給毛細(xì)管內(nèi)壁涂層電動(dòng)增壓在線富集毛細(xì)管電泳分析芳香族羧酸的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種給毛細(xì)管內(nèi)壁涂層電動(dòng)增壓在線富集毛細(xì)管電泳分析芳香族羧酸的方法，首先利用氫氧化四丁胺給毛細(xì)管內(nèi)壁動(dòng)態(tài)涂層，使毛細(xì)管電泳電滲流轉(zhuǎn)向；在含有8mmol/L的β-CD的pH9.0的30mmol/L硼砂緩沖溶液中，實(shí)現(xiàn)同向電滲流條件下的2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的分離；進(jìn)樣前先在0.5psi壓力下進(jìn)入引入前導(dǎo)電解質(zhì)20s，然后-10kV下引入樣品100s,然后利用3-（cyclohexylamino）-1-propane?sulphonic?acid作為終結(jié)電解質(zhì)，實(shí)現(xiàn)了2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的電動(dòng)增壓在線富集和分離。
【專利說明】給毛細(xì)管內(nèi)壁涂層電動(dòng)增壓在線富集毛細(xì)管電泳分析芳香族羧酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及毛細(xì)管電泳分析領(lǐng)域，具體為一種給毛細(xì)管內(nèi)壁涂層電動(dòng)增壓在線富集毛細(xì)管電泳分析芳香族羧酸的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis)是經(jīng)典電泳技術(shù)與現(xiàn)代微柱分離相結(jié)合的產(chǎn)物。是離子或荷電粒子以電場為驅(qū)動(dòng)力，在毛細(xì)管中按其淌度或/和分配系數(shù)不同進(jìn)行高效、快速分離的一種電泳新技術(shù)。在應(yīng)用廣泛的區(qū)帶毛細(xì)管電泳(capillary zoneelectrophoresis, CZE)中，毛細(xì)管和電極槽內(nèi)充有相同組分和相同濃度的背景電解質(zhì)溶液(緩沖溶液)。樣品從毛細(xì)管的一端(稱為進(jìn)樣端)導(dǎo)入。當(dāng)毛細(xì)管的兩端加上一定的電壓后，荷電溶質(zhì)便朝與其電荷極性相反的電極方向移動(dòng)。由于樣品組分間的淌度不同，他們的遷移速度不同，因而經(jīng)過一定時(shí)間后，各組分將按其速度(或淌度)大小順序，依次到達(dá)檢測(cè)器被檢出，得到按時(shí)間分布的電泳譜圖。用譜峰的遷移時(shí)間(tm)或類似于色譜學(xué)的術(shù)語保留時(shí)間(tj做定性分析，按其譜峰的高度(h)或峰面積(A)做定量分析。現(xiàn)有技術(shù)缺點(diǎn)是芳香族羧酸在毛細(xì)管電泳分析中富集因數(shù)低，毛細(xì)管內(nèi)壁電滲流的精密度低，這些對(duì)影響分析數(shù)據(jù)的精確性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種給毛細(xì)管內(nèi)壁涂層電動(dòng)增壓在線富集毛細(xì)管電泳分析芳香族羧酸的方法，以增加芳香族羧酸的富集因數(shù)，提高電滲流精密度，促進(jìn)分析數(shù)據(jù)的精確性。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:一種給毛細(xì)管內(nèi)壁涂層電動(dòng)增壓在線富集毛細(xì)管電泳分析芳香族羧酸的方法，包括如下步驟:
[0005]1、利用氫氧化四丁胺給毛細(xì)管內(nèi)壁動(dòng)態(tài)涂層，使毛細(xì)管電泳電滲流轉(zhuǎn)向；
[0006]2、在含有8mmol/L的β -⑶的ρΗ9.0的30mmol/L硼砂緩沖溶液中，實(shí)現(xiàn)同向電滲流條件下的2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的分離；
[0007]3、進(jìn)樣前先在0.5psi壓力下進(jìn)入引入前導(dǎo)電解質(zhì)20s，然后-1OkV下引入樣品100s,然后利用 3_ (cyclohexylamino) -1-propane sulphonic acid 作為終結(jié)電解質(zhì),實(shí)現(xiàn)了 2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的電動(dòng)增壓在線富集和分離。
