專利名稱：一種淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發明屬于農藥技術領域，具體涉及一種淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑及其制備方法和應用。
背景技術：
淡紫擬青霉是一種生物試劑，在殺線蟲過程中具有高效、安全、持效久的特點，另外淡紫擬青霉還能促進植物的生長，達到增產的目的。現有的淡紫擬青霉劑型有粉劑、可濕性粉劑。各種劑型各有優缺點，粉劑是真菌最早開發以及使用的劑型，其制備方法簡單；但是孢子粉劑存在貯存時間短、使用不方便、分布不均勻以及藥效發揮慢等缺點。可濕性粉劑和粉劑相比，使用方便，且能兌水使用符合常規用藥習慣，但是也存在孢子貯存期短的問題。在國內，淡紫擬青霉的專利有多個，但大多集中于發酵培養，制成的劑型也大多為粉劑或顆粒劑，兩種劑型在貯存時間及施用效果方面有缺陷。登記注冊的生物農藥主要種類如下潘滄桑等研制的高濃縮吸附型粉劑——線蟲清，主要作用于根結線蟲；劉杏忠等人研制的大豆保根劑菌劑，主要用于防治大豆胞囊線蟲。作為生物農藥登記的公司國內有兩家德強生物股份有限公司和福建凱利生物制品有限公司，另外國內也有一些生產企業正在對淡紫擬青霉孢子制劑進行探索與研究。雖然國內對淡紫擬青霉制劑的研究已經開始起步，但仍然局限于一些簡單的劑型，如粉劑和顆粒劑，新型的劑型還未見報道。油懸浮劑是指一種或一種以上農藥有效成分(其中至少有一種為固體原藥)在非水系分散介質中形成高分散、穩定的懸浮體系。相對于其他劑型，油懸浮劑主要有以下幾個優勢一是從環保角度來看，油懸浮劑是水基化、顆粒化的綠色制劑的一個補充，適用于在水中穩定性差、易分解、制粒困難的農藥；二是對于一些親油性很強的農藥，制成油懸浮齊U，有助于提高藥效，起到增效作用；三是在親脂性物質中完全不溶的農藥，制成油懸浮劑之后，則可以提高有限成分的滲透性和內吸性，促使藥劑發揮作用；四是油懸浮劑是以油為載體，對靶標有良好的親和性，可以更好地發揮藥效；五是在缺水干旱地區施藥或飛機施藥時，應盡可能減少用水稀釋，而直接用油噴霧更為有效方便。

發明內容
本發明通過篩選與淡紫擬青霉孢子相容性較佳的溶劑油、乳化劑、分散劑、增稠齊U，進行淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑配方及加工工藝研究，研究開發出一種具有較好線蟲寄生效果，對環境友好且耐貯存的真菌孢子劑型。本發明的目的是提供一種殺線蟲效果好的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑；本發明的另一目的是提供一種淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑的制備、使用方法。本發明的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑是由下列組分制成的按照重量百分比計，淡紫擬青霉真菌孢子粉占1%_20%，乳化劑占10%_30%，增稠劑占2%-10%，分散劑占3%-15%，植物油占25%-84% ；、
本發明的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑另一優選的配比組成是按照重量百分比計，淡紫擬青霉真菌孢子粉占3%-10%，乳化劑占10%_20%，增稠劑占2%-8%，分散劑占3%-10%，植物油占52%-82% ；本發明的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑的制備方法如下(I)按照重量百分比計，稱取淡紫擬青霉真菌孢子粉1%_20%，乳化劑10%_30%，增稠劑2%-10%，分散劑3%-15%，植物油25%-84% ；(2)在環境溫度不高于30°C的條件下，將步驟(I)所述各物質加入到攪拌機中，攪拌0. 5-1小時，混合均勻；或者在環境溫度不高于30°C的條件下，將步驟(I)所述各物質加入砂磨機中，在1000-15000r/min的轉速下研磨10-20分鐘，混合均勻；或者用高剪切機在10000-50000r/min的轉速下剪切5_10min，混合均勻；即得到淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。
