本發(fā)明涉及一種鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,特別是一種生長狀態(tài)好、移栽率高的鐵皮石斛的培養(yǎng)方法。
背景技術(shù):
:鐵皮石斛別稱鐵皮蘭、吊蘭、云南鐵皮、鐵皮吊蘭,是蘭科石斛屬多年生草本植物,鐵皮石斛是石斛類藥材的上品,素有“中華仙草-藥中黃金”之美稱,以莖入藥,含有多糖、石斛堿、生物堿等有效成分,具有滋陰清熱、生津益胃、潤喉明目等功效,在抗腫瘤、提高人體免疫力、治療胃腸道疾病、抗衰老、抗氧化、抗血小板聚集、降低血糖、治療白內(nèi)障等方面均有良好療效。鐵皮石斛大多生長在炎熱潮濕的熱帶、亞熱帶的巖石縫隙中,繁殖率很低,自然野生狀態(tài)下繁殖率只有10%-17%;果實為蒴果,種子小而多,種內(nèi)胚發(fā)育不全或不成熟,胚胎少胚乳,自然結(jié)實率低于5%,在自然條件下須與蘭菌共生才能萌發(fā),因此無法在大田或苗床上播種,很難生產(chǎn)足夠的實生苗用于栽培。鐵皮石斛對生長環(huán)境要求苛刻,成苗困難,采用傳統(tǒng)的分株、扦插等人工繁殖方法進行繁殖,增殖速度非常低,同時,還存在組培苗質(zhì)量難以保證等問題,極大地制約了鐵皮石斛生產(chǎn)規(guī)模的擴大。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的,是提供一種鐵皮石的培養(yǎng)方法,本發(fā)明方法培養(yǎng)鐵皮石斛時,組培苗生長好,組培苗質(zhì)量易保證,移栽成活率高;且生長值和增殖率高,且培養(yǎng)基中不含激素。本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的。一種鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,包括幼苗繁育、幼苗移栽、水分與濕度管理、除草追肥和病蟲害防治。前述的鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,具體包括以下步驟:(1)幼苗繁育:選取鐵皮石斛花芽或葉芽,放入培養(yǎng)基中,在23-25℃、光照強度為160-180lx下進行無菌繁殖培養(yǎng),幼苗生長到1-2cm,分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),每個培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)30-45株幼苗;(2)幼苗的移栽:移栽時間為4-6月,培養(yǎng)瓶中的幼苗生長至5~8cm時取出,先用清水洗凈幼苗根部的培養(yǎng)基,再用0.3-0.5%的高錳酸鉀稀釋液浸根消毒,將基質(zhì)均勻填到32穴穴盤中,放置于苗床上,澆水,選用幼苗3~5株組成一叢移植到一穴盤中,并將基質(zhì)覆蓋住根系,使根系與基質(zhì)接觸;(3)水分與濕度管理:對剛移栽后的幼苗進行噴霧澆水,水的pH值控制在5.5-7.0,控制基質(zhì)的含水量為60~70%,以手抓基質(zhì)有濕感但不滴水為宜,移栽后5-8天內(nèi),大棚內(nèi)的空氣濕度保持在85-95%,移栽10天后,大棚內(nèi)的空氣濕度保持在70~80%;(4)除草追肥:定期對栽培基地進行除草打苔處理,組培幼苗移栽后15天開始噴施葉面肥,每隔5-8天噴施一次,成活后每10-15天噴施一次葉面肥,噴施后隔天方可噴霧澆水;(5)病蟲害防治:每月用波爾多液噴施進行葉面防治,防蟲采用防蟲網(wǎng),兩年后即可采收。