專利名稱：一種粗榧抗植物病毒劑及其制備方法
技術領域：
本發明屬于植物及其應用領域，具體涉及粗榧抗植物病毒病制劑及其制備方法。
背景技術：
植物病毒是一種由核酸和蛋白質組成的具有侵染活性的細胞內寄生病原物，據國際病毒分類委員會(ICTV)的第八次報告，目前全世界發現的植物病毒種類達1122個。植物病毒所引起的植物病害素有“植物癌癥”之稱，其對農作物的危害程度僅次于真菌病原物，幾乎每種農作物都受到2 3種病毒的危害。全世界每年由植物病毒造成的損失約4百億美元，僅煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)造成的危害就超過I億美元。由于植物病毒具有嚴格的寄生性，其寄生在植物細胞甚至是細胞核內進行核酸(RNA或DNA)的復制和蛋白質外殼的合成，組成新的病毒粒子。這就決定了植物病毒病的防治難度大，一般藥劑沒有效果。20世紀初Allard報道商陸汁液中存在TMV的抑制物質，之后防治植物病毒的重點逐漸轉向植物天然提取物方向。特別是從上世紀90年代以來，人們陸續從天然產物找到了許多抗植物病毒的抑制物質，為開發高效、專一、安全的植物病毒天然抑制劑提供了基礎。中國粗榧(Cephalotaxus sinensis L1.)為三尖杉科,三尖杉屬植物,又名粗榧(浙江)，鄂西粗榧(中國樹木分類學)，中華粗榧杉、粗榧杉(中國裸子植物志)。中國粗榧為我國特有樹種，分布很廣，產于江蘇南部、浙江、安徽南部、福建、江西、河南、湖南、湖北、陜西南部、甘肅南部、四川、云南東南部、貴州東北部、廣西、廣東西南部，多數生于海拔600-2200米的花崗巖、砂巖及石灰巖山地。木材堅實，可作農具及工藝等用。葉、枝、種子、根可提取多種植物堿，對治療白血病及淋巴肉瘤等有一定療效(中國科學院中國植物志編輯委員會:《中國植物志》，第7卷，科學出版社，1978年，P.428-432)。關于中國粗榧及其代謝產物對農業生產上病、蟲、草害的作用目前只有零星報道。有報道中國粗榧生物堿衍生物對煙草花葉病毒具較好鈍化作用(辛玉成，王元慶.三尖杉酯堿合成物質對煙草花葉病毒的作用效果初報[J].萊陽農學院學報，1998，15 (3):205-207.)，并具有除草活性(郝雙紅，魏艷，張綠，等.中國粗榧枝葉提取物分離及其對反枝莧的除草活性[J].農藥學學報，2006，8 (I):91-94.)，中國粗榧對粘蟲具較強拒食活性(張興，楊崇珍.西北地區殺蟲植物的篩選[J].西北農業大學學報.1999，27 (2):21-27),還具有較強的殺線蟲活性(文艷華，馮志新，徐漢虹等，植物抽提物對幾種植物病原線蟲的殺線活性篩選[J].華中農業大學學報.2001，20 (3):235-238)。但是這些都是在實驗室內測定結果，且至今未見對其展開系統的抗植物病毒作用研究，沒有形成產品，不能應用于農業生產。

發明內容

本發明的目的在于，以粗榧(Cephalotaxus sinensis L1.)為原料,提供一種抗植物病毒效果高、無公害、價格低廉的植物源抗植物病毒劑及其制備方法。
為了實現上述任務，本發明采取如下的技術解決方案:一種粗榧抗植物病毒劑，其特征在于，制得的該粗榧抗植物病毒劑以粗榧提取物為主成分并加入助劑加工而成，制劑形態是可溶性液劑、水劑及微乳劑；其中:所述的微乳劑由以下原料按重量百分比配制:粗榧提取物10 % 30 %，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 20%，防凍劑:5% 10%，余量為水，原料的重量百分比之和為100%;所述的可溶性液劑由以下原料按重量百分比配制:粗榧提取物10% 30%，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 30%，原料的重量百分比之和為100% ；所述的水劑由以下原料按重量百分比配制:粗榧提取物10 % 30 %，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 30%，防凍劑:5% 10%，余量為水，原料的重量百分比之和為100%;上述有機溶劑為乙酸乙酯，環己酮、油酸甲酯、乙醇，甲醇，丙酮，二甲基甲酰胺中的一種或幾種的混合物；所述的乳化劑為烷基苯磺酸鹽類、烷基酚聚氧乙烯醚類、多苯乙烯苯酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚類及其類似物質、斯潘系列、吐溫、農用陰離子-磷酸酯中的一種或幾種的混合物；所述的表面活性劑為烷基苯磺酸鹽類、烷基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚 氧丙烯醚類及其類似物質、蓖麻油與環氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物中一種或幾種的混合物；所述的防凍劑為乙二醇或丙三醇。上述粗榧抗植物病毒劑的制備方法，其特征在于，采用如下步驟:A、將粗榧用植物組織粉碎機粉碎至I 5mm的粗粉碎物。B、將步驟A所得的粗粉碎物采用溶劑法浸提，浸提溶劑為乙醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚、水中的任意一種或幾種，提取溫度為50 80°C，提取時間為18 20小時，浸提物經真空濃縮至相當于Ikg干粉/kg濃縮液；C、將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑和表面活性劑置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒微乳劑；D、將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑和表面活性劑置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒可溶性液劑；E、將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑、表面活性劑和水置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒水劑。本發明所制成的粗榧抗植物病毒劑具有以下優點:1.抗植物病毒活性顯著，可用于煙草、辣椒、番茄、西葫蘆、馬鈴薯等作物上防治煙草花葉病毒病(Tobacco mosaic virus, TMV)、黃瓜花葉病毒病(Cucumber mosaicvirus, CMV)及馬鈴薯病毒病(Potato Virus X, PVX ；Potato Virus Y, PVY)等多種植物病
