專利名稱：治療根結線蟲的印楝素水溶劑及其制備方法
技術領域：
本發明涉及了一種農藥，特別是涉及治療根結線蟲的印楝素水溶劑及其制備方法。
背景技術：
目前已知危害蔬菜的線蟲主要有高弓根結線蟲、花生根結線蟲、北方根結線蟲及南方根結線蟲。線蟲寄主范圍廣泛，常危害瓜類、茄果類、豆類及蘿卜、葫蘿卜、萵苣、白菜等30多種蔬菜，還能傳播一些真菌和細菌性病害。根結線蟲主要危害各種蔬菜的根部,表現為側根和須根較正常增多，并在幼根的須根上形成球形或圓錐形大小不等的白色根瘤，有的呈念珠狀。被害株地上部生長矮小、緩慢、葉色異常，結果少，產量低，甚至造成植株提早死亡。傳統的根結線蟲的防治方法包括輪作防病、抗線蟲品種培育、電防治法、生物防治及殺線蟲藥劑的使用。輪作防蟲線蟲發生多的田塊，改種抗、耐蟲作物如禾木科、蔥、蒜、韭菜、辣椒、甘藍、菜花等或種植水生蔬菜，可減輕線蟲的發生。輪作防病被廣泛使用，但對一些特殊經濟作物或特定地區無法達到合理輪作的要求，具有較大的局限性，同時也不適用于寄主范圍較寬的根結線蟲的防治
抗線蟲品種的培育常規抗病育種由于存在兩方面的問題而進展緩慢，一是利用單一抗性基因使得不受抗性影響的線蟲大量繁殖而發展成為新的病害，或造成線蟲小種變異，在控制大豆胞囊線蟲方面同樣面臨這樣的問題；二是抗源材料匱乏使常規育種滿足不了生產上的需要，而利用現代生物技術進行抗線蟲育種的工作也尚處于探索階段。電防治法采用物理植保技術可以有效預防植物全生育期病蟲害，其中根結線蟲病可采用土壤電消毒法或土壤電處理技術進行防治。根結線蟲對電流和電壓耐性弱，采用3DT系列土壤連作障礙電處理機在土壤中施加DC30-800伏、電流超過50A/ m2就可有效殺滅土壤中的根結線蟲。化學藥劑防治化學防治是病害綜合防治中的主體，在根結線蟲防治中仍占有重要地位。化學殺線蟲藥劑由于可收到立竿見影的預期效果，在根結線蟲的防治上被廣泛使用，但化學藥劑的長期使用帶來了一系列的副作用，如破壞生態平衡、造成次要病害猖獗、藥劑殘留造成水源土壤之污染、引起人畜中毒、抗性喪失等。生物防治根結線蟲生防資源是指它們在自然界的所有天敵生物，包括食線蟲真菌、專性寄生細菌、根際細菌、放線菌、病毒、立克次氏體、原生動物、水熊、扁蟲、螨類、跳蟲以及捕食性線蟲等。在眾多的天敵生物中，它們對線蟲的作用機制各不相同，總體上分為捕食、寄生、拮抗或毒殺等三類。但由于生防菌株受到復雜的土壤生態因子的影響，生防菌劑防效的穩定性仍然得不到保證，其原因一方面是缺乏高效穩定的生防菌株，另一方面是對生防菌施入土壤后的許多生態學問題缺乏了解。因此，根結線蟲生物防治必須利用現代生物技術篩選構建高效、穩定、多功能的生產菌株，同時加強生防菌定殖、消長規律及土壤抑菌作用等生態學問題的研究，只有徹底解決了這些問題，根結線蟲的生物防治才有望取得突破性的進展，才能發揮生物防治在根結線蟲綜合治理中的重要作用。另一方面，現在市場上銷售的生物農藥產品名目繁多，如蘇云金桿菌殺蟲劑、農用抗生素、棉鈴蟲NPV、殺蟲真菌劑等。生物農藥其中也含有化學成分，是生物與化學成分的有機結合。所以對土壤也存在一定危害。印楝素的特點印楝(Azadirachta indica A. Juss)系楝科楝屬喬木,廣泛種植于熱帶、亞熱帶地區。原產于緬甸和印度，在70多個國家有分布和種植，以印度等亞洲國家產量最大。印楝被美國農業部譽為“可解決全球問題之樹”。迄今為止，人們已從印楝種仁、樹皮、果中已發現了 100多種化合物，至少有70種化合物具有生物活性，它們為二萜類、三萜類、戊三萜類和非萜類化合物。主要為印度苦楝子素、苦楝三醇和印楝素等，其中最重要的活性物質是印楝素，印楝素對害蟲的作用機制主要是使昆蟲拒食、忌避及抑制昆蟲生長發 育，干擾害蟲的內分泌，使幼蟲不能正常蛻皮和化蛹而導致害蟲死亡，具有害蟲不易產生抗藥性等特點。印楝素殺蟲劑是世界公認的廣譜、高效、低毒、易降解、無殘留、選擇性好、無污染的高效的環境友好新型殺蟲劑。試驗證明，印楝對防治10目400多種農林、倉儲和衛生害蟲，特別是對鱗翅目、鞘翅目等害蟲有特效，而對人畜和周圍環境無任何污染。目前印楝素制劑為水乳劑，印楝素水乳劑存在如下技術問題印楝素水乳劑是用水作為介質代替大部分或全部有機溶劑，通過向體系提供機械能，在表面活性劑的作用下，制得液滴直徑2微米，外觀呈乳白色的液體制劑。其在使用過程中存在一些問題，水乳劑中存在的一些易燃、易爆、有毒有機溶劑，如二甲苯的使用，嚴重污染環境，同時對人和動物直接構成危害。另外，水乳劑在使用時需要添加化學試劑來激活其中的活性成分，化學試劑對人的皮膚有較低的毒性。并且，在長期貯存時，難以穩定。