所述的淡紫擬青霉真菌孢子粉優選為淡紫擬青霉高孢粉，含孢量大于I X IO8個/g，活孢率大于70% ；所述的乳化劑為非離子型乳化劑，為EL-12、EL-20、EL-60、By-120、By-130、NP-4、NP-7、AEO-3、AEO-5、AE0-7、農乳700#、農乳34#、農乳36#和農乳37#中的一種或者多種的混合劑；所述的增稠劑為凡士林、黃原膠、阿拉伯樹膠、白炭黑、硅酸鎂鋁中的一種或者多種的混合劑；所述的分散劑為YUS-EP60P、YUS-CHl 100、YUS-FS7PG、YUS-110, YUS-D935、SP-SC36、SP-SC390中的一種或者多種的混合劑；所述的植物油為大豆油、花生油、色拉油、葵花油、菜籽油、芝麻油或甲酯化大豆油。本發明的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑的使用方法如下使用時，將淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑用水稀釋2000-5000倍，在土壤整理時結合播前整地采取溝施或穴施的方式均勻施入；或者用水稀釋200-1000倍，配制成孢子懸浮液用于蘸根使用；或者將淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑用水稀釋1000-3000倍，在作物苗期或生長前期用于灌根使用；或者用水稀釋2000-5000倍配制成菌液隨水沖施或者與沖施肥混合沖施使用。本發明的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑可用于防治多種線蟲，如根結線蟲、胞囊線蟲、腎形線蟲、接根結線蟲等；可用于多種作物，如大豆、煙草、番茄、黃瓜、茄子、胡蘿卜、辣椒、南瓜、菜豆、甘薯、葡萄、草莓、桃、西瓜、甜瓜等。本發明的有益效果為本發明解決了目前市場上淡紫擬青霉劑型缺乏的缺點，提供了一種施用成本低、使用方便、殺線蟲效果好的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。本發明提供的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑中的淡紫擬青霉真菌孢子存活時間更長，能用水稀釋成孢子懸浮液進行蘸根、沖施、灌根使用，具有高活性、乳化完全穩定、使用方便的優點。本發明提供的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑與市場上的化學殺線蟲相比，具有以下優點( I)對線蟲防效顯著，能有效抑制線蟲侵染植物，并且線蟲不易產生抗藥性；
(2)藥效持續時間長，淡紫擬青霉為活體微生物，在土壤中大量繁殖、自然傳播，從而保護作物整個生長季節不受線蟲的危害；(3)能促進植物生長，淡紫擬青霉的代謝產物中有一類類似吲哚乙酸的產物，能促進植物根系與植株的生長，提高作物產量；
(4)環保安全，因為是純微生物菌劑，不污染環境，無藥害，無殘留，對人畜安全。本發明提供的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑與目前市場上的淡紫擬青霉粉劑、可濕性粉劑及顆粒劑相比具有以下優點(I)采用植物油作為載體，隔絕空氣與水分，淡紫擬青霉真菌孢子的貯存期延長；(2)所選擇的乳化劑、分散劑安全，與淡紫擬青霉真菌孢子兼容性好，對制劑的貯存期沒有較大影響；(3)油懸浮劑經兌水稀釋之后，呈透明或者半透明狀的乳狀液，乳化完全，穩定性良，淡紫擬青霉真菌孢子包裹在油滴中從而免受環境的影響；(4)油懸浮劑經兌水稀釋后，孢子在水中均勻分散，施用時分布均勻；(5)該油懸浮劑經室內生測后，活性高，毒殺根結線蟲效果很好；(6)與可濕性粉劑相比，田間使用方便，一個生長周期只需施用一次；(7)制備方法簡單，產品原料來源廣泛，適合工業生產。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明做詳細的說明下述的實施例中，配方均是按照重量百分比計算；植物油、乳化劑、分散劑、增稠劑均有市售。實施例I :淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑的貯存時間測定按照下表所示的配方將淡紫擬青霉真菌孢子粉、乳化劑(NP-4和EL-20)、增稠劑(黃原膠)、分散劑(YUS-EP60P)和植物油(色拉油)在砂磨機中砂磨10分鐘，配制成淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑；取Iml淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑裝入I. 5ml的離心管中，在室溫下貯存，每周測定孢子萌發率。表I淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑配方
淡紫擬青霉真菌孢子粉3wt%
乳化劑(NP-4 和 EL-20)15wt%分散劑(YUS-EP60P)3wt%
增稠劑(黃原膠)5 wt% 植物油(色拉油)補足到100 wt %
