專利名稱：：深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法
技術領域：
：本發明涉及植物培育技術，即深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法。
背景技術：
：在現有技術中，深山草莓Fragariaorientatesvar.concolor(Kitag.)另lj名綠口十東方草莓。是薔薇科草莓屬多年生草本植物，為長白山野生種草莓。其聚合果肉質、膨大較小、味酸甜、有香氣、果形為球形或卵形、產量極低，成熟后紫紅色。僅呈小群落分布于長白山海拔800-1200m的草地和林下，是草莓育種的優良野生種質資源。草莓一般采用匍匍莖繁殖，其后代性狀易退化，造成產量下降。草莓在組織培養過程中，受培養基和環境條件的影響有可能發生變異。組織培養苗發生變異可能與培養材料、培養溫度、繼代次數、激素以及濃度配比等有關。深山草莓是長白山野生植物資源，關于利用野生草莓花瓣誘導變異植株和在變異植株中篩選優良性狀品種的報道國內外尚未見。
發明內容本發明的目的是針對上述不足而提供一種以深山草莓花瓣為培養材料，培育草莓優良品種的深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法。本發明的技術解決方案是深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法包括將深山草莓未開放花蕾剪下消毒、插入LS培養基中待花蕾開放后取花瓣進行誘導愈傷組織、愈傷組織再分化芽苗、生根培養、移栽。誘導深山草莓花瓣產生愈傷組織的適宜培養基為LS+TDZ2.06mgL—1+2，4-DO.60mg.L—、其中TDZ為N-苯基N1-1，2，3-噻二唑-5-脲，2，4-D為2，4-二氯苯氧乙酸。mgL一工也可以表示為mg/L。所述的愈傷組織再分化芽苗和變異植株發生培養基為1/2LS+TDZ2.30mglT1+NAA0.10mgL—1+KT1.30mgL—、其中NAA為a-萘乙酸，KT為6-糠氨基嘌呤。所述的消毒是指將深山草莓未開放花蕾剪下，在超凈工作臺上用70%酒精涮洗30s，再用0.5%次氯酸鈉溶液浸泡10min，無菌水沖洗8次，無菌濾紙吸干表面的水分。所述的生根培養基為1/2LS+IAA0.05mg'L—、其中IAA為吲哚乙酸。LS為常規培養基，具體為Linsmaier和Skoog于1965年發明的培養基，其成分包括硝酸銨165QmgL—、硝酸鉀1900mgL—、二水氯化鈣400mgL—、七水硫酸鎂370mgL一1，磷酸二氫鉀170mg.L—、螯合鈉37.3mg.L—、七水硫酸亞鐵27.8mgL—、四水硫酸錳22.3mgL—、七水硫酸鋅8.6mgL—、硼酸6.2mgL—、碘化鉀O.83mgL一1，二水鉬酸鈉O.25mgL—、五水硫酸銅O.025mgL—、六水氯化鈷O.025mgL—、鹽酸硫胺素O.4mgL—、肌醇IOOmgL—、蔗糖30000mgL一1。我們發現在正常情況下，用莖尖作培養材料，幾乎不發生變異或變異率較低，而用花瓣誘導出愈傷組織，再誘導愈傷組再分化芽苗的方法，其變異率較高。本研究證明，深山草莓花瓣在適當配比的激素誘導下可產生變異植株，并能趨向優良性狀變異，達到了預期目的。通過上述方法，可以培養出具有豐產、優質等優良性狀的新品種草莓，該品種生長健壯，植株大，多級花序，每支花序有4-5朵花，花器大，花粉量多。果實酸甜適中，香味濃郁，果皮硬度極大。初步測定含糖9.7-11.3%，可溶性固形物10.6-14.3%，維生素C129.40mg/100g，一級序平均單果重62.4g，最大果重90g以上。豐產抗病力好，大果、商品果比例高。目前，該品種已進行放大栽培試驗和多地區試驗階段。本發明的優點是1、通過深山草莓花瓣誘導再生植株和變異植株的試驗，獲得具有優良性狀的變種。