本發(fā)明屬于植物栽培領(lǐng)域，具體涉及一種用于鐵皮石斛種植的免疫誘抗劑。

背景技術(shù)：

鐵皮石斛，又名黑節(jié)草，為蘭科石斛屬多年生草本植物，是國家二級保護植物，也是一種歷史悠久的名貴中藥材，素有“中華仙草”和“藥中黃金”之美稱，列“中華九大仙草”之首，被國際藥用植物界稱為“藥界大熊貓”。鐵皮石斛含有多糖、生物堿、菲類、聯(lián)芐類、糖苷類、氨基酸等化學成分。現(xiàn)代藥理研究表明，鐵皮石斛具有增強免疫力，抗衰老，抗癌，抗疲勞，擴張血管的作用。據(jù)《神農(nóng)本草經(jīng)》記載，鐵皮石斛還具有滋陰清熱、生津益胃、潤肺止咳、潤喉明目、延年益壽之功效。2010版《中華人民共和國藥典》將鐵皮石斛作為新增品種從石斛中單列出來，具有提高免疫、抗衰老、防治腫瘤和心血管疾病以及改善睡眠、防治白內(nèi)障等疾患等功能。

鐵皮石斛在我國主要分布在浙江、廣西、云南、貴州等地區(qū)。然而由于人類生活范圍不斷的擴大，加上長期的過渡采摘，現(xiàn)野生鐵皮石斛資源已瀕臨枯竭，難以滿足市場需求，因此需要大量人工栽培以滿足不斷擴大的市場需要。野生鐵皮石斛生長在溫暖、濕潤、少光照、適當透風、根系透氣好、排水好的環(huán)境中叢生，需要附著樹木，崖縫進行爬生或吊掛生長，鐵皮石斛的生長對環(huán)境的要求相當苛刻。許多科研人員近年來致力于探索鐵皮石斛的組培和人工栽培技術(shù)，但是尚存在鐵皮石斛農(nóng)藥殘留嚴重超標、生長速度慢、病蟲害嚴重，產(chǎn)量不高，有效成分含量低等主要問題。因此，防治鐵皮石斛種植中的病蟲害、提高鐵皮石斛的品質(zhì)和產(chǎn)量，提高有效成分的含量已成為本領(lǐng)域技術(shù)人員有待解決的關(guān)鍵問題。CN 104086324 A公開了一種利用生物配伍殺滅鐵皮石斛病蟲害的有機肥料及其制作和使用方法，所述肥料包括按重量百分比6％～12％野生油茶餅、12％～20％野生胡椒果、10％～15％野生山枝椒果、10％～15％牛骨粉、6％～15％蠶沙、12％～18％螃蟹、3％～10％礪貝殼、2％～8％黃豆根球菌、1％～5％魚粉、1％～3％鐵樹樁、2％～6％山核桃殼和3％～8％帶殼松子，該肥料原材料復雜，且不易搜集，恐怕無法實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。

大量研究結(jié)果表明，利用無毒無殘留的誘抗劑可誘使植物體內(nèi)產(chǎn)生抗病反應(yīng)，從而使植物獲得系統(tǒng)抗性免遭病害或減輕病害發(fā)生。因此，應(yīng)用免疫誘抗劑不失為一種控制鐵皮石斛病害的既安全而有效的方法。免疫誘抗劑主要通過激發(fā)植物自身的抗病性，使其產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，從而達到抑制病原菌目的。這種抗性具有廣譜、穩(wěn)定、持久等優(yōu)點，可以解決化學防治存在病原菌抗藥性、環(huán)境污染和對人畜副作用問題，實現(xiàn)無害化生產(chǎn)，已成為植物防病防治的新手段。因此，各種激發(fā)植物自身防御體系的抗病、抗蟲的免疫誘抗劑已成為研發(fā)的新熱點。