發明內容
本發明就是為了解決上述技術問題，而提供一種治療根結線蟲的印楝素水溶劑及其制備方法，本發明印楝素水溶劑具有殺蟲高效、土壤改良、易降解、無殘留、無抗藥性、穩定性好的特點。為了解決上述技術問題，本發明是通過下述技術方案實現的
治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素A0. 0045-0. 005 份，印楝素 B 0. 08-0. 12 份，印楝素 C 0. 14-0. 16 份，水 0. 74-0. 75 份。所述的治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素A0. 0048份，印楝素B 0. I份，印楝素C 0. 15份，水0. 7452份。所述的治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法如下取符合所述重量份數的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量份數的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。由于采用上述技術方案，使得本發明具有如下特點和效果
它改善土壤，培肥地力改善土壤的微生態系統，促進土壤團粒結構的形成，增強土壤的透氣性，提高土壤的保水保肥能力；提高農作物產量，改善品質能夠提高農作物產量，改善產品品質，如外觀、色澤、口感、營養成分、耐貯性；增強免疫，提高抗性增強作物的抗旱、抗澇、抗凍能力，抑制病原微生物及蟲卵的生長繁育，提高作物的抗性，可減緩害蟲的抗藥性；綠色環保，天然有機本品高效、不污染環境及土壤、易降解、無殘留、無污染是生產綠色、有機農產品理想肥料；其穩定性好，易于儲存；
本發明的作用機理印楝素能降低昆蟲的血細胞數量、降低血淋巴中蛋白質含量、降低血淋巴中海藻糖和金屬陽離子濃度，能抑制昆蟲中腸酯酶和脂肪體中蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、磷酸酶和葡萄糖酶的活性，降低昆蟲的取食率和對食物的轉化利用率，能影響昆蟲的正常呼吸節律，降低昆蟲脂肪體中DNA和RNA含量，降低雌蟲卵巢、輸卵管、受精囊中蛋白質、糖原和脂類的含量及一些酶的活性，對雄蟲生殖系統有影響，使昆蟲的腦、咽側體、心側體、前胸腺、脂肪體等發生病變，影響昆蟲體內激素平衡，從而干擾昆蟲生長發育。印楝制劑能較好地滿足了目前農藥開發的要求，如高效、低毒、無殘留、選擇性好等。印楝中活性成分是自然存在的物質，在與自然界的長期演化過程中，自然界對印楝中的 各種化學成分早已形成了完善的降解機制，其活性成分在自然界中無累積，印楝素是復雜的大分子物質，分子結構中有許多能夠發生反應的官能團，易分解，對環境安全，特別適用于蔬菜、水果和茶葉等直接食用的作物，且對作物不產生藥害。印楝制劑主要具有抑制生長發育、拒食、忌避和不育等作用方式，與常規農藥的殺蟲作用機理差異很大，活性成分復雜，有利于克服害蟲抗藥性，對非靶標生物安全，對哺乳動物毒性低，并有明顯的選擇性。印楝素及印楝制劑具有良好的環境相容性，并具有環境污染治理功能，如清除Cu2+、Zn2+、Cd2+等，并且隨著科技的發展，印楝素及印楝殺蟲劑在農藥、衛生用藥、日化和環境治理等領域具有更加廣泛的應用。
具體實施例方式 下面結合實施例對本發明進行進一步描述。以下實施例僅為本發明的幾個具體實施例，但本發明的設計構思并不局限于此，凡利用此構思對本發明進行非實質性的改動，均應屬于侵犯本發明保護范圍的行為。下述實施例中的方法，如無特別說明，均為常規方法。下述的實施例中的百分含量如無特別說明，均為質量百分含量。實施例I :
治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素AO. 0045g，印楝素B 0. 08 g，印楝素CO. 16 g，水0.74 g。治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。實施例2:
治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素AO. 005g，印楝素B 0. 12 g，印楝素CO. 14 g，水0.75 g。治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。實施例3
治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素AO. 0045g，印楝素B 0. 12 g，印楝素CO. 14 g，水0.75 g。治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。
實施例4
治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素AO. 005g，印楝素B 0. 12 g，印楝素CO. 15 g，水0.74 g。治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。實施例5
治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素AO. 0048g，印楝素B 0.1 g，印楝素C 0. 15 g，水0.7452 g。治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。實施例6
治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素A0.0047g，印楝素B 0. 11 g，印楝素C 0.155 g，水0.748 g。治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。實施例I
治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素AO. 0046g，印楝素B 0. 09 g，印楝素C 0.145 g，水0.744 g。治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法如下取所述重量的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。本發明印楝素水溶劑治療根結線蟲的試驗數據如下
試驗I
I.材料與方法 I. I供試材料
印楝素水溶劑(按本發明實施例1-7中的任意一種方法制得)，印楝素水乳劑(云南中科生物產業有限公司生產)。供試植物番茄、黃瓜、芹菜、草莓 I. 2方法與步驟
試驗在內蒙古赤峰市寧城縣大城子鎮蔬菜試驗基地中進行，此地塊根結線蟲的發病率為100%。于2010年12月上旬進行芹菜育苗；2011年2月下旬進行黃瓜、番茄育苗，試驗設3個處理，處理I施入印楝素水溶劑，處理II施入印楝油水乳劑，對照(CK)澆入清水。設3次重復，共27個小區，每9個小區栽植一種作物，設芹菜、黃瓜、番茄的種植小區分別為A、B、C，則各處理分別為A丨、A u、Acx ;B丨、B u、Bcx ;C丨、C u、Q。待芹菜苗齡70天左右時，黃瓜苗長到2片真葉時，番茄苗齡30d左右，3 4片葉時，移栽入大棚內。芹菜畦距70cm，畦高13cm,行距35cm,株距30cm,每睦栽2行。番爺和黃瓜米用槽式栽培方式定植,栽培槽的長寬高為700cmX65cmX 30cm,米用完全隨機區組設計,每槽定植2行,每行20株,株距30cm,大行距60cm，小行距50cm。栽培管理與一般生產相同。
栽植15天、35天時分別向土壤中施入I :300比例稀釋溶液250ml的印楝素水溶劑和印楝素水乳劑，對照澆入清水。5天后，取主根附近5-lOcm，土壤深度5-15cm進行鏡檢，測量土壤中礦質元素的變化情況，同時計算防治效果。栽植20天、40天時，拔出番茄秧進行檢查，同時觀察地上部分的生長狀況，統計作物產量。采集成熟期番茄、黃瓜、芹菜鮮樣，分析可溶性糖、V。含量。
2.結果與分析