2、本發明采用均勻設計法對影響深山草莓花瓣愈傷組織、愈傷組織再分化芽苗及變異植株發生的激素濃度配比進行優化組合篩選，避免了全面試驗的繁瑣和不可操作性，并縮短了試驗的周期。3、結果表明，誘導深山草莓花瓣產生愈傷組織的適宜培養基為:LS+TDZ2.06mgL—1+2，4-DO.60mgL—、誘導率為98%;愈傷組織再分化芽苗的適宜培養基為1/2LS+TDZ2.30mgL—、NAA0.10mgL—、KT1.30mgL—、分化率為96.3%。經田間栽培觀察變異率達1.98%。生根培養基為1/2LS+IAA0.05mgL—、4、本發明為深山草莓的開發利用和草莓的育種提供種質資源和奠定實踐基礎，對其它野生種草莓的花瓣誘導變異植株和篩選優良品種有一定的參考意義。下面將結合實施例對本發明的實施方式作進一步詳細描述。具體實施例方式深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法1、材料與方法1.1試材深山草莓花瓣。1.2方法1.2.l材料處理將深山草莓未開放花蕾(帶3cm花柄)剪下，在超凈工作臺上用70%酒精涮洗30s，再用次氯酸鈉(質量比為O.5%)溶液浸泡IOmin，無菌水沖洗8次，無菌濾紙吸干表面的水分，切除損害花柄留2cm。將花蕾(花柄朝下)插入LS培養基中，待花蕾開放后以便取花瓣進行誘導愈傷組織。1.2.2深山草莓花瓣愈傷組織誘導培養基的篩選以LS為基本培養基，內含蔗糖20g'L—、瓊脂粉7.5g*L—、再附加不同質量濃度的細胞分裂素TDZ(由預試驗確定為1.402.40mgL—^和生長素2，4-D(由預試驗確定為O.10—0.60mgL—^，調節pH為5.6，外植體在溫度(23士2)。C、光照強度25ymol'm—2s—、光照周期IOhd—工條件下培養，為了提高深山草莓花瓣愈傷組織的誘導速度和誘導率，采用均勻設計法，每個處理接種花瓣數為10，重復3次，選用Un(ll勺均勻表(表l)，考察6-BA和2，4-D不同質量濃度交叉配比對誘導率的影響。花瓣培養45d統計愈傷組織誘導率，篩選最適合誘導深山草莓花瓣產生愈傷組織的i昔養基。表1深山草莓花瓣愈傷組織誘導培養基的Un(ll勺因素及水平設計<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>1.2.3深山草莓花瓣愈傷組織再分化芽苗和變異植株發生培養基的篩選以1/2LS為培養基，加入蔗糖30g*L—、瓊脂7.5gL—、并附加不同濃度的TDZ(由預試驗確定為2.30—3.20mg'L—4、NAA(由預試驗確定為O.10—0.30mgL—^和KT(由預試驗確定為O.80—1.30mg*L—^，調節pH為5.6，將花瓣誘導產生的愈傷組織切割成小塊，愈傷組織的小塊在溫度(23士2)。C、光照強度20ymol'm—、s—1、光照周期8hd—i條件下培養。為了提高深山草莓花瓣愈傷組織的芽苗分化速度和分化率，采用均勻設計法，每個處理接種莖段數為IO，重復3次，選用1]1()(103)均勻表(表2)，考察生長素TDZ、NAA和KT不同質量濃度交叉配比對分化率的影響(表4)。愈傷組織培養40d統計分化率，篩選最適合深山草莓花瓣愈傷組織芽苗分化的培養基。花瓣愈傷組織分化的芽苗繼代3次后，待苗長至1.50—2.00cm時，將芽苗從愈傷組織上切下，接種到生根培養基上進行生根培養，生根后進行分組煉苗移栽，觀察苗的形態、花、果等特征，統計變異植株的發生率，即變異率(變異標準以隨機1000株苗中，與深山草莓母本性狀表現差異顯著，變異率為3次抽樣的平均值)。從變異植株中篩選優良性狀草莓品種，進行匍匍莖尖培養，區試、大面積栽培觀察和檢測其遺傳穩定性。表2深山草莓花瓣愈傷組織再分化芽苗和變異植株誘導培養基的Un)(10勺因素及水平<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>1.3數據處理與分析采用均勻設計法進行初步規律設計性試驗，數據分析處理應用均勻設計軟件(UniformDesign3.OV)。