然而，迄今為止還沒有一種針對鐵皮石斛生長過程中出現(xiàn)的病害的免疫誘抗劑。因此，需要開發(fā)一種能夠提高鐵皮石斛的抗性的免疫誘抗劑。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為解決上述問題，本發(fā)明提供一種用于鐵皮石斛種植的免疫誘抗劑。該免疫誘抗劑提高了鐵皮石斛的吸收營養(yǎng)能力和光作用能力，使其成苗率顯著增大且能夠使鐵皮石斛快速生長，從而實現(xiàn)鐵皮石斛的危險生長期與病蟲害的盛發(fā)期錯開，同時提高了鐵皮石斛的抗病能力。

為此，本發(fā)明提供一種用于鐵皮石斛種植的免疫誘抗劑，所述免疫誘抗劑所述免疫誘抗劑包含10-20重量％的酵素溶液，其中所述酵素溶液通過包括以下步驟的方法進行制備：

(1)原料處理：用可食用或生長良好的水培蔬菜、處理可食用或生長良好的水培蔬菜的下腳料、萎蔫的、過成熟的水培蔬菜及其根中的一種或多種為原料，洗凈并切碎放入發(fā)酵罐中備用；

(2)發(fā)酵：向發(fā)酵罐中加水，然后加入酵素菌劑或者酵素菌劑混合物，密封后于室溫或者20-40℃的溫度下發(fā)酵5-20天，發(fā)酵完成后過濾即得所述酵素溶液，其中所述發(fā)酵罐中所加入的酵素菌劑或酵素菌劑混合物、原料與水之間的重量比為1:(20-100):(80-200)。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述酵素溶液中的干物質(zhì)的重量百分數(shù)為2-5％。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述免疫誘抗劑還包含氮肥、磷肥、鉀肥、中量元素肥、微量元素肥、植物生長調(diào)節(jié)劑、殼寡糖中的一種或多種。

優(yōu)選地，所述用于鐵皮石斛種植的免疫誘抗劑包含以下重量百分數(shù)的組分：

白糖或紅糖15-20％；酵素10-20％；氮肥10-25％；磷肥5-15％；鉀肥9-25％；中量元素肥1-15％；微量元素肥0.5-8％；植物生長調(diào)節(jié)劑0.1-7％；殼寡糖6％-18％，

其中所述組分的重量百分數(shù)均基于所述免疫誘抗劑的總重量計，且所述組分的重量百分數(shù)之和為100％。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述氮肥為硫酸銨、硝酸銨、磷酸銨、氨水、氯化銨、尿素中的一種或多種。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述磷肥為磷酸、磷酸銨、鈣鎂磷肥、過磷酸鈣、磷酸二銨、磷酸一銨、聚磷酸銨中的一種或多種。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述鉀肥為磷酸鉀、氯化鉀、硝酸鉀中的一種或多種。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述中量元素肥為含硅、鈣、鎂、硫中的一種或多種的肥料。

更優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述中量元素肥為硅酸鈉、石膏、硫酸鎂中的一種或多種。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述微量元素肥為含鐵、錳、硼、鋅、鉬中的一種或多種的肥料，如硫酸亞鐵、硫酸錳、硼砂、硫酸鋅、鉬酸銨等。

更優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述微量元素肥為硫酸亞鐵、硫酸錳和鉬酸銨。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述殼寡糖的重均分子量為2000-3000。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述植物生長調(diào)節(jié)劑為胺鮮酯(DA-6)，氯吡脲，復硝酚鈉，生長素、赤霉素、乙烯、細胞分裂素、脫落酸、油菜素內(nèi)酯、水楊酸、茉莉酸、吲哚丁酸、萘乙酸、多效唑和多胺中的一種或多種。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述白糖或紅糖、酵素與殼寡糖之間的重量比為(15-20)：(10-20)：(6-18)。

優(yōu)選地，在本發(fā)明免疫誘抗劑中，所述酵素與微量元素肥之間的重量比為(2-10)：1。

本發(fā)明免疫誘抗劑可以以成品制劑的形式提供，即免疫誘抗劑中的各組分已混合，也可以以單劑的形式提供，待使用時再混合。

本發(fā)明免疫誘抗劑可以采用諸如噴霧、灌根、浸根、撒施、溝施、穴施等方式進行施用。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點和效果：

