試紙條含有預先包埋好的抗原分子或半抗原偶聯分子；陽性對照是所含的待測目標分子的濃度正好是臨床需求或產品質量要求上的界限濃度；陰性對照是不含待測目標分子的陰性對照。所述的現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，其特點是搖混勻后在室溫下進行孵育的時間為10-30分鐘。本發明具有的優點和積極效果是現場用快速免疫檢測試劑盒及其檢測方法由于采用了本發明全新的技術方案，與現有技術相比，本發明具有結構簡單，使用方便，檢測效率高特點。本發明實現了在一次現場用競爭法免疫檢測實驗中，同時測定未知濃度的樣品和已知濃度(一個或一組)的陽性對照和陰性對照，避免了使用現行的競爭法免疫層析試紙條時可能隱藏的假陽性和假失效的結果(現行的競爭法免疫層析試紙條是“單份”測定試紙條因此無法實現同時測定一組已知陽性和陰性的對照物)，從而能正確地界定檢測結果及有效性，或進行半定量地界定被檢樣品中所含目標分子的濃度。


圖1是本發明現場用快速免疫檢測試劑盒結構示意圖；圖2是三槽測試板臥式槽排列結構示意圖；圖3是圖2的左視結構示意圖；圖4是多槽測試板立式槽排列結構示意圖；圖5是圖2的左視結構示意圖；圖6是錐形內蓋液滴瓶結構示意圖；圖7是圓柱形內蓋液滴瓶結構示意圖。圖中1-測試板；1. 1-反應槽；1. 2-洗滌槽；1. 3-顯色槽；2_反應液；3_液滴瓶； 3. 1-外蓋；3. 2-濾膜；3. 3-內蓋；3. 4-瓶頸；3. 5-瓶身；4-陽性對照；5-陰性對照；6-試紙條；7-顯色液，8-塑料吸管。
具體實施例方式為能進一步了解本發明的技術內容、特點及功效，茲例舉以下實施例，并配合附圖詳細說明如下參閱附圖1至圖7。實施例1一種現場用快速免疫檢測試劑盒，包括一個測試板1，反應液2，液滴瓶3，一組陽性對照4和陰性對照5，試紙條6和顯色液7 ；液滴瓶口設有內蓋3. 1和外蓋3. 2，內蓋3. 1 有通道，通道上裝有濾膜3. 3，濾膜孔徑為0. I-IOu0外蓋3.2蓋在內蓋3. 1上，液滴瓶的內蓋的外形為圓柱形或錐形，外蓋的內側形狀與內蓋的外形相一致。液滴瓶的口徑一致，每滴液40-60微升，誤差小于3微升。測試板為三反應槽測試板或多反應槽測試板；測試板具有固定形狀可盛裝液體， 常溫常壓下化學性質穩定不與待測的樣品及檢測系統中的物質發生化學反應的成形板。測試板有反應槽、顯色槽和洗滌槽。測試板上槽的排列方式是臥式排列或立式排列；測試板上的槽是固定型或可拆撤型設置。實施例2現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，包括以下過程在測試板上的各反應槽中加入0. 5毫升反應液，反應液含有預先標記好的可特異性地識別待測分子的抗體；再分別在反應槽1和反應槽2中加入0. 5毫升陽性對照和陰性對照，其它反應槽中加入待測樣品，混勻后待用。然后，任取三條(如果有多個待測樣品，則取試紙條數=2+待測樣品數)試紙條 (含有預先包埋好的抗原)用鉛筆標上1，2，3分別用于測試陽性對照，陰性對照和待測樣品，再分別置于測試板上的1，2，3三個反應槽中(對號入座)。輕搖混勻后在室溫下孵育10-30分鐘。在這期間，取10毫升洗滌液(或蒸餾水) 置于洗滌槽中，3毫升顯色液置于顯色槽中。然后，用小鑷子將孵育好的試紙條取出并轉移到洗滌槽中，來回劃動漂洗6下(約3秒鐘)后再轉移到顯色槽中。輕晃或靜置顯色，直至試紙條上有清晰的色帶出現，取出試紙條并轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色。比較試紙條1 (陽性對照)，2 (陰性對照)和3 (待測樣品)上的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。檢測結果分析正常情況下，陽性對照顯淺色色帶，陰性對照顯深色色帶；如果該被檢樣品的色帶比陽性對照深但比陰性對照淺，說明該被檢樣品為弱陽性但沒有超標；如果該被檢樣品的色帶比陽性對照同樣淺或更淡甚至無顯色，說明該被檢樣品為陽性超標。實施例3現場用氨苷青霉素(ampicillin)試紙條速測試劑盒。1.原材料及試劑制備多槽測試板如圖4和圖5所示。稀釋液將1克BSA (牛血清蛋白，購于SIGMA公司)溶于100毫升PBS緩沖液，便制得BSA/PBS。無菌過濾后置于冰箱備用。反應液用上述稀釋液將過氧化氫酶-酶標氨苷青霉素(Ampicillin-HRP，購于 RANDOX公司)按每毫升1微克稀釋，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。