2結果與分析2.1TDZ和2，4-D濃度配比對深山草莓花瓣愈傷組織誘導的影響由表3試驗結果可得回歸方程￥=40.0+16.5Xi+24.0X2，樣本容量N41，顯著性水平a=0.01，經計算，復相關系數R=0.8979，剩余標準差3=3.13，檢驗值Ft二16.64，臨界值F(o.oi，2，8)=8.649，Ft〉F(o.(u，2，8)，表明回歸方程有意義。對各方程項進行顯著性檢驗可知各方程項對Y影響均顯著。根據回歸方程求出Y的最優組合為X1=2.40，X2=0.60，在此組合基礎上求得最優解y=93.9，此解為回歸方程的解析解，需按公式y士Ua"S(其中Ua為正態分布的雙側分位數，s為剩余標準差)計算出優化值區間估計為Y二93.9±0.5，g口83.4%—103.4%。通過表3試驗結果和回歸方程及愈傷組織誘導情況可知，TDZ超過2.00mgL—4寸花瓣愈傷組織誘導率下降，TDZ和2，4-D均與誘導率呈正相關，計算各方程項對回歸的貢獻值可知，U(1)=271，U(2)=148，g口TDZ和2，4-D對回歸的貢獻率為Ua)/U二82.9%，U(2)/U=45.2%，說明TDZ大于2，4-D對深山草莓花瓣愈傷組織誘導的貢獻。以免TDZ在2.00—2.10mgL^之間有較高誘導率的峰值，又以TDZ為2.00、2.01、2.02、2.03、2.04、2.05、2.06、2.07、2.08、2.09和2.10mg.L一、2，4-D0.60mgL—"故了1l個處理的試驗，發現TDZ在2.06mgL—4寸花瓣愈傷組織誘導率最高。因此，將深山草莓花瓣接種到附加TDZ2.06mgL—^口2，4-D0.60mg1T^勺LS培養基上進行花瓣愈傷組織誘導的驗證試驗，重復3次。培養18d，花瓣逐漸增厚變形；繼續培養至45d，花瓣完全脫分化為黃白色愈傷組織，愈傷組織誘導率達98%以上，在估計區間內，且比表3中11個處理的誘導率均高。因此，深山草莓花瓣愈傷組織誘導的最佳培養基為LS+TDZ2.06mgL—、2，4-D0.60mgL一1。表3深山草莓花瓣愈傷組織誘導培養基的Un(ll勺均勻設計試驗安排與結果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2.2TDZ、IAA和KT濃度配比對深山草莓花瓣愈傷組織再分化芽苗及變異植株發生的影響根據表4試驗結果可得回歸方程Yf52.8-27.9X廣130X2+96.6X3，樣本容量N40，顯著性水平(1=0.01，經計算，復相關系數R4.9982，剩余標準差3=1.18，檢驗值Ft二565.1，臨界值F(o.(n，3，6)二9.780，Ft〉F(o.(u，3，6)，顯著，說明回歸方程有意義。對各方程項進行顯著性檢驗可知，各方程項對Y工影響均顯著。根據回歸方程求出Y的最優組合為X1=2.30，X2=0.10，X3=1.30，在此組合基礎上求得最優解y=101.0，此解為回歸方程的解析解，同理，按公式Y二y士u。s計算出優化值區間估計為Y^01士4.37，即96.63%105.37%。通過表4試驗結果和回歸分析結果可知，各方程項對回歸的貢獻值和回歸貢獻率(按偏回歸平方和降序排列)分別為U(3)=2.30e+3，U(3)/U=97.6%;U(2)=25.6，U(2)/U=l.09%;U(1)=19.3，U(1)/U=0.822%，即KT對分化率Y!的貢獻遠遠大于TDZ和NAA，由預試驗可知KT超過l.30mg"L一4寸花瓣愈傷組織芽苗分化率僅12.8。/。，猜測KT濃度為1.30mgL—4寸已過量，并對芽苗分化起抑制作用。