一種甜玉米單倍體化學浸種加倍方法
【專利摘要】本發明涉及農業【技術領域】，具體涉及一種甜玉米單倍體化學浸種加倍方法。該方法包含如下具體步驟：首先對甜玉米種子表面消毒，再將消毒后的種子放入含有秋水仙素的營養液中進行加倍處理，然后播種移栽；所述的加倍處理的條件為：含質量分數為0.02％秋水仙素的營養液32℃下加倍處理30h、含質量分數為0.02％秋水仙素的營養液32℃下加倍處理24h或含質量分數為0.06％秋水仙素的營養液32℃下加倍處理30h。該方法機械損傷少、操作方便、植物藥害率低、對人體的毒害作用小，平均加倍率為11.82％～14.29％，高于傳統加倍方法和自然加倍方法的6～7倍，便于規模化應用。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發明涉及農業【技術領域】，具體涉及一種甜玉米單倍體化學浸種加倍方法。 一種甜玉米單倍體化學浸種加倍方法

【背景技術】
[0002] 甜玉米籽粒含有豐富和均衡的營養成分，具有較好的口感，已經成為不可或缺的 營養和保健食品之一。單倍體技術因其育種周期短、效率高、自交系純度高，是玉米育種的 首選方法。
[0003] 目前，單倍體育種技術在普通玉米中應用非常廣泛，但甜玉米的相關研究卻報道 較少。限制單倍體育種主要障礙之一是單倍體的加倍率偏低，影響因素非常多，除了加倍材 料的遺傳背景外，溫度、濕度、時間、時機、試劑的濃度與類型等均顯著影響加倍率。相關研 究在普通玉米中已經比較全面和深入，但針對甜玉米的研究非常缺乏。甜玉米因抗性較弱， 加倍過程因藥物毒性植株極易死亡；同時其單倍體幼苗弱小、抗逆性差，對加倍過程的機械 損傷非常敏感，因此，選擇機械損傷少、操作方便的加倍方法，對甜玉米的單倍體育種應用 非常關鍵。


【發明內容】

[0004] 本發明的目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種甜玉米單倍體化學浸種 加倍方法。
[0005] 本發明的目的通過下述技術方案實現：
[0006] -種甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，包含如下具體步驟：
[0007] (1)種子消毒
[0008] 甜玉米單倍體種子先用乙醇消毒，再用次氯酸鈉溶液處理，之后再用無菌水沖 洗；
[0009] (2)種子加倍
[0010] 將步驟（1)中消毒過的甜玉米單倍體種子放入含有秋水仙素的營養液中進行加 倍處理，加入營養液的量以恰好浸沒種子為準；之后，再用清水沖洗；
[0011] ⑶播種
[0012] 將步驟（2)處理過的甜玉米種子播種到育苗盤中，常溫下育苗；
[0013] ⑷移栽
[0014] 待玉米苗長至3?4片葉后，移栽至大田；
[0015] 步驟⑴中所述的甜玉米優選為甜玉米"粵甜13號"；
[0016] 步驟⑴中所述的乙醇的體積分數優選為75%，消毒時間為lmin?2min ;
[0017] 步驟（1)中所述的體積分數為75%的乙醇消毒的時間優選為lmin ;
[0018] 步驟⑴中所述的次氯酸鈉溶液的體積分數為15%，處理時間為15min?20min ;
[0019] 步驟（1)中所述的體積分數為15%的次氯酸鈉溶液處理的時間優選為15min ;
[0020] 步驟⑴中所述的無菌水的沖洗次數為3?5次；
[0021] 步驟⑴中所述的無菌水的沖洗次數優選為3次；
[0022] 步驟（2)所述的加倍處理的條件為：含質量分數為0. 02%秋水仙素的營養液32°C 下加倍處理30h、含質量分數為0. 02%秋水仙素的營養液32°C下加倍處理24h或含質量分 數為0. 06%秋水仙素的營養液32°C下加倍處理30h ;
[0023] 步驟（2)所述的加倍處理的條件優選為含質量分數為0. 02%秋水仙素的營養液 32°C下加倍處理30h ;
[0024] 步驟（2)中所述的營養液包含MS大量元素、MS微量元素和20g/L蔗糖；
[0025] 步驟（2)中所述的清水沖洗的時間為30min?40min ;
[0026] 步驟⑵中所述的清水沖洗的時間優選為30min ;
[0027] 步驟（3)中所述的常溫為25°C?28°C ;
[0028] 本發明相對于現有技術具有如下的優點及效果：
[0029] (1)本發明提供的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法在浸種加倍前不經過清水浸 泡，而是經過種子消毒后直接采用秋水仙素加倍，不僅極大地節約了種子處理時間，更重要 的是可有效降低甜玉米單倍體種子的藥害率，提高加倍效率；
[0030] (2)本發明提供的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法秋水仙素使用濃度低，在減少 化學藥品消耗、有效地降低實驗成本的同時，可有效地降低甜玉米苗的藥害率，以及減輕播 種時對人體的毒害作用；
[0031] (3)本發明提供的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法平均加倍率為11. 82 %? 14. 29%，加倍率明顯高于改良前的傳統化學浸種加倍方法，便于規模化應用。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0032] 圖1是秋水仙素濃度對甜玉米單倍體植株的散粉率、結實率和藥害率影響的結果 分析圖。
[0033] 圖2是加倍時間對甜玉米單倍體植株的散粉率、結實率和藥害率影響的結果分析 圖。
[0034] 圖3是加倍溫度對甜玉米單倍體植株的散粉率、結實率和藥害率影響的結果分析 圖。