毒病;2.對人、畜、害蟲天敵及其它有益生物安全，環境兼容性好；3.生物源農藥，使用后無殘留毒害；
4.資源豐富、制備方法簡單、成本低廉、適宜推廣使用。
具體實施例方式為了更好的理解發明的實質，下面用實施例來詳細說明發明的技術內容，但發明并不局限于這些實施例。本發明的植物源抗病毒劑，以粗榧提取物為活性物質，加入一定比例助劑進行劑型加工，可以制得環保型制劑微乳劑、水劑或可溶性液劑。微乳劑由以下原料按重量百分比配制:粗榧提取物:10 % 30%，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 20%，防凍劑:5% 10%，余量為水，原料的重量百分比之和為100%。可溶性液劑由以下原料按重量百分比配制:粗榧提取物:10% 30%，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 30%，原料的重量百分比之和為100% ；水劑由以下原料按重量百分比配制 :粗榧提取物:10 % 30 %，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 30%，防凍劑:5% 10%，余量為水，原料的重量百分比之和為100%。所述的有機溶劑為乙酸乙酯、環己酮、油酸甲酯、乙醇、甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺中的一種或幾種的混合物；所述的乳化劑為烷基苯磺酸鹽類、烷基酚聚氧乙烯醚類、多苯乙烯苯酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚類、斯潘系列、吐溫、農用陰離子-磷酸酯中的一種或幾種的混合物；所述的表面活性劑為烷基苯磺酸鹽類、烷基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚類、蓖麻油與環氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物中一種或幾種的混合物；所述的防凍劑為乙二醇或丙三醇。粗榧抗植物病毒劑的制備方法，采用如下步驟:1、粗榧提取物的獲得:A、將粗榧用植物組織粉碎機粉碎至I 5mm的粗粉碎物。B、將步驟A所得的粗粉碎物采用常規的溶劑法浸提，浸提溶劑為乙醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚、水中的任意一種或幾種，提取溫度為50 80°C，提取時間為18 20小時，浸提物經真空濃縮至相當于Ikg干粉/kg濃縮液，即為粗榧提取物。2、粗榧抗植物病毒劑制備I)將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑、防凍劑和表面活性劑置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒微乳劑。2)將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑和表面活性劑置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒可溶性液劑。3)將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑、表面活性劑、防凍劑和水置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒水劑。經發明人的試驗證明，20 %粗榧微乳劑、20 %粗榧可溶性液劑和10%粗榧水劑對煙草花葉病毒(TMV)具有良好的防治效果。以下是發明人給出的實施例。實施例1: 20%粗榧微乳劑的配制稱取粗榧濃縮物20kg,溶解于30kg乙酸乙酯中，再加入15kg十二燒基苯磺酸隹丐，5kg苯乙烯酸聚氧乙烯醚，5kg乙二醇，在高速攪拌下混和，加熱至40°C左右；高速攪拌下滴加去離子水30kg，控制水的滴加速度，使溫度保持在40°C左右；水滴加完畢，升溫至50°C，攪拌I小時，制得20%粗榧微乳劑100kg。制劑的穩定性、外觀等符合商品制劑的要求。實施例2:20%粗榧可溶性液劑的配制稱取粗榧濃縮物20kg，溶解于30kg乙酸乙酯中，再加入5kg烷基酚聚氧乙烯醚，Ikg烷基多糖苷A，乙醇補齊至100kg，混合均勻后，以攪拌速度800 1000轉/分鐘攪拌10 30分鐘，即可制得粗榧可溶性液劑100kg。制劑的穩定性、外觀等符合商品制劑的要求。實施例3:10%粗榧水劑的配制稱取粗榧濃縮物10kg，溶解于30kg乙酸乙酯中，再加入5kg烷基酚聚氧乙烯醚，Ikg燒基多糖苷A, 5kg乙二醇,水補齊至100kg,混合均勻后，以攪拌速度800 1000轉/分鐘攪拌10 30分鐘，即可制得粗榧可溶性液劑100kg。制劑的穩定性、外觀等符合商品制劑的要求。實施例4:3種粗榧抗病毒劑對TMV的室內生物測定(I)對TMV體外鈍化 效果采用半葉枯斑法測定,選取生長旺盛、長勢一致的5 6葉期心葉煙(Nicotianaglutinosa)為枯斑寄主。以葉脈為界，左半葉接種藥液與病毒等體積混合液，右半葉接種蒸餾水與病毒等體積混合液作對照，病毒接種濃度為10μ g/mL，鈍化時間為5min，接種后立即用清水沖洗接種葉片表面。每處理接種4片葉子，試驗重復3次，3d后統計枯斑數，計算抑制率。 抑制率(％)=(對照枯斑數-處理枯斑數)/對照枯斑數X 100測定結果見表I。表1:3種粗榧抗病毒劑對TMV體外鈍化作用