為此，又以KT質量濃度為1.20、1.21、1.22、1.23、1.24、1.25、1.26、1.27、1.28、1.29和1.30mgL—、并附加TDZ2.30mgL—^口NAA0.10mgL—"故了11個處理的試驗，發現KT質量濃度為1.30mgL—4寸愈傷組織分化率最高且分化速度快。因此，將花瓣愈傷組織小塊接種到附加TDZ2.30mgL—、NAA0.10mgL—工和KT1.30mgL—^勺1/2LS培養基進行再次驗證試驗，接種數為30，每瓶接種3塊，重復3次。培養18d時，發現愈傷組織表面有球形顆粒出現，繼續培養至25d，顆粒由球形逐漸轉變為錐狀，培養至35d，錐狀體逐漸生長伸長為帶有2—3個小葉片的芽苗，45d后苗高可達1.50cm以上，分化率達96.3%以上。在估計區間內，且比表4所列10個處理的分化率均高。可見，深山草莓花瓣愈傷組織芽苗分化的最佳培養基為1/2LS+TDZ2.30mgL一工+NAA0.10mgL一工+KT1.30mg.L-1。待花瓣愈傷組織分化的芽苗長至1.50—2.00cm時，將芽苗從愈傷組織上切下，接種到1/2LS+IAA0.05mgL—i培養基上進行生根培養，待根長至l.00cm，苗高達2.50cm以上時，將生根苗從培養瓶中取出，在含有5mg*L—工高錳酸鉀溶液中洗去肉質根上殘留的瓊脂，然后按處理號分成10組分別植入經100倍殺毒礬消毒過的田園土和河砂(3:1)混合的基質中，用透光好的塑料薄膜覆蓋以保濕保溫，濕度保持在75%，溫度控制在(18士2)°C，每天自然光照9h，每天通風換氣一次，7d后可揭去薄膜，每天傍晚噴灑清水l次。成活率達97%以上。2.3TDZ、IAA和KT濃度配比對深山草莓花瓣愈傷組織再分化變異植株的影響煉苗結束后，苗長至IO.OOcm時，將10組苗分別雙行定植在寬80cm的畦上，給與合理水肥，待匍匍莖苗長出且花芽分化后，選壯苗定植溫室用于生產的畦上。觀察各組苗的形態、花、果等特征，統計植株的變異率，結果見表4。對變異率的統計結果進行回歸分析，結果如下。根據表4試驗結果可得回歸方程<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>，樣本容量N40，顯著性水平a=0.01，經計算，復相關系數R4.9523，剩余標準差3=0.250，檢驗值Ft二34.07，臨界值F(o.oi，2，7)=9.547，Ft〉F(o.(u，2，7)，顯著，說明回歸方程有意義。同時，說明深山草莓花瓣愈傷組織誘導變異植株與NAA不相關或相關性極小，不顯著，通過優化組合進行的驗證試驗也證明了這一點。對x^nx3方程項進行顯著性檢驗可知，x^nx3方程項對Y2影響均顯著。各方程項對回歸的貢獻值和貢獻率(按偏回歸平方和降序排列)為U(1)=3.13，U(1)/U=73.3%;U(3)=0.789，U(3)/U=18.5%。說明TDZ對深山草莓花瓣愈傷組織誘導變異植株的貢獻大于KT，起主導作用，但須配以適當濃度的KT輔助才能誘導成功。表4深山草莓愈傷組織再分化芽苗和變異植株誘導培養基的111()(103)均勻設計試驗安排與結果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>在整個誘導和田間試驗中，共發現8個遺傳穩定的變異種(每個處理對變異植株性狀的描述均以該組合分化出的變異植株中性狀表現較好，有推廣應用和可作為育種種質資源價值)，其品種特性簡介如下各處理中選出的優良性狀品種表現為，處理l:植株大，生長較健壯，多級花序，每支花序4-5朵花，花瓣較易落，果形長錐形，果皮較硬。有香氣，偏酸。一級序平均單果重47.9g，最大果重70.0g。花芽分化和形成比其他現有品種晚，斷根處理能促進花芽分化。花器大，花粉量多，在低溫條件下畸形果比例較少，大果、商品果比例高；處理2:植株較大，生長健壯，多級花序，每支花序4-5朵花，花瓣易落，果形圓錐形，果皮硬。有香氣，偏酸。一級序平均單果重50.5g，最大果重78.lg。花芽分化和形成比其他現有品種晚，斷根處理能促進花芽分化。