實驗結果表明，淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑貯存一個月后孢子活性為80%，通過線性關系計算得出淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑在常溫下貨架期大約為8個月，和市場上的淡紫擬青霉粉劑的貯存期為4個月相比，本發明的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑能明顯延長制劑的貯存時間。實施例2 :淡紫擬青霉孢子油懸浮劑室內殺線蟲活性測定(I)淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑的制備淡紫擬青霉為食線蟲真菌，通過孢子萌發生長出菌絲侵染線蟲。在環境溫度不高于30°C的條件下，將72wt%的甲酯化大豆油、7wt%的EL-20、4wt%的NP_4、4wt%的AE0-3、3wt%的YUS-CHl 100、5 wt %的凡士林和5 wt%的淡紫擬青霉真菌孢子粉加入到砂磨機中，在1000-1500r/min的速度下研磨10分鐘，制成淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑；將淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑分別稀釋I X 105、I X IO7,1 X IO9倍，配成懸浮液，用于室內殺線蟲活性 測定；(2)線蟲懸浮液的制備從活體寄主植物上挑取南方根結線蟲的卵塊用水清洗，胞囊線蟲的胞囊用
0.4mmol/L氯化鋅(ZnCl2)溶液清洗，置于培養皿的濕濾紙上，20°C 25°C下孵化，獲得齡期一致的二齡幼蟲。用水將培養好的莖線蟲、松材線蟲從培養基上洗脫，過濾，lOOOr/min下離心2min，棄上清液，加水，再離心，最后用水將線蟲重懸浮至每毫升> 100頭線蟲，備用。(3)淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑的殺線蟲活性測定用移液槍取配制好的懸浮液Iml分別加入到各個試管中，然后再向各個試管中加入制備好的線蟲懸浮液1ml，使藥液與線蟲懸浮液等量混合均勻。用移液槍移取混合液于24孔細胞培養板中，在25°C人工氣候培養箱中培養。使用每種稀釋度的懸浮液的試驗均重復3次，以清水作為對照。室內生測結果發現，當淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑稀釋IO9倍時，對南方根結線蟲二齡幼蟲仍然有較強的毒殺作用，線蟲死亡率為100%。說明淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑對線蟲的毒殺效果很好。在室內試驗中是將淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑稀釋IO5倍，在田間應用時推薦稀釋200-5000倍用于不同的施藥方式。實施例3在環境溫度不超過30°C的條件下，將10wt%的淡紫擬青霉真菌孢子粉、8wt%的EL-20、7wt% 的 AE0-3、5wt% 的 EL_12、5wt% 的 YUS_CH1100、5wt% 的凡士林和 60wt% 的大豆油加入到攪拌機中攪拌30分鐘，即配制成10wt%的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。使用時，用水稀釋2000-5000倍，在土壤整理時結合播前整地采取溝施或穴施的方式均勻施入。實施例4在環境溫度不超過30°C的條件下，將10wt%的淡紫擬青霉真菌孢子粉、12wt%的NP-4、3wt%的EL-20、5wt%的YUS-CHl 100、5wt%的黃原膠和65wt%的大豆油加入到攪拌機中攪拌30分鐘，即配制成10wt%的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。使用時，用水稀釋200-1000倍，配制成孢子懸浮液用于蘸根使用。實施例5在環境溫度不超過30°C的條件下，將5wt%的淡紫擬青霉真菌孢子粉、7wt%的By-120、8wt%的NP-4、5wt%的YUS_EP60P、3wt%的凡士林和67wt%的甲酯化大豆油加入到攪拌機中攪拌I小時，即制成5wt%的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。使用時，用水稀釋1000-3000倍，在作物苗期或生長前期用于灌根使用。實施例6在環境溫度不超過30°C的條件下，將8wt%的淡紫擬青霉真菌孢子粉、6wt%的By-120,5wt% 的 EL-12、5wt% 的 AE0_3、4wt% 的 NP_4、5wt% 的 YUS_EP60P、3wt% 的凡士林和62wt%的色拉油加入到砂磨機中，在1000-1500r/min的轉速下研磨10分鐘,混合均勻即制成8wt%的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。使用時，用水稀釋2000-5000倍配制成菌液隨水沖施或者與沖施肥混合沖施使用。實施例7在環境溫度不超過30°C的條件下，將10wt%的淡紫擬青霉高孢粉，4wt%的EL-12、6wt% 的 EL-20、5wt% 的 AE0-5、5wt% 的農乳 34#、5wt% 的 YUS-EP60P、lwt% 的黃原膠、2 wt% 的 娃酸鎂招和62wt%的色拉油加入到砂磨機中，在1000-1500r/min的轉速下研磨15分鐘,混合均勻即制成8wt%的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。