抗體溶液用PBS緩沖液將羊抗氨苷青霉素抗體(購于RANDOX公司)按每毫升10 微克稀釋后置于冰箱備用。試紙條將硝基纖維膜(NC膜，購于FISHER公司)切成0. 3cmx2cm小條，準備10 條，并在每個小條的一端用馬克筆作個標記(如Fu)以定為正面上端。然后將上述抗體溶液點滴或畫線于小條NC膜的正面中間(標記號下面約0.5cm處)，每點或每線2微升。待其自然干燥后，用上述稀釋液5毫升浸泡1小時以封閉NC膜表面無抗體點滴或畫線的部位。37°C干燥后，用塑料簿膜將每一試紙條分別包好后置于干燥處備用。陽性對照用稀釋液或待測樣品同樣的液體(比如牛奶)將氨苷青霉素 (ampicillin購于SIGMA公司)配成lOug/ml溶液，準備5毫升，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。陰性對照不含氨苷青霉素的稀釋液或待測樣品同樣的液體(比如牛奶)。準備5 毫升，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，，置于冰箱備用。試樣模擬陽性牛奶1毫升鮮牛奶加氨苷青霉素20微克，現配現用。洗滌液PBS緩沖液+0. 1 % Tween-20，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。顯色液DAB顯色液(購于SIGMA公司)。無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里， 置于冰箱備用。(將上述反應液、陽性對照液、陰性對照夜，稀釋液和顯色液是分別裝在本發明所述的具有相同規格的滴瓶里(比如滴瓶的口徑控制在每滴50微升誤差不超過+/-2微升)。塑料吸管l-ml刻度的3. 9毫升塑料中吸管(購于Lab Safety Supply公司)1 根。2.檢測方法1)按下述順序，滴取6滴(約0. 3毫升)陰性對照液轉移到測試板上的#1反應槽，滴取6滴(約0. 3毫升)陽性對照液到測試板上的#2反應槽，滴取6滴(約0. 3毫升) 待測樣品到測試板上的#3反應槽；然后，分別滴取6滴(約0. 3毫升)反應液到測試板上的#1，#2，#3反應槽；輕晃混勻。2)任取三個試紙條，在試紙條的正面下端用馬克筆分別標記上#1、#2、#3。然后將其分別浸入測試板上的#1，#2，#3反應槽中。輕晃待試紙條完成浸濕后，室溫靜置并不時晃動20分鐘。3)在這期間，取10毫升洗滌液(或蒸餾水)置于洗滌槽中，3毫升顯色液置于顯色槽中。20分鐘時間到后，用小鑷子將試紙條取出并轉移到洗滌槽中，來回劃動漂洗6下 (約3秒鐘)后再轉移到顯色槽中，正面朝上。4)用吸管吸取2毫升顯色液覆蓋于試紙條上，靜置顯色，直至試紙條上有清晰的色帶出現。取出試紙條并轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色。5)比較試紙條1 (陰性對照)，2 (陽性對照)和3 (被測樣品)上的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。檢測結果如下陽性對照顯淺色色帶，陰性對照顯深色色帶；該被檢樣品的色帶比陽性對照略淺，說明該被檢樣品為陽性并略超標(> lOug/ml)。實施例4現場用氨苷青霉素(ampicillin)膠體金試紙條速測試劑盒。1.原材料及試劑制備氨苷青霉素(ampicillin購于SIGMA公司)氨苷青霉素-BSA偶聯抗原是通過EDC介導將半抗原氨苷青霉素與載體蛋白BSA 偶聯，既將EDC、氨苷青霉素、BSA按摩爾數20 20 1溶解于PBS緩沖液，并在室溫反應 2小時，然后通過透析去除游離的EDC和氨苷青霉素后獲得。