花器大，花粉量較多，在低溫條件下畸形果比例多，大果、商品果比例較高；處理3:植株較大，生長較健壯，多級花序，每支花序5-7朵花，花瓣較易落，果形長錐形，果皮較硬。有香氣，偏酸。一級序平均單果重43.2g，最大果重72.7g。花芽分化和形成比其他現有品種晚，斷根處理能促進花芽分化。花器較大，花粉量多，在低溫條件下畸形果比例少，大果、商品果比例高；處理4:植株較大，生長較健壯，多級花序，每支花序6-8朵花，花瓣較易落，果形長錐形，果皮較硬。有香氣，偏酸。一級序平均單果重39.6g，最大果重47.4g。花芽分化和形成比其他現有品種晚，斷根處理能促進花芽分化。花器較大，花粉量多，在低溫條件下畸形果比例少，大果、商品果比例高；處理5:植株大，生長健壯，多級花序，每支花序4-5朵花，花瓣易落，果形圓錐近心形。酸甜適中，香味濃郁。果皮紅色，富有光澤，韌性強，果皮硬度極大，含糖9.7-11.3%，可溶性固形物IO.6-14.3%，Vcl29.4mg/100g，一級序平均單果重62.4g，最大果重90g。花芽分化和形成比其他現有品種早，斷根處理能促進花芽分化。花器大，花粉量多，在低溫條件下畸形果比例少，大果、商品果比例極高；處理6:植株大，生長健壯，多級花序，每支花序3-5朵花，花瓣易落，果形圓錐形，果皮硬度大。有香氣，酸甜適中。一級序平均單果重42.6g，最大果重63.2g。花芽分化和形成比其他現有品種較早，斷根處理能促進花芽分化。花器較大，花粉量較多，在低溫條件下畸形果比例多，大果、商品果比例較高；處理7:植株較大，生長健壯，多級花序，每支花序3-5朵花，花瓣易落，果形圓錐形，果皮軟。稍有香氣，酸甜適中。一級序平均單果重32.9g，最大果重48.5g。花芽分化和形成比其他現有品種晚，斷根處理能促進花芽分化。花器較大，花粉量較多，在低溫條件下畸形果比例少，大果、商品果比例較高；處理9:植株較大，生長較健壯，多級花序，每支花序7-10朵花，花瓣易落，果形圓錐形，果皮軟，一級序平均單果重22.8g，最大果重31.7g。花芽分化和形成比其他現有品種晚，斷根處理能促進花芽分化。花器小，花粉量較多，在低溫條件下畸形果比例少，大果、商品果比例高經對各處理的變異株各性狀初步對比，經過7年的區試栽培試驗，在8個遺傳穩定的變異種中，于第5個處理組中篩選出豐產、優質新品種草莓，其品種特性如下植物學性狀該品種生長健壯，生長勢強，植株高(35cm)，株徑較大，分生新莖能力較強。葉片極大，較厚，橢圓形色深綠，邊緣鋸齒粗且較深，葉面革質平滑，有光澤。葉柄綠色，基部葉鞘略呈紅色。匍匍莖粗，抽生能力中等。花序梗粗，絨毛較少，分枝處著生一大一小兩不完全葉。多級花序，每支花序有4-5朵花，不需疏花疏果，花瓣易落，不污染果實，花器大，花粉量多，雌雄蕊較其母本深山草莓均大；果實性狀果實圓錐形，種子黃綠色，凹入果面。果肉深紅色，質密多汁，果形圓錐形。酸甜適中，香味濃郁。果皮紅色，富有光澤，韌性強，果皮硬度極大，耐儲運。初步測定含糖9.7-11.3%，可溶性固形物10.6-14.3%，維生素C129.40mg/100g，一級序平均單果重62.4g，最大果重90g以上，果實各項指標均優于深山草莓；休眠性該品種休眠淺，打破休眠所需的溫度為5'C以下，低溫積累100-120小時即可，促成栽培不用赤霉素處理；花芽形成花芽分化和形成比其他現有栽培品種早，斷根處理能促進花芽分化。在低溫條件下畸形果比例小，大果、商品果比例高；豐產性連續結果達6個多月。每畝可定植8000株，初步計算產量累積達3000kg以上；抗病性該品種生長健壯，綜合抗病能力較強，但對白粉病、細菌性葉斑病中抗。3結論本試驗結果表明，培養基LS+TDZ2.06mgL—、2，4-D0.60mgL—4寸深山草莓花瓣愈傷組織的誘導效果較好。