一種美國(guó)紅楓的組織培養(yǎng)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及植物的組織培養(yǎng)方法，具體說(shuō)是一種美國(guó)紅楓的組織培養(yǎng)方法，其包括選用美國(guó)紅楓帶腋芽的有效莖段作為外植體，先對(duì)有效莖段進(jìn)行消毒預(yù)處理；然后在超凈工作臺(tái)上把外植體接種到腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，獲得無(wú)菌苗；將上述無(wú)菌苗接種到芽增殖和伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；選擇增殖芽的生長(zhǎng)點(diǎn)按照培育進(jìn)度依次轉(zhuǎn)移到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基、愈傷組織增殖培養(yǎng)基、根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，獲得無(wú)毒植株；將無(wú)毒植株移栽種植。本發(fā)明采用獨(dú)特的外植體和培養(yǎng)基配方，大幅度提高了美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)的成功率和植株質(zhì)量，為美國(guó)紅楓的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供有力保證，且培養(yǎng)快速、經(jīng)濟(jì)。
【專利說(shuō)明】一種美國(guó)紅楓的組織培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物的組織培養(yǎng)方法，尤其涉及觀賞林木的組織培養(yǎng)方法，具體地說(shuō)是一種美國(guó)紅楓的組織培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]美國(guó)紅楓(Acerrubrum)又名紅花槭、北美紅楓，槭樹科槭樹屬。樹高12 —18米，其樹姿優(yōu)美，枝葉繁茂，葉型纖秀，葉色秀麗，秋天變色最早，主色鮮紅，副色橘黃，色艷如花，主要用于林園觀賞和庭院綠化，也是珍貴的家庭盆栽樹種。目前，美國(guó)紅楓一般采用種子繁殖、嫁接繁殖和扦插繁殖三種繁殖方式，但是這三種方式繁殖速度較慢，組織培養(yǎng)快繁是一種有效的繁殖方式，它不僅提高了紅楓的繁殖速率，同時(shí)對(duì)苗木的質(zhì)量也提供了有力保證，為園林綠化提供充足的種苗。
[0003]White早在1943年就發(fā)現(xiàn)植物生長(zhǎng)點(diǎn)附近的病毒濃度很低，有的甚至無(wú)病毒，如果利用組織培養(yǎng)方法，取一定大小的莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)進(jìn)行培養(yǎng)，再生的植株有可能不攜帶任何病毒，從而可以獲得脫病毒苗，再用脫毒苗進(jìn)行繁殖，則種植的作物就不會(huì)或極少發(fā)生病毒感染，可以大幅度提高作物的觀賞價(jià)值和使用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對(duì)上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種美國(guó)紅楓的組織培養(yǎng)方法，實(shí)現(xiàn)美國(guó)紅楓的人工快速經(jīng)濟(jì)繁育，提高美國(guó)紅楓的觀賞價(jià)值，推進(jìn)美國(guó)紅楓的進(jìn)一步產(chǎn)業(yè)化。
[0005]本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為:一種美國(guó)紅楓的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟:
[0006]a:選用美國(guó)紅楓帶腋芽的有效莖段作為外植體，先對(duì)有效莖段進(jìn)行消毒預(yù)處理；
[0007]b:然后在超凈工作臺(tái)上把外植體接種到腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，獲得無(wú)菌苗；
[0008]c:將上述無(wú)菌苗接種到芽增殖和伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；
[0009]d:選擇增殖芽的生長(zhǎng)點(diǎn)按照培育進(jìn)度依次轉(zhuǎn)移到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基、愈傷組織增殖培養(yǎng)基、根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，獲得無(wú)毒植株；
[0010]e:將無(wú)毒植株移栽種植。
[0011]作為優(yōu)選，在移栽種植前，將無(wú)毒植株進(jìn)行煉苗鍛煉。