印楝素水乳劑和印楝素水溶劑對土壤根結線蟲都具有良好的防治效果，印楝素水溶劑防治根結線蟲的效果較好。A I 20天時，幼蟲相對防效為64. 92%, 40天時，幼蟲相對防效為83. 14%。A n 20天時，幼蟲相對防效為52. 64%，40天時，幼蟲相對防防效為66. 71%。Ack未施用印楝素，根結線蟲的發病率為97. 05%。B I 20天時，幼蟲相對防效為75. 53%，40天時，幼蟲相對防效為95. 24%。B n 20天時，幼蟲相對防效為64. 08%, 40天時，防效為73. 29%。Bck未施用印楝素，根結線蟲的發病率為98. 36%。C ! 20天時，幼蟲相對防效為83. 24%，40天時，幼蟲相對防效為97. 12%。C u 20天時，幼蟲相對防效為71. 69%，40天時，防效為79. 25%。Cck未施用印楝素，根結線蟲的發病率為98. 46%。印楝素水溶劑的治療速度相對較快。在栽植40天時，除了 A1處理中發現有少量的根結線蟲以外，處理B I、C ,幾乎未發現根結線蟲，而處理Au、Bh、C u均發現根結線蟲存在，而且植株生長較處理I差。對照AeK、Bq^Cq5的地下部分全部出現根結，植株地上部分葉片皺縮萎蔫，植株矮小，對照AeK、Bck畸形果現象嚴重。試驗表明施用印楝素水溶劑后，土壤的物理性質發生了變化，隨著印楝素水溶劑施用次數不斷增加，土壤中水溶性鹽含量逐漸下降，A I的水溶性鹽含量低于A11, B i低于B n,且均低于對照。土壤礦質元素是植株生長發育不可缺少的營養元素，其豐缺不僅影響植株的光合作用、呼吸作用、固氮作用以及蛋白質和核酸代謝等，而且影響抗病性及對不良環境的抵抗力。本試驗結果表明，施用印楝素水溶劑能夠改變土壤中礦質元素的含量。同時對土壤礦質元素的影響較大，其中AmBmC1中水溶性鈣、水溶性鎂、有效鐵、有效銅含量均高于對照。土壤中礦質元素的改變，可以增強植株的吸附特性，使其更有利于植株的生長發育，對果實的品質和產量有較大的影響。在對芹菜、番茄、黃瓜三種蔬菜的試驗處理過程中，在植株生長期間，施用印楝素水溶劑的植株地上部分生長良好，莖粗較A n、B u、C u明顯增加，同時葉片顏色加深，葉綠素含量增加較為明顯，A丨與Au、B丨與Bh、C丨與C11間差異較大。在產量上，施用印楝素水溶劑與施用印楝素水乳劑的接近。在品質上，果實發育階段，印楝素水溶劑的施用，促進了果實內含營養物質的轉化與合成，增加了果實中V。和可溶性糖的含量，增強了果實的口感，明顯改善了果實的商品性狀，果實大小適中、皮色鮮艷、著色均勻、肉厚而飽滿。印楝素水溶劑治療根結線蟲不容易產生抗藥性，它是由天然植物印楝樹的果實提取而成，長期使用不僅對根結線蟲有良好的治療效果，而且對土壤本身有很好的改良作用，能夠促進土壤團粒的形成，增強土壤的透氣性，改善土壤礦質元素含量，提高土壤保水保肥的能力，從根本上改變農作物的生長環境，同時改變果實的品質。印楝素水溶劑治療根結線蟲在一年之內都不會復發，具有較好的持效期。而印楝素水乳劑是化工合成的，長期使用此類產品，有些害蟲會產生抗藥性，對植物起不到根本的防治作用。
試驗 II
I.材料與方法 I. I供試材料
印楝素水溶劑(按本發明實施例1-7中的任意一種方法制得)，印楝素水乳劑(云南中科生物產業有限公司生產)。供試植物草莓 I. 2方法與步驟
試驗在遼寧省鳳城市白旗鎮刁窩村草莓試驗基地中進行，此地塊根結線蟲的發病率為100%，前茬作物為草莓。試驗設3個處理，處理I施入印楝素水溶劑，處理II施入印楝油水乳劑，對照(CK)澆入清水。于2011年8月中旬進行定植，床高10-15厘米，壟床面寬60 —70厘米，壟床間距20 - 30厘米，雙行栽植，行距為35 - 45厘米，穴距25 — 30厘米。設5次重復，每壟為一個小區，共15個小區，栽培管理與一般生產相同。定植15天、35天、55天時分別向土壤中施入I :300比例稀釋溶液250ml的印楝素水溶劑和印楝素水乳劑，對照澆入清水。5天后，取主根附近5-lOcm，土壤深度5-15cm進行鏡檢，測量土壤物理性質的變化情況，同時計算防治效果。定植20天、40天、60天時，拔出番茄秧進行檢查，同時觀察地上部分的生長狀況，統計作物產量。采集成熟期草莓鮮樣，分析可溶性糖、V。含量。2.結果與分析