當2，4-D質量濃度低于0.10mgL—4寸花瓣不產生愈傷組織且很快褐變死亡，超過0.60mgL—4寸花瓣愈傷組織形成疏松的愈傷組織，分化能力極低，誘導率僅在3.7-9.2%之間，過高的TDZ濃度對花瓣愈傷組織形成的速度極快，這可能是導致愈傷組織疏松的另一個因素；TDZ質量濃度低于1.40mgL—i時花瓣愈傷組織的形成很慢，愈傷程度不完全；培養基1/2LS+TDZ2.30mgL—、NAA0.10mgL—、KT1.30mgL—工適合花瓣愈傷組織的芽苗分化，超過3.20mgL—4寸愈傷組織分化率極低，均在18%以下，可能是過高的TDZ濃度對芽苗分化起抑制作用。低于2.30mgL—4寸愈傷組織不分化。通過對變異的回歸分析可知，深山草莓花瓣愈傷組織誘導變異植株與NAA不相關或相關性極小，不顯著。TDZ和KT對回歸的貢獻值和貢獻率說明TDZ對深山草莓花瓣愈傷組織誘導變異植株的貢獻大于KT，起主導作用，但須配以適當濃度的KT輔助才能誘導出變異植株，通過驗證試驗證明了這一結論。對各處理的變異株各性狀栽培對比，經過區試栽培試驗，在8個遺傳穩定的變異種中，又進一步篩選出具有豐產、優質等優良性狀的新品種草莓，該品種生長健壯，植株大，多級花序，每支花序有4-5朵花，花器大，花粉量多。果實酸甜適中，香味濃郁，果皮硬度極大。初步測定含糖9.7-11.3%，可溶性固形物10.6-14.3%，維生素C129.40mg/100g，一級序平均單果重62.4g，最大果重90g以上。豐產抗病力好，大果、商品果比例高。目前，該品種已進行放大栽培試驗和多地區試驗階段。權利要求1.深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法，其特征在于包括將深山草莓未開放花蕾剪下消毒、插入LS培養基中待花蕾開放后取花瓣進行誘導愈傷組織、愈傷組織再分化芽苗、生根培養、移栽。2.按照權利要求l所述的深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法，其特征在于所述的誘導愈傷組織的適宜培養基為LS+TDZ2.06mg/L+2，4-D0.60mg/L。3.按照權利要求1或2所述的深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法，其特征在于所述的愈傷組織再分化芽苗培養基為1/2LS+TDZ2.30mg/L+NAA0.10mg/L+KT1.30mg/L。4.按照權利要求3所述的深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法，其特征在于所述的消毒是指將深山草莓未開放花蕾剪下，在超凈工作臺上用70%酒精涮洗30s，再用O.5%次氯酸鈉溶液浸泡10min，無菌水沖洗8次，無菌濾紙吸干表面的水分。5.按照權利要求4所述的深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法，其特征在于所述的生根培養基為1/2LS+IAA0.05mg/L。全文摘要本發明涉及植物培育技術，即深山草莓花瓣誘導變異植株品種培育方法。包括將深山草莓未開放花蕾剪下消毒、插入LS培養基中待花蕾開放后取花瓣進行誘導愈傷組織、愈傷組織再分化芽苗、生根培養、移栽。誘導深山草莓花瓣產生愈傷組織的適宜培養基為LS+TDZ2.06mg·L^-1+2，4-D0.60mg·L^-1。愈傷組織再分化芽苗和變異植株發生培養基為1/2LS+TDZ2.30mg·L^-1+NAA0.10mg·L^-1+KT1.30mg·L^-1。生根培養基為1/2LS+IAA0.05mg·L^-1。可獲得具有優良性狀的變種，為深山草莓的開發利用和草莓的育種提供種質資源和奠定實踐基礎。文檔編號A01H4/00GK101606489SQ200910304829公開日2009年12月23日申請日期2009年7月25日優先權日2009年7月25日發明者穎馮,劉秀巖,姜云天,朱俊義,李玉梅,宇梁,顧地周申請人:通化師范學院