前述的鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,步驟(1)幼苗繁育中,所述的培養(yǎng)基主要由按重量份計算的檸檬酸1-10份、蛋白胨10-20份、馬鈴薯50-60份、香蕉50-60份、瓊脂20-30份、麥冬5-15份、五味子10-20份、紅花1-10份和赤芍1-10份按下述方法制備:取麥冬、五味子、紅花和赤芍,粉碎成細(xì)顆粒后,加8-12倍量水煎煮2-3h,收集煎煮液,得A品;將檸檬酸和蛋白胨在室溫下加入A品中,攪拌至溶解完全,得B品;將馬鈴薯加水煮熟后,絞碎成馬鈴薯泥,得C品;B品中加入C品,攪拌均勻,得D品;香蕉攪碎后加入D品中,攪拌均勻,得E品;瓊脂在室溫下加3-5倍量水,攪拌至完全溶解后,得F品;F品加入E品中,混勻,得G品;G品裝于組培瓶中,高壓蒸汽滅菌20-30分鐘,冷卻凝固后即得。前述的鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,所述培養(yǎng)基主要由按重量份計算的檸檬酸5份、蛋白胨15份、馬鈴薯55份、香蕉55份、瓊脂25份、麥冬10份、五味子15份、紅花5份和赤芍5份按下述方法制備:取麥冬、五味子、紅花和赤芍,粉碎成細(xì)顆粒后,加10倍量水煎煮2.5h,收集煎煮液,得A品;將檸檬酸和蛋白胨在室溫下加入A品中,攪拌至溶解完全,得B品;將馬鈴薯加水煮熟后,絞碎成馬鈴薯泥,得C品;B品中加入C品,攪拌均勻,得D品;香蕉攪碎后加入D品中,攪拌均勻,得E品;瓊脂在室溫下加4倍量水,攪拌至完全溶解后,得F品;F品加入E品中,混勻,得G品;G品裝于組培瓶中,高壓蒸汽滅菌25分鐘,冷卻凝固后即得。前述的鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,步驟(2)幼苗的移栽中,所述基質(zhì)主要由按重量份計算的泥炭50-60份、樹皮渣30-40份、刨花顆粒30-50份和中藥渣30-40份混合而成。前述的鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,所述基質(zhì)主要由按重量份計算的泥炭55份、樹皮渣35份、刨花顆粒40份和中藥渣35份混合而成。前述的鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,所述中藥渣主要由按重量份計算的椿皮5-15份、琥珀10-20份、黃芩1-10份、杜仲1-10份和肉蓯蓉1-8份按下述方法制備:取椿皮、琥珀、黃芩、杜仲和肉蓯蓉,加8-12倍量水煎煮2-3h,煎煮液過濾,取濾渣,干燥后粉碎成細(xì)顆粒,即得。前述的鐵皮石斛的培養(yǎng)方法,所述中藥渣主要由按重量份計算的椿皮10份、琥珀15份、黃芩5份、杜仲5份和肉蓯蓉4份按下述方法制備:取椿皮、琥珀、黃芩、杜仲和肉蓯蓉,加10倍量水煎煮2.5h,煎煮液過濾,取濾渣,干燥后粉碎成細(xì)顆粒,即得。申請人對本發(fā)明進行了大量的實驗研究,部分實驗如下:實驗例1生長和增殖考察.1材料與方法1.1材料1.1.1鐵皮石斛T4品種(原種采自于云南廣南縣)組培苗。1.2方法1.2.1培養(yǎng)試驗2個處理組,本發(fā)明組和對比組,本發(fā)明組按實施例1進行培養(yǎng)鐵皮石斛。對照組中的培養(yǎng)基中不含麥冬、五味子、紅花和赤芍,其余同實施例1。統(tǒng)計組培苗的生長情況。1.2.2統(tǒng)計方法生長值(cm)=統(tǒng)計時平均株高-繼代時平均株高;增殖率(%)=(統(tǒng)計時苗總數(shù)一繼代時苗總數(shù))/初始苗總數(shù)×100%。3結(jié)果3.1對鐵皮石斛組培苗生長的影響經(jīng)50d培養(yǎng)后的生長情況見表1。表1對組培苗生長的影響培養(yǎng)基生長值/cm增殖率/%對比組1.45235.6本發(fā)明組1.83325.7由表可知,本發(fā)明組生長值和增值率均高于對比組。實施例2.壯苗生根及移栽成活率考察1材料與方法1.1材料1.1.1鐵皮石斛T4品種(原種采自于云南廣南縣)組培苗。1.2方法2個處理組,本發(fā)明組和對比組,本發(fā)明組按實施例1進行培養(yǎng)鐵皮石斛。對照組中的基質(zhì)中不含中藥渣,其余同實施例1。移栽后7、30d分別統(tǒng)計組培苗的成活率。2結(jié)果對鐵皮石斛組培苗移栽成活率、生長狀況的影響,結(jié)果見表2表2對鐵皮石斛組培苗移栽成活率、生長狀況的影響由表可知,本鋒芒培養(yǎng)基培養(yǎng)時,組培苗成活率高,生長狀況好,且均優(yōu)于對比培養(yǎng)基。