膠體金(購于SPI Supplies公司)·抗氨苷青霉素抗體(購于RANDOX公司)金標抗氨苷青霉素抗體用PBS透析抗體以除去鹽分，取金溶膠anl，用0. lmol/L K2CO3或0. lmol/L HCl調節金溶膠至pH = 9，加入^iig (約0. 5ml)的抗體溶液，攪拌2 3 分鐘。加入2ml 1% PEG20000溶液，于10000 IOOOOOg離心，小心吸去上清液；將沉淀懸浮于一定的緩沖液中，離心沉淀后，再用同一緩沖液恢復，濃度以A lcm/540nm = 1. 5左右為宜，置4°C保存。既制得金標抗氨苷青霉素抗體。多槽測試板如圖4和圖5所示。稀釋液將1克BSA (牛血清蛋白，購于SIGMA公司)溶于100毫升PBS緩沖液，便制得BSA/PBS。無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。反應液用上述稀釋液將金標抗氨苷青霉素抗體按每毫升1微克稀釋，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。包埋抗原溶液用PBS緩沖液將氨苷青霉素-BSA偶聯抗原按每毫升10微克稀釋后置于冰箱備用。試紙條將硝基纖維膜(NC膜，購于FISHER公司)確切成0. 3cmx2cm小條，準備 10條，并在每個小條的一端用馬克筆作個標記(如Fu)以定為正面上端。然后將上述包埋抗原溶液點滴或畫線於小條NC膜的正面中間(標記號下面約0. 5cm處)，每點或每線2微升。待其自然干燥后，用上述稀釋液5毫升浸泡1小時以封閉NC膜表面無包埋抗原的部位。37°C干燥后，用塑料簿膜將每一試紙條分別包好后冷藏干燥處備用。陽性對照用稀釋液或待測樣品同樣的液體(比如牛奶)將氨苷青霉素 (ampicillin購于SIGMA公司)配成lOug/ml溶液，準備5毫升，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。陰性對照不含氨苷青霉素的稀釋液或待測樣品同樣的液體(比如牛奶)。準備5 毫升，裝在本發明所述的滴瓶里，無菌過濾后置于冰箱備用。試樣模擬陽性牛奶1毫升鮮牛奶加氨苷青霉素20微克，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，現配現用。(將上述反應液、陽性對照液、陰性對照夜，待測樣品液分別裝在本發明所述的具有相同規格的滴瓶里(比如滴瓶的口徑控制在每滴50微升誤差不超過+/-2微升)。塑料吸管l-ml刻度的3. 9毫升塑料中吸管(購于Lab Safety Supply公司)1 根。2.檢測方法1)滴取6滴(約0. 3毫升)陰性對照液轉移到測試板上的#1反應槽，滴取6滴 (約0. 3毫升)陽性對照液到測試板上的#2反應槽，滴取6滴(約0. 3毫升)待測樣品到測試板上的#3反應槽；2)任取三個試紙條，在試紙條的正面下端用馬克筆分別標記上#1、#2、#3。然后將其分別浸入測試板上的#1，#2，#3反應槽中。輕晃待試紙條完成浸濕。3)分別滴取6滴(約0. 3毫升)反應液到測試板上的#1，#2，#3反應槽；輕晃混勻，室溫孵育并不時晃動約20分鐘，直至試紙條上有清晰的色帶出現。4)在這期間，取10毫升洗滌液(或蒸餾水)置于洗滌槽中，用小鑷子將試紙條取出并轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色。5)比較試紙條1 (陰性對照)，2 (陽性對照)和3 (被測樣品)上的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。檢測結果如下陽性對照顯淺色色帶，陰性對照顯深色色帶；該被檢樣品的色帶比陽性對照略淺，說明該被檢樣品為陽性并略超標(> lOug/ml)。實施例5現場用半定量氨苷青霉素(ampicillin)測試條速測試劑盒。1.