(1)本發(fā)明免疫誘抗劑中各組分混合比例合理，能夠有效地在鐵皮石斛種植中提高鐵皮石斛的抗病能力，同時減少了種植過程中的施藥次數(shù)和施藥量，所以降低了鐵皮石斛中的農(nóng)藥殘留量；

(2)本發(fā)明免疫誘抗劑中的白糖或紅糖含有豐富的礦物質(zhì)、維他命、氨基葡萄糖、果糖、葉酸、核黃素及胡蘿卜素、纖維素等，能提供鐵皮石斛豐富全面的營養(yǎng)，同時又因含有其他組分，使本發(fā)明誘抗劑集營養(yǎng)和抗病功能為一體，滿足了鐵皮石斛種植中的各營養(yǎng)元素需求，通過灌根、撒施等方式施用，易被鐵皮石斛根部吸收，促進根部發(fā)育，使鐵皮石斛成活率和吸收營養(yǎng)能力提高，加快生長速度，提高鐵皮石斛產(chǎn)量；

(3)本發(fā)明免疫誘抗劑不污染環(huán)境，不破壞土壤結(jié)構(gòu)，可大面積應(yīng)用于鐵皮石斛種植中，具有環(huán)保、健康和低成本的優(yōu)點。

具體實施方式

為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點更加簡潔明了，本發(fā)明將用以下具體實施例進行闡明，但本發(fā)明絕非僅限于這些實施例。以下實施例僅為本發(fā)明較優(yōu)選的實施例，且僅用于闡述本發(fā)明，不能理解為對本發(fā)明的范圍的限制。應(yīng)當指出的是，凡在本發(fā)明的實質(zhì)和原則之內(nèi)所做的任何修改、等同替換和改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明專利的保護范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準。

制備實施例

酵素溶液的制備

收集水培青菜的過成熟的菜葉50kg，洗凈洗凈并切碎放入發(fā)酵罐備用，然后向發(fā)酵罐中加入150kg水，然后加入500g酵母菌和500g枯草桿菌混合物。在密封后于常溫下發(fā)酵15天(當時氣溫為28-36℃)，發(fā)酵完成后過濾即得酵素溶液，經(jīng)檢測所得的酵素溶液中干物質(zhì)的重量百分數(shù)為4％。

本發(fā)明免疫誘抗劑的制備

制備實施例1

將10kg白糖、6.5kg所得的酵素溶液、12kg硝酸銨、5kg磷酸、15kg氯化鉀、4kg中量元素肥硅酸鈉、2kg微量元素肥硫酸亞鐵、1kg植物生長調(diào)節(jié)劑多效唑放入攪拌機中攪拌10分鐘，待攪拌均勻后，出料即得免疫誘抗劑。

制備實施例2

將10kg白糖、6.5kg所得的酵素溶液、12kg硝酸銨、5kg磷酸、15kg氯化鉀、4kg中量元素肥硅酸鈉、2kg微量元素肥硫酸亞鐵、6kg殼寡糖、1kg植物生長調(diào)節(jié)劑多效唑放入攪拌機中攪拌10分鐘，待攪拌均勻后，出料即得免疫誘抗劑。

制備實施例3

將10kg白糖、10kg所得的酵素溶液、12kg硝酸銨、5kg磷酸、15kg氯化鉀、4kg中量元素肥硅酸鈉、2kg微量元素肥硫酸亞鐵、6kg殼寡糖、1kg植物生長調(diào)節(jié)劑多效唑放入攪拌機中攪拌10分鐘，待攪拌均勻后，出料即得免疫誘抗劑。

制備實施例4

將11kg白糖、13kg所得的酵素溶液、12kg硝酸銨、5kg磷酸、15kg氯化鉀、1kg硅酸鈉、1kg石膏、1kg硫酸鎂、0.6kg硫酸亞鐵、0.6kg硫酸錳、0.6kg鉬酸銨、6kg殼寡糖、1kg植物生長調(diào)節(jié)劑多效唑放入攪拌機中攪拌10分鐘，待攪拌均勻后，出料即得免疫誘抗劑。