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明方法培養(yǎng)鐵皮石斛時,組培苗生長好,組培苗質(zhì)量易保證,移栽成活率高;且生長值和增殖率高,且培養(yǎng)基中不含激素。具體實施方式實施例1。培養(yǎng)基配方:檸檬酸50kg、蛋白胨150kg、馬鈴薯550kg、香蕉550kg、瓊脂250kg、麥冬100kg、五味子150kg、紅花50kg和赤芍50kg。培養(yǎng)基制作:1.取麥冬、五味子、紅花和赤芍,粉碎成細(xì)顆粒后,加10倍量水煎煮2.5h,收集煎煮液,得A品;2.將檸檬酸和蛋白胨在室溫下加入A品中,攪拌至溶解完全,得B品;3.將馬鈴薯加水煮熟后,絞碎成馬鈴薯泥,得C品;4.B品中加入C品,攪拌均勻,得D品;5.香蕉攪碎后加入D品中,攪拌均勻,得E品;6.瓊脂在室溫下加4倍量水,攪拌至完全溶解后,得F品;7.F品加入E品中,混勻,得G品;8.G品裝于組培瓶中,高壓蒸汽滅菌25分鐘,冷卻凝固后即得。中藥渣制備:取椿皮100kg、琥珀150kg、黃芩50kg、杜仲50kg和肉蓯蓉40kg,加10倍量水煎煮2.5h,煎煮液過濾,取濾渣,干燥后粉碎成細(xì)顆粒,即得。基質(zhì)制備:取泥炭550kg、樹皮渣350kg、刨花顆粒400kg和中藥渣350kg混合而成。鐵皮石斛的培養(yǎng)方法:(1)幼苗繁育:選取鐵皮石斛花芽或葉芽,放入培養(yǎng)基中,在23-25℃、光照強度為160-180lx下進行無菌繁殖培養(yǎng),幼苗生長到1-2cm,分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),每個培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)40株幼苗;(2)幼苗的移栽:移栽時間為4-6月,培養(yǎng)瓶中的幼苗生長至5~8cm時取出,先用清水洗凈幼苗根部的培養(yǎng)基,再用0.3-0.5%的高錳酸鉀稀釋液浸根消毒,將基質(zhì)均勻填到32穴穴盤中,放置于苗床上,澆水,選用幼苗3~5株組成一叢移植到一穴盤中,并將基質(zhì)覆蓋住根系,使根系與基質(zhì)接觸;(3)水分與濕度管理:對剛移栽后的幼苗進行噴霧澆水,水的pH值控制在5.5-7.0,控制基質(zhì)的含水量為60~70%,以手抓基質(zhì)有濕感但不滴水為宜,移栽后5-8天內(nèi),大棚內(nèi)的空氣濕度保持在85-95%,移栽10天后,大棚內(nèi)的空氣濕度保持在70~80%;(4)除草追肥:定期對栽培基地進行除草打苔處理,組培幼苗移栽后15天開始噴施葉面肥,每隔7天噴施一次,成活后每12天噴施一次葉面肥,噴施后隔天方可噴霧澆水;(5)病蟲害防治:每月用波爾多液噴施進行葉面防治,防蟲采用防蟲網(wǎng),兩年后即可采收。實施例2。培養(yǎng)基配方:檸檬酸10kg、蛋白胨20kg、馬鈴薯60kg、香蕉60kg、瓊脂30kg、麥冬15kg、五味子20kg、紅花10kg和赤芍10kg。培養(yǎng)基制作:1.取麥冬、五味子、紅花和赤芍,粉碎成細(xì)顆粒后,加10倍量水煎煮2.5h,收集煎煮液,得A品;2.將檸檬酸和蛋白胨在室溫下加入A品中,攪拌至溶解完全,得B品;3.將馬鈴薯加水煮熟后,絞碎成馬鈴薯泥,得C品;4.B品中加入C品,攪拌均勻,得D品;5.香蕉攪碎后加入D品中,攪拌均勻,得E品;6.瓊脂在室溫下加4倍量水,攪拌至完全溶解后,得F品;7.F品加入E品中,混勻,得G品;8.G品裝于組培瓶中,高壓蒸汽滅菌25分鐘,冷卻凝固后即得。中藥渣制備:取椿皮100kg、琥珀150kg、黃芩50kg、杜仲50kg和肉蓯蓉40kg,加10倍量水煎煮2.5h,煎煮液過濾,取濾渣,干燥后粉碎成細(xì)顆粒,即得。基質(zhì)制備:取泥炭550kg、樹皮渣350kg、刨花顆粒400kg和中藥渣350kg混合而成。