[0012]作為優(yōu)選，外植體接種到腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)基中進(jìn)行暗處理2d，然后轉(zhuǎn)入1600-2000Lux光強(qiáng)下培養(yǎng)，光照12_14h/d，溫度22_26°C，培養(yǎng)20天，獲得無(wú)菌苗。
[0013]作為優(yōu)選，步驟(C)中培養(yǎng)條件為:溫度24_26°C，濕度60%_70%，光照為12_14h/d，光強(qiáng)為1600-2000Lux的熒光燈下培養(yǎng)。
[0014]作為優(yōu)選，所述煉苗鍛煉采用閉瓶煉苗6d后進(jìn)行開瓶煉苗3d的方式進(jìn)行。
[0015]作為優(yōu)選，所述美國(guó)紅楓腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)基組合為MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)。[0016]作為優(yōu)選，所述芽增殖及伸長(zhǎng)培養(yǎng)基組合為l/2MS+6-BA(l.0mg/L)+IAA(0.2mg/L) +GA3(1.0mg/L)
[0017]作為優(yōu)選，所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基組合為WAP、6-BA (0.6mg/L)、IAA (0.3mg/L)，愈傷組織增殖培養(yǎng)基組合為WAP、6-BA(0.6mg/L)、IAA(1.0mg/L)，根誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為1/2MS.6-BA (0.5mg/L)、NAA (2.0mg/L)、活性炭(1.0mg/L)。
[0018]從以上技術(shù)方案可知，本發(fā)明采用獨(dú)特的外植體和培養(yǎng)基配方，大幅度提高了美國(guó)紅楓組織培養(yǎng)的成功率和植株質(zhì)量，為美國(guó)紅楓的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供有力保證，且培養(yǎng)快速、經(jīng)濟(jì)。
【具體實(shí)施方式】
[0019]下面詳細(xì)介紹本發(fā)明的培養(yǎng)方法，首先選用美國(guó)紅楓帶腋芽的有效莖段作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)，先對(duì)有效莖段進(jìn)行消毒預(yù)處理在超凈工作臺(tái)上把外植體接種到最佳的腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)基中，暗處理2d，然后轉(zhuǎn)入1600-2000LUX光強(qiáng)下培養(yǎng)，光照12_14h/d，溫度22-26°C，培養(yǎng)20天，獲得無(wú)菌苗，然后把無(wú)菌苗接種到芽增殖和伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中，條件:溫度24-26°C，濕度60%-70%，光照為12_14h/d，光強(qiáng)為1600_2000Lux的熒光燈下培養(yǎng)，最后選擇增殖芽的生長(zhǎng)點(diǎn)按照培育進(jìn)度依次轉(zhuǎn)移到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基、愈傷組織增殖培養(yǎng)基、根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)完成后獲得無(wú)毒植株，然后再將無(wú)毒苗移栽種植，為了提高移栽成活率，采用閉瓶煉苗6d后開瓶煉苗3d的方式進(jìn)行移栽前煉苗鍛煉。
[0020]在實(shí)施過(guò)程中，美國(guó)紅楓腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)最佳培養(yǎng)基組合為MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)，芽增殖及伸長(zhǎng)培養(yǎng)基組合為 1/2MS+6-BA (1.0mg/L)+IAA (0.2mg/L) +GA3 (1.0mg/L)，所述愈傷組織誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基組合為WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (0.3mg/L)，愈傷組織增殖培養(yǎng)最佳培養(yǎng)基組合為WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (1.0mg/L)，根誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基配方為 l/2MS+6-BA(0.5mg/L) +NAA (2.0mg/L) + 活性炭(1.0mg/L)。
`[0021]實(shí)施例