【具體實施方式】
[0035] 下面結合實施例和附圖對本發明作進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限 于此。
[0036] 實施例和對比實施例數據計算方式：
[0037] 散粉率（％ )=散粉株數/存活雙單倍體數X 100%
[0038] 藥害率（％ )=藥害株數/出苗數X 100%
[0039] 結實率（％)=結實株數/存活雙單倍體數X 100%
[0040] 實施例中所用甜玉米品種"粵甜13號"由廣東省農業科學院作物研究所玉米室提 供，秋水仙素購于廣州市叢源儀器有限公司，表1為營養液詳細配方。
[0041] 表1營養液配方
[0042]

【權利要求】
1. 一種甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于包含如下具體步驟： (1) 種子消毒 甜玉米單倍體種子先用乙醇消毒，再用次氯酸鈉溶液處理，之后再用無菌水沖洗； (2) 種子加倍 將步驟（1)中消毒過的甜玉米單倍體種子放入含有秋水仙素的營養液中進行加倍處 理，加入營養液的量以恰好浸沒種子為準；之后，再用清水沖洗； (3) 播種 將步驟（2)處理過的甜玉米種子播種到育苗盤中，常溫下育苗； (4) 移栽 待玉米苗長至3?4片葉后，移栽至大田。
2. 根據權利要求1所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的甜玉米為甜玉米"粵甜13號"。
3. 根據權利要求1所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（2)所述的加倍處理的條件為：含質量分數為0. 02%秋水仙素的營養液32°C下加 倍處理30h、含質量分數為0. 02%秋水仙素的營養液32°C下加倍處理24h或含質量分數為 0. 06 %秋水仙素的營養液32°C下加倍處理30h。
4. 根據權利要求3所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（2)所述的加倍處理的條件為含質量分數為0.02%秋水仙素的營養液32°C下加 倍處理30h。
5. 根據權利要求1所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的乙醇的體積分數為75%，消毒時間為lmin?2min。
6. 根據權利要求5所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的體積分數為75%的乙醇消毒的時間優選為lmin。
7. 根據權利要求1所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的次氯酸鈉溶液的體積分數為15%，處理時間為15min?20min。
8. 根據權利要求7所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的體積分數為15%的次氯酸鈉溶液處理的時間為15min。
9. 根據權利要求1所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（1)中所述的無菌水的沖洗次數為3?5 ; 步驟（2)中所述的清水沖洗的時間為30min?40min。
10. 根據權利要求1所述的甜玉米單倍體化學浸種加倍方法，其特征在于： 步驟（2)中所述的營養液包含MS大量元素、MS微量元素和20g/L鹿糖。
【文檔編號】A01H1/08GK104082132SQ201410290716
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年6月24日 優先權日:2014年6月24日
【發明者】胡建廣, 李高科, 陳新振, 李春艷 申請人:廣東省農業科學院作物研究所