鐵皮石斛的培養(yǎng)方法:(1)幼苗繁育:選取鐵皮石斛花芽或葉芽,放入培養(yǎng)基中,在23-25℃、光照強度為160-180lx下進行無菌繁殖培養(yǎng),幼苗生長到1-2cm,分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),每個培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)40株幼苗;(2)幼苗的移栽:移栽時間為4-6月,培養(yǎng)瓶中的幼苗生長至5~8cm時取出,先用清水洗凈幼苗根部的培養(yǎng)基,再用0.3-0.5%的高錳酸鉀稀釋液浸根消毒,將基質(zhì)均勻填到32穴穴盤中,放置于苗床上,澆水,選用幼苗3~5株組成一叢移植到一穴盤中,并將基質(zhì)覆蓋住根系,使根系與基質(zhì)接觸;(3)水分與濕度管理:對剛移栽后的幼苗進行噴霧澆水,水的pH值控制在5.5-7.0,控制基質(zhì)的含水量為60~70%,以手抓基質(zhì)有濕感但不滴水為宜,移栽后5-8天內(nèi),大棚內(nèi)的空氣濕度保持在85-95%,移栽10天后,大棚內(nèi)的空氣濕度保持在70~80%;(4)除草追肥:定期對栽培基地進行除草打苔處理,組培幼苗移栽后15天開始噴施葉面肥,每隔7天噴施一次,成活后每12天噴施一次葉面肥,噴施后隔天方可噴霧澆水;(5)病蟲害防治:每月用波爾多液噴施進行葉面防治,防蟲采用防蟲網(wǎng),兩年后即可采收。實施例3。培養(yǎng)基配方:檸檬酸1kg、蛋白胨10kg、馬鈴薯50kg、香蕉50kg、瓊脂20kg、麥冬5kg、五味子10kg、紅花1kg和赤芍1kg。培養(yǎng)基制作:1.取麥冬、五味子、紅花和赤芍,粉碎成細(xì)顆粒后,加10倍量水煎煮2.5h,收集煎煮液,得A品;2.將檸檬酸和蛋白胨在室溫下加入A品中,攪拌至溶解完全,得B品;3.將馬鈴薯加水煮熟后,絞碎成馬鈴薯泥,得C品;4.B品中加入C品,攪拌均勻,得D品;5.香蕉攪碎后加入D品中,攪拌均勻,得E品;6.瓊脂在室溫下加4倍量水,攪拌至完全溶解后,得F品;7.F品加入E品中,混勻,得G品;8.G品裝于組培瓶中,高壓蒸汽滅菌25分鐘,冷卻凝固后即得。中藥渣制備:取椿皮100kg、琥珀150kg、黃芩50kg、杜仲50kg和肉蓯蓉40kg,加10倍量水煎煮2.5h,煎煮液過濾,取濾渣,干燥后粉碎成細(xì)顆粒,即得。基質(zhì)制備:取泥炭550kg、樹皮渣350kg、刨花顆粒400kg和中藥渣350kg混合而成。鐵皮石斛的培養(yǎng)方法:(1)幼苗繁育:選取鐵皮石斛花芽或葉芽,放入培養(yǎng)基中,在23-25℃、光照強度為160-180lx下進行無菌繁殖培養(yǎng),幼苗生長到1-2cm,分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),每個培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)40株幼苗;(2)幼苗的移栽:移栽時間為4-6月,培養(yǎng)瓶中的幼苗生長至5~8cm時取出,先用清水洗凈幼苗根部的培養(yǎng)基,再用0.3-0.5%的高錳酸鉀稀釋液浸根消毒,將基質(zhì)均勻填到32穴穴盤中,放置于苗床上,澆水,選用幼苗3~5株組成一叢移植到一穴盤中,并將基質(zhì)覆蓋住根系,使根系與基質(zhì)接觸;(3)水分與濕度管理:對剛移栽后的幼苗進行噴霧澆水,水的pH值控制在5.5-7.0,控制基質(zhì)的含水量為60~70%,以手抓基質(zhì)有濕感但不滴水為宜,移栽后5-8天內(nèi),大棚內(nèi)的空氣濕度保持在85-95%,移栽10天后,大棚內(nèi)的空氣濕度保持在70~80%;(4)除草追肥:定期對栽培基地進行除草打苔處理,組培幼苗移栽后15天開始噴施葉面肥,每隔7天噴施一次,成活后每12天噴施一次葉面肥,噴施后隔天方可噴霧澆水;(5)病蟲害防治:每月用波爾多液噴施進行葉面防治,防蟲采用防蟲網(wǎng),兩年后即可采收。當(dāng)前第1頁1 2 3