制備實施例5

將10kg白糖、13kg所得的酵素溶液、12kg硝酸銨、5kg磷酸、15kg氯化鉀、4kg中量元素肥硅酸鈉、2kg微量元素肥硫酸亞鐵、6kg殼寡糖、1kg植物生長調(diào)節(jié)劑多效唑放入攪拌機中攪拌10分鐘，待攪拌均勻后，出料即得免疫誘抗劑。

對比實施例

將10kg白糖、12kg硝酸銨、5kg磷酸、15kg氯化鉀、4kg中量元素肥硅酸鈉、2kg微量元素肥硫酸亞鐵、6kg殼寡糖、1kg植物生長調(diào)節(jié)劑多效唑放入攪拌機中攪拌10分鐘，待攪拌均勻后，出料即得產(chǎn)物。

應(yīng)用實施例

實驗設(shè)6個處理，采取隨機區(qū)組排列，三次重復。每個實驗區(qū)50平方米，每個實驗區(qū)之間和區(qū)組間設(shè)田埂，所述實驗地設(shè)2m的保護行。實驗各區(qū)按方案要求施加制備實施例1-5制備的免疫誘抗劑和對比實施例制備的產(chǎn)物，其他管理措施相同。施加方式：全部底施于鐵皮石斛根部附近。

將制備實施例1-5所獲得的免疫誘抗劑和對比實施例所獲得的產(chǎn)物分別加水稀釋到100O升，然后按照下述處理底施于相應(yīng)實驗區(qū)的鐵皮石斛根部附近。

處理1：每次施入由制備實施例1所獲得的免疫誘抗劑制備的免疫誘抗劑溶液50升；

處理2：每次施入由制備實施例2所獲得的免疫誘抗劑制備的免疫誘抗劑溶液50升；

處理3：每次施入由制備實施例3所獲得的免疫誘抗劑制備的免疫誘抗劑溶液50升；

處理4：每次施入由制備實施例4所獲得的免疫誘抗劑制備的免疫誘抗劑溶液50升；

處理5：每次施入由制備實施例5所獲得的免疫誘抗劑制備的免疫誘抗劑溶液50升；

處理6：每次施入由對比實施例所獲得的產(chǎn)物制備的溶液50升。

在石斛試管苗移栽的最佳時間4月份，選取組織培養(yǎng)的莖高約4-5㎝健壯石斛試管苗，進行馴化煉苗，然后，以叢栽方式移栽至酸性砂巖基質(zhì)中于陰涼濕潤透風的環(huán)境中生長，隨后，每20天按照上述處理處理鐵皮石斛一次。一年后不同處理的鐵皮石斛的狀況如下表1所示。

表1不同處理對鐵皮石斛的影響

由上表可知，處理1-5的鐵皮石斛生長狀況良好，且移栽成活率高，植株一年后顯著增重增高，發(fā)病率低，而處理6的鐵皮石斛因根部因易滋生病害而導致爛根且莖葉部出現(xiàn)多處病斑，成活率較低，植株增重增高不明顯，發(fā)病率高。另外，處理1-5的鐵皮石斛栽后葉色嫩綠、葉片寬厚伸展，莖桿粗壯，根系發(fā)達，生長勢強；處理6的鐵皮石斛栽后葉色黃綠、葉面窄，莖桿細弱，生長勢弱。

根據(jù)上述說明書的揭示和教導，本發(fā)明所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員還可以對上述實施例進行變更和修改。因此，本發(fā)明并不局限于上面揭示和描述的具體實施例，對發(fā)明的一些修改和變更也應(yīng)當落入本發(fā)明的權(quán)利要求的保護范圍內(nèi)。此外，盡管本說明書中使用了一些特定的術(shù)語，但這些術(shù)語只是為了方便說明，并不對本發(fā)明構(gòu)成任何限制。