[0008]步驟I中，利用氫氧化四丁胺給毛細(xì)管內(nèi)壁動(dòng)態(tài)涂層具體為，將毛細(xì)管在20psi下，lmol/L氫氧化鈉沖洗20分鐘；20psi下,水沖洗20分鐘；20psi下,0.005mol/L氫氧化四丁胺沖洗20分鐘；20psi下，水沖洗20分鐘，使毛細(xì)管電泳電滲流轉(zhuǎn)向。
[0009]本發(fā)明具有如下有益效果:和常規(guī)進(jìn)樣毛細(xì)管電泳相比(背景電解質(zhì)含有Smmol/L的β -CD的ρΗ9.0的30mmol/L硼砂緩沖溶液;進(jìn)樣量0.5psi, 4s ;檢測(cè)波長:214nm)，2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸分別實(shí)現(xiàn)了 2826和3106倍的富集因數(shù)。并且，該毛細(xì)管內(nèi)壁涂 層在連續(xù)30次分離過程中電滲流的精密度不大于3.5%。
【具體實(shí)施方式】
[0010]利用氫氧化四丁胺給毛細(xì)管內(nèi)壁動(dòng)態(tài)涂層(20psi下lmol/L氫氧化鈉沖洗20分鐘，20psi下水沖洗20分鐘，20psi下0.005mol/L氫氧化四丁胺沖洗20分鐘，20psi下水沖洗20分鐘)使毛細(xì)管電泳電滲流(electroosmotic flow)轉(zhuǎn)向；在含有8mmol/L的β -⑶的ρΗ9.0的30mmol/L硼砂緩沖溶液中實(shí)現(xiàn)同向電滲流條件下的2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的分離；進(jìn)樣前先在0.5psi壓力下進(jìn)入引入前導(dǎo)電解質(zhì)20s，然后-1OkV下引入樣品100s,然后利用 3_ (cyclohexylamino) -1-propane sulphonic acid 作為終結(jié)電解質(zhì),實(shí)現(xiàn)了 2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的電動(dòng)增壓在線富集和分離，分別實(shí)現(xiàn)了 2826和3106倍的富集因數(shù)，該毛細(xì)管內(nèi)壁涂層在連續(xù)30次分離過程中電滲流的精密度不大于3.5%。
【權(quán)利要求】
1.一種給毛細(xì)管內(nèi)壁涂層電動(dòng)增壓在線富集毛細(xì)管電泳分析芳香族羧酸的方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)利用氫氧化四丁胺給毛細(xì)管內(nèi)壁動(dòng)態(tài)涂層，使毛細(xì)管電泳電滲流轉(zhuǎn)向； (2)在含有8mmol/L的β-⑶的ρΗ9.0的30mmol/L硼砂緩沖溶液中，實(shí)現(xiàn)同向電滲流條件下的2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的分離； (3)進(jìn)樣前先在0.5psi壓力下進(jìn)入引入前導(dǎo)電解質(zhì)20s，然后-1OkV下引入樣品100s，然后利用 3- (cyclohexylamino)-1-propane sulphonic acid 作為終結(jié)電解質(zhì)，實(shí)現(xiàn)了2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的電動(dòng)增壓在線富集和分離。
2.如權(quán)利要求1所述的一種給毛細(xì)管內(nèi)壁涂層電動(dòng)增壓在線富集毛細(xì)管電泳分析芳香族羧酸的方法，其特征在于:所述的步驟I中，利用氫氧化四丁胺給毛細(xì)管內(nèi)壁動(dòng)態(tài)涂層具體為，將毛細(xì)管在20psi下，lmol/L氫氧化鈉沖洗20分鐘；20psi下，水沖洗20分鐘；20psi下，0.005mol/L氫氧化四丁胺沖洗20分鐘；20psi下，水沖洗20分鐘，使毛細(xì)管電泳電滲流轉(zhuǎn)向。
【文檔編號(hào)】G01N1/40GK103472119SQ201310237952
【公開日】2013年12月25日 申請(qǐng)日期:2013年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月16日
【發(fā)明者】呂元琦 申請(qǐng)人:德州學(xué)院