[0022]取美國(guó)紅楓帶腋芽的有效莖尖1.0-1.5cm作為組織培養(yǎng)外植體，在超凈工作臺(tái)上將外植體放入到70%酒精中消毒20-30S ;然后轉(zhuǎn)入2%的次氯酸鈉溶液中消毒5-10min，再用無(wú)菌水沖洗5次左右，處理完后把外植體接種到MS+6 - BA (0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)培養(yǎng)基中培養(yǎng)15d左右，獲得無(wú)菌苗，再將無(wú)菌苗接種到l/2MS+6-BA(l.0mg/L)+IAA(0.2mg/L)+GA3(1.0mg/L)培養(yǎng)基中20天后，獲得大量增殖的芽，最后在超凈工作臺(tái)上挑取這些芽的生長(zhǎng)點(diǎn)依次接種到WAP+6-BA (0.6mg/L) +IAA (0.3mg/L)培養(yǎng)基培養(yǎng)10天左右、WAP+6-BA(0.6mg/L)+IAA(l.0mg/L)培養(yǎng)基培養(yǎng) 30 天左右和 1/2MS+6-BA(0.5mg/L)+NAA(2.0mg/L) +活性炭(1.0mg/L)培養(yǎng)基中培養(yǎng)四周左右中培養(yǎng)，從而獲得組織培養(yǎng)無(wú)毒植株；組培苗如果直接移栽，成活率不高，為了提高成活率，先要對(duì)組培苗進(jìn)行移栽前煉苗鍛煉，一般采用閉瓶煉苗6d+開瓶煉苗3d后，再移栽到大棚中去。
[0023]上述實(shí)施方式僅供說(shuō)明本發(fā)明之用，而并非是對(duì)本發(fā)明的限制，有關(guān)【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的情況下，還可以作出各種變化和變型，因此所有等同的技術(shù)方案也應(yīng)屬于本發(fā)明的范疇。
【權(quán)利要求】
1.一種美國(guó)紅楓的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟: a:選用美國(guó)紅楓帶腋芽的有效莖段作為外植體，先對(duì)有效莖段進(jìn)行消毒預(yù)處理； b:然后在超凈工作臺(tái)上把外植體接種到腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，獲得無(wú)菌苗； c:將上述無(wú)菌苗接種到芽增殖和伸長(zhǎng)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)； d:選擇增殖芽的生長(zhǎng)點(diǎn)按照培育進(jìn)度依次轉(zhuǎn)移到愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基、愈傷組織增殖培養(yǎng)基、根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，獲得無(wú)毒植株；e:將無(wú)毒植株移栽種植。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:在移栽種植前，將無(wú)毒植株進(jìn)行煉苗鍛煉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:外植體接種到腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)基中進(jìn)行暗處理2d，然后轉(zhuǎn)入1600-2000Lux光強(qiáng)下培養(yǎng)，光照12_14h/d，溫度22-26 °C，培養(yǎng)20天，獲得無(wú)菌苗。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(c)中培養(yǎng)條件為:溫度24-26°C，濕度60%-70%，光照為12-14h/d，光強(qiáng)為1600-2000Lux的熒光燈下培養(yǎng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于:所述煉苗鍛煉采用閉瓶煉苗6d后進(jìn)行開瓶煉苗3d的方式進(jìn)行。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述美國(guó)紅楓腋芽發(fā)育啟動(dòng)培養(yǎng)基組合為 MS+6 — BA(0.6mg/L)+IAA(0.4mg/L)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述芽增殖及伸長(zhǎng)培養(yǎng)基組合為1/2MS+6-BA(1.0mg/L)+IAA(0.2mg/L)+GA3(1.0mg/L)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基組合為WAP、6-BA(0.6mg/L)、IAA (0.3mg/L)，愈傷組織增殖培養(yǎng)基組合為 WAP、6_BA(0.6mg/L)、IAA (1.0mg/L)，根誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為 1/2MS、6_BA (0.5mg/L)、NAA (2.0mg/L)、活性炭(1.0mg/L)。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103828719SQ201410090748
【公開日】2014年6月4日 申請(qǐng)日期:2014年3月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月13日
【發(fā)明者】李在根 申請(qǐng)人:湖南天福林業(yè)科技有限公司