本發明涉及中藥檢測，具體是一種大果木姜子中多種成分含量測定的方法以及uhplc特征圖譜的檢測方法。

背景技術：

1、大果木姜子為樟科屬植物米槁cinnamomum?migao?h·w·li的干燥成熟果實，分布于貴州羅甸、望謨、三都等地，廣西、云南亦有栽培，具有溫中理氣，止痛燥濕，健脾消食的功效。其收載于《貴州省中藥民族藥材質量標準》2019年版，最早著錄于《本草綱目拾遺》，書中稱之為“樟梨”，即樟樹子也。米槁心樂滴丸、心腦寧膠囊等上市制劑均以大果木姜子作為原料，臨床療效顯著，產生了良好的社會經濟效益。

2、大果木姜子作為貴州十大苗藥之一，被廣泛用于苗族、布依族傳統習用藥材及新藥研發，而目前大果木姜子的研究多集中于揮發油的化學成分鑒定、提取工藝優化及藥理作用等，且質量標準僅對揮發性成分桉油精進行控制，指標單一未能體現整體功效，無法完全控制其質量，究其原因是對不同來源的藥材質量研究不夠充分，基礎研究相對薄弱。

3、因此，通過uhplc指紋圖譜及多成分含量測定結合化學模式分析不同產地間大果木姜子藥材，為大果木姜子藥材的質量控制提供參考。

技術實現思路

1、為了解決現有技術中存在的上述技術問題，本發明提供一種大果木姜子中多種成分含量測定的方法以及uhplc特征圖譜的檢測方法，具體如下：

2、一種大果木姜子中多種成分含量測定的方法，采用uhplc方法進行測定，具體色譜條件如下：采用zorbax?eclipse?plus?c18色譜柱(柱長為100mm，內徑為2.1mm，粒徑為1.8μm)；以乙腈為流動相a，以0.2％甲酸溶液為流動相b。

3、進一步的，uhplc方法的具體洗脫程序如下：梯度洗脫：乙腈：0～1min：5％～7％；1～5min：7％～8％；5～7min：8％～9％；7～11min：9％～11％；11～19min：11％～17％；19～20min：17％；20～22min：17％～19％。

4、進一步的，uhplc方法的流速為0.3ml/min；進樣量2μl；柱溫為35℃；檢測波長為276nm。

5、進一步的，所述多種成分含量測定，具體是紅景天苷、綠原酸、木蘭花堿、柚皮苷。

6、進一步的，其中供試品溶液，是通過如下步驟制備得到：取大果木姜子藥材粉末1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，稱定重量，記錄重量，加熱回流30min，冷卻至室溫，再次稱重，70％甲醇補足重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液。

7、進一步的，其中混合對照品溶液，是精密稱取以甲醇為溶劑的，質量濃度1mg/ml的紅景天苷、綠原酸、木蘭花堿、柚皮苷對照品溶液。

8、一種大果木姜子的uhplc特征圖譜的檢測方法，按上述色譜條件進樣分析。

9、進一步的，所述按權利要求1中色譜條件進樣分析后，將數據導入“中藥指紋圖譜相似度評價系統(2012版)”，以s1號樣品的色譜圖為參照圖譜，時間窗寬度為0.1min。

10、進一步的，所述得到的大果木姜子的uhplc特征圖譜，共標定13個共有峰，并通過與對照品的比對，共鑒定了6個成分，分別是1號峰(原兒茶酸)、3號峰(紅景天苷)、6號峰(綠原酸)、9號峰(隱綠原酸)、11號峰(木蘭花堿)、13號峰(柚皮苷)。

11、所述的一種大果木姜子中多種成分含量測定的方法及uhplc特征圖譜的檢測方法在控制大果木姜子質量方面的應用。本研究基于uhplc建立的大果木姜子指紋圖譜及含量測定方法簡單，易于操作，可為大果木姜子質量控制及鑒別提供參考。