使用時，用水稀釋200-1000倍，配制成孢子懸浮液用于蘸根使用。實施例8在環境溫度不超過30°C的條件下，將5wt%的淡紫擬青霉真菌孢子粉、4wt%的EL-12、6wt% 的農乳 700#、5wt% 的 NP_4、5wt% 的 SP_SC36、5wt% 的凡士林和 67wt% 的甲酯化大豆油加入到高剪切機中，在10000-50000r/min的轉速下剪切5分鐘，即制成8wt%的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。使用時，用水稀釋1000-3000倍，在作物苗期或生長前期用于灌根使用。
權利要求
1.一種淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑，其特征在于，它是由按重量百分比計的下述組分制成的 淡紫擬青霉真菌孢子粉占1%_20%，乳化劑占10%-30%，增稠劑占2%-10%，分散劑占3%-15%，植物油占 25%-84%。
2.根據權利要求I所述的懸浮劑，其特征在于，它是由按重量百分比計的下述組分制成的 淡紫擬青霉真菌孢子粉占3%-10%，乳化劑占10%-20%，增稠劑占2%-8%，分散劑占3%-10%，植物油占 52%-82%。
3.根據權利要求I所述的懸浮劑，其特征在于，所述的淡紫擬青霉真菌孢子粉為淡紫擬青霉高孢粉，其含孢量大于I X IO8個/g，活孢率大于70%。
4.根據權利要求I所述的懸浮劑，其特征在于，所述的乳化劑為EL-12、EL-20、EL-60、By-120、By-130、NP-4、NP-7、AEO-3、AEO-5、AEO-7、農乳 700#、農乳 34#、農乳 36# 和農乳 37#中的一種或者多種的混合劑。
5.根據權利要求I所述的懸浮劑，其特征在于，所述的增稠劑為凡士林、黃原膠、阿拉伯樹膠、白炭黑、硅酸鎂鋁中的一種或者多種的混合劑。
6.根據權利要求I所述的懸浮劑，其特征在于，所述的分散劑為YUS-EP60P、YUS-CHl 100、YUS-FS7PG、YUS-110、YUS-D935、SP-SC36、SP-SC390 中的一種或者多種的混合劑。
7.根據權利要求I所述的懸浮劑，其特征在于，所述的植物油為大豆油、花生油、色拉油、葵花油、菜籽油、芝麻油或甲酯化大豆油。
8.權利要求I所述的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟 (1)按照重量百分比計，稱取淡紫擬青霉真菌孢子粉1%_20%，乳化劑10%-30%，增稠劑2%-10%，分散劑 3%-15%，植物油 25%-84% ； (2)在環境溫度不高于30°C的條件下，將步驟(I)所述各物質加入到攪拌機中，攪拌0.5-1小時，混合均勻；或者在環境溫度不高于30°C的條件下，將步驟(I)所述各物質加入砂磨機中，在1000-15000r/min的轉速下研磨10-20分鐘，混合均勻；或者用高剪切機在10000-50000r/min的轉速下剪切5_10min，混合均勻；即得到淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。
9.權利要求I所述的淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑的使用方法，其特征在于，使用時，將淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑用水稀釋2000-5000倍，在土壤整理時結合播前整地采取溝施或穴施的方式均勻施入；或者用水稀釋200-1000倍，配制成孢子懸浮液用于蘸根使用；或者將淡紫擬青霉油懸浮劑用水稀釋1000-3000倍，在作物苗期或生長前期用于灌根使用；或者用水稀釋2000-5000倍配制成菌液隨水沖施或者與沖施肥混合沖施使用。
全文摘要
本發明公開了一種淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑及其制備方法和應用，屬于農藥技術領域。本發明的懸浮劑是由下列組分制成的按照重量百分比計，淡紫擬青霉真菌孢子粉占1%-20%，乳化劑占10%-30%，增稠劑占2%-10%，分散劑占3%-15%，植物油占25%-84%。將按照上述比例稱取的各成分在環境溫度不高于30℃的條件下，在攪拌機中攪拌0.5-1小時或在砂磨機中于1000-15000r/min的轉速下研磨10-20分鐘或在高剪切機中以10000-50000r/min的轉速剪切5-10min，即得到淡紫擬青霉真菌孢子油懸浮劑。本發明的懸浮劑對線蟲防效顯著，藥效持續時間長，環保安全，能促進植物生長。
文檔編號A01N25/04GK102742607SQ20121025652
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月23日 優先權日2012年7月23日
發明者杜鳳沛, 殷麗 申請人:中國農業大學