一種抗幽門螺桿菌免疫巴氏牛奶的生產方法
【專利摘要】抗幽門螺桿菌免疫巴氏牛奶的生產方法：取胃粘膜用微需氧培養法:85%N2、10%CO2、5%H2，37℃培養，革蘭氏染色及形態學鑒定及尿素酶、觸酶試驗鑒定Hp；取NCTC11637和國際標準菌株SS1;用自分離Hp菌株和標準Hp菌株培養收集菌體制成懸液；佛氏佐劑用羊毛脂、液體石蠟及結核菌素，研磨滅菌；Hp混合菌液加佛氏佐劑，研磨呈乳狀，超聲，制成混合疫苗;奶牛免疫程序:Hp混合疫苗作抗原,注射健康奶牛：皮下5-6個點，每點1.0ml；前后腿內側腋窩部和腹股溝4個點，每點1.5ml;注射相隔時間12-15天;經多次免疫抽牛血分離血清，牛奶用酶聯免疫實驗檢測抗HpIgG效價，即可收獲牛奶。
【專利說明】一種抗幽門螺桿菌免疫巴氏牛奶的生產方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物制品的【技術領域】，尤其涉及一種抗幽門螺桿菌免疫巴氏牛奶的生
產方法。
【背景技術】
[0002]關于抗幽門螺桿菌免疫免疫牛奶，生物科技研究工作者對該項課題，作了種種探索研究與試驗，獲得成功的確不多，在總結前人的基楚之上，建立我們的抗幽門螺桿菌免疫菌株的培養及抗原受體體系。

【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種抗幽門螺桿菌免疫牛奶的生產方法。而獲得具有人體抗幽門螺桿菌免疫的牛奶。具體方法步驟如下:
一、幽門螺桿菌的英文縮寫(Hp)菌株建立，以下簡稱Hp
(一)取胃粘膜組織處理后采用微需氧培養法(85%N2、10%C02、5%H2)，37°C培養2-3天，革蘭氏染色及形態學鑒定及尿素酶、觸酶試驗等生物學性狀鑒定的Hp ；
(二)從北京生物所獲取的NCTCl1637和國際標準菌株SSl。
[0004]二、免疫原的制備
(一)用自分離Hp菌株和標準Hp菌株經培養后收集菌體，用生理鹽水制成懸液；
(二)佛氏佐劑制備:羊毛脂1.5g、液體石臘8.5ml、結核菌素26mg,充分研磨均勻，高壓滅菌后備用；
(三)Hp混合菌液3ml(9X109cfu/ml)，加3ml佛氏完全佐劑，再充分研磨均勻呈乳狀，超聲粉碎菌體，制成多價混合疫苗。
[0005]三、免疫奶牛
(一)免疫程序:Hp混合疫苗作為抗原，免疫注射健康奶牛:
1、皮下5-6個點注射，每點1.0ml ；
2、前后腿內側腋窩部和腹股溝4個點注射，每點1.5ml;
3、免疫注射相隔時間為12-15天。
[0006](二)免疫試血試奶:
經過若干次免疫后抽取牛血分離血清及牛奶用酶聯免疫實驗檢測抗Hp IgG效價，牛血中抗體效價> 512，牛奶中抗體效價> 256即可收獲牛奶，否則，應加強注射一次后再收獲牛奶。
[0007]四、收獲乳汁后的處理技術 (一)溫度控制:
1、采用巴氏滅菌法溫度控制或高溫瞬間滅菌溫度與時間的控制；
2、采用真空冷凍干燥技術對高活性抗幽門螺桿菌免疫乳進行冷凍干燥物理性狀的質量控制。[0008](二)物理化學指標控制
(三) 衛生細菌學指標控制
五、編制抗-Hp IgG免疫乳的企業標準，以規范該產品的生產工藝及質量控制。
【具體實施方式】
[0009]本發明所述的一種抗幽門螺桿菌免疫巴氏牛奶的生產方法。實施方式重述如下:
1、幽門螺桿菌的英文縮寫(Hp)菌株建立，以下簡稱Hp
(1)取胃粘膜組織處理后采用微需氧培養法(85°福2、10%0)2、5%!12)，371:培養2-3天，革蘭氏染色及形態學鑒定及尿素酶、觸酶試驗等生物學性狀鑒定的Hp ；