原材料及試劑制備稀釋液將1克BSA (牛血清蛋白，購于SIGMA公司)溶于100毫升PBS緩沖液，便制得BSA/PBS。無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。反應液用上述稀釋液將過氧化氫酶-酶標氨苷青霉素(Ampicillin-HRP，購于 RANDOX公司)按每毫升0. 1微克稀釋后分裝于:3ml-液滴瓶每瓶2毫升，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。抗體包被液用碳酸鈉/碳酸氫鈉緩沖液(pH 9. 2)將羊抗氨苷青霉素抗體(購于 RANDOX公司)按每毫升1微克稀釋后置于冰箱備用。多槽測試板8槽可拆撤ELISA測試條(購于Fisher Scientific公司)兩條。測試條準備12條8槽可拆撤ELISA測試條(購于Fisher Scientif ic公司)，在每個條的一端用馬克筆作個標記(如上)以定為上端。然后在每個槽內加入100微升上述抗體包被液，置于冷藏室(1_8°C)過夜包被，除去抗體包被液并用洗滌液洗槽3次，然后在每個槽內加入200微升稀釋液，置于室溫孵育2小時后除去稀釋液并用洗滌液洗槽3次， 然后置于37-45°C干燥后用塑料鋁膜袋將包裝好后冷藏干燥處備用。標準對照液用稀釋液將純氨苷青霉素(ampicillin)分別配成lug/ml，0. Iug/ ml，0. 0lug/ml和Oug/ml溶液，分裝于:3ml-液滴瓶，每瓶1毫升，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。試樣模擬陽性牛奶用鮮牛奶加氨苷青霉素(ampicillin)配成0. lug/ml (試樣 a)和10ug/ml (試樣b)兩組，現配現用。洗滌液PBS緩沖液+0. Tween-20，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。顯色液TMB顯色液(購于SIGMA公司)，無菌過濾后裝在本發明所述的滴瓶里，置于冰箱備用。終止液1N HCl溶液(購于SIGMA公司)，裝在本發明所述的滴瓶里。2.檢測方法1)取一事先包被好的(見上述)測試條，分別滴加2滴(約0. 1毫升)氨苷青霉素標準對照液(分別含氨苷青霉素lug/ml，0. lug/ml,0. Olug/ml和Oug/ml溶液)到測試條上的A、B、C、D槽，滴加2滴(約0. 1毫升)待測樣品a和b到測試條的E和F槽；(可根據需要，每個標準對照液和樣品重復1-2組)。2)分別滴加2滴(約0. 1毫升)反應液到各反應槽；輕晃混勻，室溫孵育并不時晃動約30分鐘。3)用洗滌液洗反應槽3次，每次0. 3毫升/槽，將測試條倒扣在吸水紙以除去殘留水分。4)分別滴加4滴(約0. 2毫升)顯色液到各反應槽，室溫孵育至藍綠色顯現。5)分別滴加4滴(約0. 2毫升)終止液到各反應槽，以終止色顯。6)結果判斷比較被檢樣品槽與各標準液槽的顏色深淺程度以判定該被檢樣品含氨苷青霉素濃度的范圍。因為是競爭反應，顏色越深說明含氨苷青霉素濃度越低。被檢樣品E槽與B槽相近，說明該被檢樣品a含氨苷青霉素在0. 1左右。被檢樣品F槽比B槽還淺，說明該被檢樣品b含氨苷青霉素在lug/ml之上。結果判斷方法如果被檢樣品顏色與陰性對照(D槽，含氨苷青霉素Oug/ml)相同或略深說明該被檢樣品為陰性。如果被檢樣品顏色比A槽(含氨苷青霉素lug/ml)還淺說明該被檢樣品含氨苷青霉素超過lug/ml ；如果被檢樣品顏色比A槽深但比B槽淺說明該被檢樣品含氨苷青霉素在0. Ι-lug/ml之間；如果被檢樣品顏色比B槽深但比C槽淺說明該被檢樣品含氨苷青霉素在0. 01-0. lug/ml之間。
權利要求
1.一種現場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是試劑盒包括一個測試板，反應液，液滴瓶，一組陽性對照和陰性對照，試紙條；所述的反應液、陽性對照和陰性對照是裝在液滴瓶內；所述的液滴瓶瓶口裝有濾膜。