12、與現有技術相比，本發明創造的技術效果體現在：

13、本發明基于uhplc技術建立大果木姜子指紋圖譜，同時測定紅景天苷、綠原酸、木蘭花堿、柚皮苷的含量，為大果木姜子質量控制提供依據。具體采用zorbax?eclipse?plusc18色譜柱；建立15批大果木姜子藥材指紋圖譜，各批次間相似度0.933～1.000，共標定13個共有峰，指認了6個化學成分，分別是原兒茶酸、紅景天苷、綠原酸、隱綠原酸、木蘭花堿、柚皮苷。含量測定結果顯示，紅景天苷、綠原酸、木蘭花堿、柚皮苷的含量范圍分別為0.0822～1.9372mg/g、0.2944～0.7835mg/g、0.4243～1.0388mg/g、0.2326～0.5417mg/。本申請基于uhplc建立的大果木姜子指紋圖譜及含量測定方法簡單，易于操作，可為大果木姜子質量控制及鑒別提供參考。

技術特征：

1.一種大果木姜子中多種成分含量測定的方法，其特征在于，采用uhplc方法進行測定，具體色譜條件如下：采用zorbax?eclipse?plus?c18色譜柱(柱長為100mm，內徑為2.1mm，粒徑為1.8μm)；以乙腈為流動相a，以0.2％甲酸溶液為流動相b。

2.根據權利要求1所述的大果木姜子中多種成分含量測定的方法，其特征在于，uhplc方法的具體洗脫程序如下：梯度洗脫：乙腈：0～1min：5％～7％；1～5min：7％～8％；5～7min：8％～9％；7～11min：9％～11％；11～19min：11％～17％；19～20min：17％；20～22min：17％～19％。

3.根據權利要求1所述的大果木姜子中多種成分含量測定的方法，其特征在于，所述多種成分含量測定，具體是紅景天苷、綠原酸、木蘭花堿、柚皮苷。

4.根據權利要求1所述的大果木姜子中多種成分含量測定的方法，其特征在于，其中供試品溶液，，是通過如下步驟制備得到：取大果木姜子藥材粉末1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，稱定重量，記錄重量，加熱回流30min，冷卻至室溫，再次稱重，70％甲醇補足重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液。

5.根據權利要求1所述的苗藥大果木姜子中多種成分含量測定的方法，其特征在于，其中混合對照品溶液，是精密稱取以甲醇為溶劑的，質量濃度1mg/ml的紅景天苷、綠原酸、木蘭花堿、柚皮苷對照品溶液。

6.一種大果木姜子的uhplc特征圖譜的檢測方法，其特征在于，按權利要求1中色譜條件進樣分析。

7.根據權利要求6所述的uhplc特征圖譜的檢測方法，其特征在于，所述按權利要求1中色譜條件進樣分析后，將數據導入“中藥指紋圖譜相似度評價系統(2012版)”，以s1號樣品的色譜圖為參照圖譜，時間窗寬度為0.1min。

8.根據權利要求6所述的uhplc特征圖譜的檢測方法，其特征在于，所述得到的大果木姜子的uhplc特征圖譜，共標定13個共有峰，并通過與對照品的比對，共鑒定了6個成分，分別是1號峰(原兒茶酸)，3號峰(紅景天苷)、6號峰(綠原酸)、9號峰(隱綠原酸)、11號峰(木蘭花堿)、13號峰(柚皮苷)。

9.權利要求1所述的一種大果木姜子中多種成分含量測定的方法在控制大果木姜子質量方面的應用。

10.權利要求6所述的uhplc特征圖譜的檢測方法在控制大果木姜子質量方面的應用。

技術總結
本發明涉及中藥檢測技術領域，具體是一種大果木姜子中多種成分含量測定的方法以及UHPLC特征圖譜的檢測方法，采用UHPLC方法進行測定，具體色譜條件如下：采用ZORBAX?Eclipse?Plus?C18色譜柱(柱長為100mm，內徑為2.1mm，粒徑為1.8μm)；以乙腈為流動相A，以0.2％甲酸溶液為流動相B；梯度洗脫：乙腈：0～1min：5％～7％；1～5min：7％～8％；5～7min：8％～9％；7～11min：9％～11％；11～19min：11％～17％；19～20min：17％；20～22min：17％～19％；流速為0.3mL/min；進樣量2μL；柱溫為35℃；檢測波長為276nm。

技術研發人員：鄭林,遲明艷,肖金超,楊帥,黃勇,李月婷,鞏仔鵬,金陽,周家華
受保護的技術使用者：貴州醫科大學
技術研發日：
技術公布日：2025/4/24