(2)從北京生物所獲取的NCTC11637和國際標準菌株SSl。
[0010]2、免疫原的制備
(1)用自分離Hp菌株和標準Hp菌株經培養后收集菌體，用生理鹽水制成懸液；
(2)佛氏佐劑制備:羊毛脂1.5g、液體石臘8.5ml、結核菌素26mg,充分研磨均勻，高壓滅菌后備用；
(3)Hp混合菌液3ml(9X109cfu/ml)，加3ml佛氏完全佐劑，再充分研磨均勻呈乳狀，超聲粉碎菌體，制成多價混合疫苗。
[0011]3、免疫奶牛
(O免疫程序:Hp混合疫苗作為抗原，免疫注射健康奶牛:
皮下5-6個點注射,每點1.0ml ；
前后腿內側腋窩部和腹股溝4個點注射，每點1.5ml;
免疫注射相隔時間為12-15天。
[0012](2)免疫試血試奶:
經過若干次免疫后抽取牛血分離血清及牛奶用酶聯免疫實驗檢測抗Hp IgG效價，牛血中抗體效價> 512，牛奶中抗體效價> 256即可收獲牛奶，否則，應加強注射一次后再收獲牛奶。
[0013]4、收獲乳汁后的處理技術
(I)溫度控制:
采用巴氏滅菌法溫度控制或高溫瞬間滅菌溫度與時間的控制；
采用真空冷凍干燥技術對高活性抗幽門螺桿菌免疫乳進行冷凍干燥物理性狀的質量控制。
[0014](2)物理化學指標控制
(3)衛生細菌學指標控制
5、編制抗-Hp IgG免疫乳的企業標準，以規范該產品的生產工藝及質量控制。
【權利要求】
1.一種抗幽門螺桿菌免疫巴氏牛奶的生產方法，其特征在于:它的生產方法步驟如下: .1、幽門螺桿菌的英文縮寫Hp菌株建立，以下簡稱Hp； (1)取胃粘膜組織處理后采用微需氧培養法:85%N2、10%C02、5%H2，37°C培養2-3天，革蘭氏染色及形態學鑒定及尿素酶、觸酶試驗生物學性狀鑒定的Hp ； (2)從北京生物所獲取的NCTC11637和國際標準菌株SSl； .2、免疫原的制備； (1)用自分離Hp菌株和標準Hp菌株經培養后收集菌體，用生理鹽水制成懸液； (2)佛氏佐劑制備:羊毛脂1.5g、液體石臘8.5ml、結核菌素26mg,充分研磨均勻，高壓滅菌后備用； (3)Hp混合菌液3ml(9X109cfu/ml)，加3ml佛氏完全佐劑，再充分研磨均勻呈乳狀，超聲粉碎菌體，制成多價混合疫苗； .3、免疫奶牛； (O免疫程序:Hp混合疫苗作為抗原，免疫注射健康奶牛: 皮下5-6個點注射,每點1.0ml ； 前后腿內側腋窩部和腹股溝4個點注射，每點1.5ml ； 免疫注射相隔時間為12-15天； (2)免疫試血試奶: 經過若干次免疫后抽取牛血分離血清及牛奶用酶聯免疫實驗檢測抗Hp IgG效價，牛血中抗體效價> 512，牛奶中抗體效價> 256即可收獲牛奶，否則，應加強注射一次后再收獲牛奶； .4、收獲乳汁后的處理技術； (1)溫度控制: 采用巴氏滅菌法溫度控制或高溫瞬間滅菌溫度與時間的控制； 采用真空冷凍干燥技術對高活性抗幽門螺桿菌免疫乳進行冷凍干燥物理性狀的質量控制； (2)物理化學指標控制； (3)衛生細菌學指標控制； .5、編制抗-HpIgG免疫乳的企業標準，以規范該產品的生產工藝及質量控制。
【文檔編號】A01K67/02GK103550766SQ201310550191
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月8日 優先權日:2013年11月8日
【發明者】鄢維倫, 張德剛, 余家奇 申請人:貴州省遵義市眾智生物研究所