印楝素水乳劑和印楝素水溶液對土壤根結線蟲都具有良好的防治效果，印楝素水溶劑防治根結線蟲的效果較好。定植20天時，幼蟲相對防效為62. 64%, 40天時，幼蟲相對防效為73. 20%，60天時，幼蟲相對防效為95. 76%。施用印楝素水乳劑20天時，幼蟲相對防效為55. 42%，40天時，幼蟲相對防效為61. 93%，60天時，幼蟲相對防效為86. 17%。未施用印楝素的，根結線蟲的發病率為98. 13%。印楝素水溶劑的治療根結線蟲的速度相對較快。在定植20天、40天時，處理I中發現有少量根結線蟲存在，60天時，未發現根結線蟲存在。而定植60天時，處理II中仍發現有少量的根結線蟲存在。另外，印楝素水溶劑中含有多種活性物質，azadirachtin、protolimonoids、limonoids、tetranortriterpenoids、pentanortriterpenoids、hexanortriterpenoids和一些nonterpenoid,不僅對土壤根結線蟲這一種蟲害有很好的防治效果,而且對多種不同生活習性的害蟲，如紅蜘蛛、粉虱、蚜蟲、水蠟蟲、牧草蟲、斑潛蠅有拒食、忌避、觸殺、胃毒、抑制生長發育、破壞昆蟲繁育等作用。同時，對土壤中有害微生物也產生一定影響，細菌、真菌數量的增加是土壤致病性增強和土壤退化的表現，施用印楝素水溶劑后，土壤細菌、真菌、放線菌均發生變化，隨著印楝素水溶劑施用次數的增加，抑制了真菌、細菌和放線菌數量的生長，其數量均低于處理II和對照。印楝素水溶劑與其他農藥相比，可以改善土壤微生態環境。
試驗表明施用印楝素水溶劑后，土壤的物理性質發生了變化，隨著印楝素水溶劑的施用次數不斷增加，土壤容重和比重較施用印楝素水乳劑的小，定植60天時，土壤容重為I. 31 g-cm-3,比重為2. 55，土壤的透氣性逐漸增加。同時，隨著土壤孔隙度的逐漸增加，土壤的含氧量也逐漸增加，有效改善了土壤板結狀況和土壤疏松性。
土壤有機質是土壤固相部分的重要組成成分，它對土壤形成、土壤肥力、環境保護及農林業可持續發展等方面都有著極其重要的意義。施用印楝素水溶劑能夠改變土壤中有機質的含量。其中定植20天、40天、60天時，施用印楝素水溶劑和印楝素水乳劑的土壤有機質含量差異不顯著，均高于對照。施用印楝素水溶劑能提高草莓產量和果實品質，與對照相比，處理I和處理II的增產幅度可以達到18. 7%和10. 4%。印楝素水溶劑處理草莓畸形果少，而且果實香味濃郁，提高了草莓果實可溶性固形物的含量、維生素c和可溶性糖含量，提高了草莓的口感。施用印楝素水溶劑可以有效防治草莓根結線蟲，對土壤本身有很好的改良作用，能夠改善土壤理化性質，增強土壤的有機質含量，改善土壤微生態環境，提高土壤保水保肥 的能力，促進草莓植株生長，顯著提高草莓產量和品質。補充穩定性結果
在0-30°C貯存條件下，避免陽光直射，本發明印楝素水溶劑可以保存24個月，而印楝素水乳劑僅保存12個月。
權利要求
1.治療根結線蟲的印楝素水溶劑，其特征在于它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素AO. 0045-0. 005份，印楝素B O. 08-0. 12份，印楝素C O. 14-0. 16份，水O. 74-0. 75 份。
2.根據權利要求I所述的治療根結線蟲的印楝素水溶劑，其特征在于它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素A0. 0048份，印楝素B O. I份，印楝素C O. 15份，水O. 7452 份。
3.權利要求I或2所述的治療根結線蟲的印楝素水溶劑的制備方法，其特征在于取符合所述重量份數的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量份數的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。
全文摘要
本發明公開了一種農藥，特別是涉及治療根結線蟲的印楝素水溶劑及其制備方法。治療根結線蟲的印楝素水溶劑，它是由下述原料按所述重量份數制備而成印楝素A0.0045-0.005份，印楝素B0.08-0.12份，印楝素C0.14-0.16份，水0.74-0.75份。取符合所述重量份數的印楝素A、印楝素B和印楝素C加入到符合所述重量份數的水中攪拌，使得印楝素A、印楝素B和印楝素C溶解到水中，既得。本發明印楝素水溶劑具有殺蟲高效、土壤改良、易降解、無殘留、無抗藥性、穩定性好的特點。
文檔編號A01P7/02GK102626092SQ201210067320
公開日2012年8月8日 申請日期2012年3月15日 優先權日2012年3月15日
發明者劉明, 呂洪陽, 周圍, 紀明山 申請人:遼寧綠禾農業有限公司