2.按照權利要求1所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是試劑盒包括洗滌液， 顯色液和塑料吸管。
3.按照權利要求1所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是液滴瓶口設有內蓋禾口夕卜蓋，內蓋有通道，通道上裝有濾膜，外蓋蓋在內蓋上。
4.按照權利要求1所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是測試板為三反應槽測試板或多反應槽測試板；測試板具有固定形狀可盛裝液體，常溫常壓下化學性質穩定不與待測的樣品及檢測系統中的物質發生化學反應的成形板。
5.按照權利要求1或4所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是測試板有反應槽、顯色槽和洗滌槽；測試板上槽的排列方式是臥式排列或立式排列；測試板上的槽是固定型或可拆撤型設置。
6.按照權利要求3所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是液滴瓶的濾膜孔徑為 0. I-IOu0
7.按照權利要求3或6所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是液滴瓶的內蓋的外形為圓柱形或錐形，外蓋的內側形狀與內蓋的外形相一致。
8.按照權利要求1、3或6所述的現場用快速免疫檢測試劑盒，其特征是液滴瓶的口徑一致，每滴液40-60微升，誤差小于3微升。
9.按照權利要求1所述的現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，其特征是檢測包括以下過程，在測試板上的各反應槽中加入反應液；反應液含有預先標記好的可特異性地識別待測分子的抗體；再分別在兩個反應槽中加入陽性對照和陰性對照，其它反應槽中加入待測樣品，混勻；然后，取試紙條并標記，分別用于測試陽性對照，陰性對照和待測樣品，分別置于測試板上的反應槽中；搖混勻后在室溫下進行孵育；取洗滌液或蒸餾水置于洗滌槽，取顯色液置于顯色槽；當反應液中所含預標記抗體為金標抗體時，孵育直至試紙條上有清晰的色帶出現；取出試紙條轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色；或當反應液中所含預標記抗體為酶標抗體時，將孵育好的試紙條轉移到洗滌槽中，漂洗后轉移到顯色槽；輕晃或靜置顯色，直至試紙條上有清晰的色帶出現；取出試紙條轉移到洗滌槽中漂洗以終止顯色；比較試紙條上陽性對照、陰性對照和待測樣品的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。
10.按照權利要求9所述的現場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，其特征是試紙條含有預先包埋好的抗原分子或半抗原偶聯分子；陽性對照是所含的待測目標分子的陽性對照液，待測目標分子的濃度正好是臨床需求或產品質量要求上的界限濃度；陰性對照是不含待測目標分子的陰性對照液。
全文摘要
本發明涉及一種現場用快速免疫檢測試劑盒及其檢測方法。本發明屬于免疫檢測技術領域。現場用快速免疫檢測試劑盒，包括測試板，反應液，液滴瓶，陽性對照和陰性對照，試紙條?，F場用快速免疫檢測試劑盒的檢測方法，包括在測試板不同反應槽內加入反應液；再在不同反應槽內分別加入陽性對照、陰性對照和待測樣品；再放入試紙條進行孵育顯色，或孵育好的試紙條漂洗后轉移到顯色槽顯色；比較試紙條上陽性對照、陰性對照和待測樣品的色帶深淺程度以確定該被檢樣品是陽性還是陰性。本發明具有檢測高效、便捷、一次實驗正確界定檢測結果的有效性和半定量地界定被檢樣品中目標分子濃度等優點。
文檔編號G01N33/558GK102565387SQ20121000684
公開日2012年7月11日 申請日期2012年1月9日 優先權日2012年1月9日
發明者鄒潮 申請人:哈德遜(天津)生物技術有限責任公司