權利要求
1.一種粗榧抗植物病毒劑，其特征在于，制得的該粗榧抗植物病毒劑以粗榧提取物為主成分并加入助劑加工而成，制劑形態是可溶性液劑、水劑及微乳劑；其中: 所述的微乳劑由以下原料按重量百分比配制: 粗榧提取物10% 30%，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 20%，防凍劑:5% 10%，余量為水，原料的重量百分比之和為100% ； 所述的可溶性液劑由以下原料按重量百分比配制: 粗榧提取物10% 30%，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 30%，原料的重量百分比之和為100% ； 所述的水劑由以下原料按重量百分比配制: 粗榧提取物10% 30%，有機溶劑:30% 60%，表面活性劑:5% 30%，防凍劑:5% 10%，余量為水，原料的重量百分比之和為100%。
2.如權利要求1所述的粗榧抗植物病毒劑，其特征在于: 所述的有機溶劑為乙酸乙酯、環己酮、油酸甲酯、乙醇、甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺中的一種或幾種的混合物； 所述的乳化劑為烷基苯磺酸鹽類、烷基酚聚氧乙烯醚類、多苯乙烯苯酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚類、斯潘系列、吐溫、農用陰離子-磷酸酯中的一種或幾種的混合物； 所述的表面活性劑為烷基苯磺酸鹽類、烷基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧 丙烯醚類、蓖麻油與環氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物中一種或幾種的混合物； 所述的防凍劑為乙二醇或丙三醇。
3.權利要求1所述的粗榧抗植物病毒劑的制備方法，其特征在于，采用如下步驟: A、將粗榧用植物組織粉碎機粉碎至I 5mm的粗粉碎物。
B、將步驟A所得的粗粉碎物采用溶劑法浸提，浸提溶劑為乙醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚、水中的任意一種或幾種，提取溫度為50 80°C，提取時間為18 20小時，浸提物經真空濃縮至相當于Ikg干粉/kg濃縮液； C、將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑和表面活性劑置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒微乳劑； D、將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑和表面活性劑置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒可溶性液劑； E、將步驟B所得的濃縮液，按照配方量與有機溶劑、表面活性劑和水置于混配釜中，攪拌均勻后即得粗榧抗植物病毒水劑。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于: 所述的有機溶劑為乙酸乙酯，環己酮、油酸甲酯、乙醇、甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺中的一種或幾種的混合物； 所述的乳化劑為烷基苯磺酸鹽類、烷基酚聚氧乙烯醚類、多苯乙烯苯酚聚氧乙烯醚、苯乙基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚類、斯潘系列、吐溫、農用陰離子-磷酸酯中的一種或幾種的混合物； 所述的表面活性劑為烷基苯磺酸鹽類、烷基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚類、苯乙基酚聚氧乙烯醚聚氧丙烯醚類、蓖麻油與環氧乙烷的加成物、芳烷基酚聚氧乙烯醚甲醛縮合物中一種或幾種的混合物； 所述的防凍劑為乙二 醇或丙三醇。
全文摘要
本發明公開了一種以粗榧(Cephalotaxus sinensis Li.)提取物為有效成分的植物源抗病毒劑及其制備方法，是將粗榧的莖和葉粉碎，提取，經一定的加工過程，制備成粗榧抗病毒可溶性液劑、水劑及微乳劑，可用于煙草、辣椒、番茄、西葫蘆、馬鈴薯等作物上防治煙草花葉病毒病(Tobacco mosaic virus，TMV)、黃瓜花葉病毒病(Cucumber mosaic virus，CMV)及馬鈴薯病毒病(Potato Virus X，PVX；Potato Virus Y，PVY)等多種植物病毒病。制劑中含有粗榧提取物10％～30％，其余為助劑。本發明的抗植物病毒劑不僅抗病毒效果好，而且對環境、人、畜、害蟲天敵及其它有益生物安全。該抗植物病毒劑制備工藝簡單，成本低廉，適宜推廣應用。
文檔編號A01N65/06GK103120189SQ20131004840
公開日2013年5月29日 申請日期2013年2月6日 優先權日2013年2月6日
發明者何軍, 馬志卿, 景炳年, 安鳳秋, 馮俊濤, 張興 申請人:楊凌農科大無公害農藥研究服務中心