1.一種蘭科植物微量種子的滅菌及接種方法，將DNA純化柱、200μl，1ml槍頭、純凈水在121℃高溫滅菌20-30min備用，用對折過的硫酸紙收集適量開裂的蘭科種子，簡單的去除果莢碎片雜質(zhì)后，沿著折痕將種子倒入已滅菌的吸附柱中，然后把吸附柱放入收集管，并將吸附柱做好標(biāo)記，在無菌條件下，向吸附柱中加入600μl的75％乙醇，倒立純化柱1-2次，之后200-1000rpm離心20s，從加乙醇開始，直到完成離心，整個操作過程控制在28s-35s；倒棄收集管中廢液，向吸附柱中加入600μl無菌水，反復(fù)吸打無菌水使種子懸浮，充分漂洗種子，然后200-1000rpm離心20s，洗脫75％乙醇溶液；倒棄收集管中廢液，在無菌條件下向吸附柱中加入600μl的0.1-0.2％氯化汞溶液滅菌4-6min或2％次氯酸鈉溶液消毒6-10min，期間反復(fù)吸打溶液使種子懸浮充分滅菌，然后200-1000rp離心20s；倒棄收集管中廢液，再向吸附柱中加入600μl無菌水，反復(fù)吸打無菌水使種子懸浮，充分漂洗種子，然后200-1000rpm離心20s，此操作重復(fù)3-4次，使消毒液徹底洗脫；再向離心之后的吸附柱中添加600μl無菌水，改用量程為200μl的槍頭反復(fù)吸打無菌水獲得種子懸濁液；另吸取50-300μl不等體積的種子懸濁液到培養(yǎng)基上，實現(xiàn)接種。
2.如權(quán)利要求1所述的一種蘭科植物微量種子的滅菌及接種方法，其特征在于DNA純化柱為規(guī)格為1ml吸附柱，2ml收集管。
3.如權(quán)利要求1所述的一種蘭科植物微量種子的滅菌及接種方法，其特征在于所述的用量程為200μl的槍頭滅菌前將槍頭前部長1.5cm的部分剪去，避免槍頭口徑過小造成種子堵塞槍頭。
4.如權(quán)利要求1所述的一種蘭科植物微量種子的滅菌及接種方法，其特征在于所述的用量程為200μl的槍頭反復(fù)吸打無菌水獲得種子懸濁液，進(jìn)一步吸取50μl種子懸濁液到載玻片上，在體視鏡下統(tǒng)計種子量，便于計算后期種子萌發(fā)率。
5.如權(quán)利要求1所述的一種蘭科植物微量種子的滅菌及接種方法，其特征在于所述方法包括如下步驟：
步驟1：把規(guī)格為吸附柱1ml，收集管2ml的DNA純化柱、200μl和1ml槍頭、純凈水在121℃高溫滅菌20-30min備用；
步驟2：用對折過的硫酸紙收集適量開裂的鼓槌石斛種子，去除果莢碎片等雜質(zhì)后，沿著折痕將種子倒入已滅菌的吸附柱中，蓋好蓋子。把吸附柱放入收集管，在吸附柱上做好標(biāo)記，然后置于離心管架上；
步驟3：在無菌操作臺上，打開吸附柱蓋，用1ml移液槍加入600μl 75％乙醇，蓋好蓋子消毒30s，期間倒立1-2次純化柱，在種子消毒的同時，吸附柱內(nèi)部也得到滅菌，加乙醇，倒立純化柱，上離心機(jī)都在消毒30s之內(nèi)完成，然后600-800rpm離心20s；
步驟4：取出吸附柱，倒棄收集管中廢液，吸附柱放回收集管中，放置于離心管架上。在無菌操作臺中，打開吸附柱蓋，用1ml移液槍加入600μl 0.2％氯化汞滅菌4-6min，反復(fù)吸打溶液使種子懸浮得到充分滅菌，然后600-800rpm離心20s；
步驟5：取出吸附柱，倒棄收集管中廢液。吸附柱放回收集管中，放置于離心管架上；在無菌操作臺中，打開吸附柱蓋，此時吸附柱及種子已經(jīng)過乙醇、氯化汞消毒處于無菌狀態(tài)，用1ml移液槍加入600μl無菌水，反復(fù)吸打無菌水使種子懸浮，充分漂洗種子，然后600-800rpm離心20s；
步驟6：重復(fù)步驟5，3-4次；
步驟7：用1ml移液槍取600μl無菌水加入吸附柱中，然后用200μl的移液槍反復(fù)吸打使之呈種子懸濁液，吸取50μl種子懸濁液到載玻片上，在體視鏡下統(tǒng)計種子量，以便于計算后期種子萌發(fā)率；另吸取100μl的種子懸濁液接種到培養(yǎng)基上；
步驟8：把培養(yǎng)基移到溫度25±2℃暗培養(yǎng)3-5天，后光照培養(yǎng)一周，種子萌發(fā)。
6.如權(quán)利要求1所述的一種蘭科植物微量種子的滅菌及接種方法，其特征在于所述方法包括如下步驟：
步驟1：把規(guī)格為吸附柱1ml，收集管2ml的DNA純化柱、200μl和1ml槍頭、純凈水在121℃高溫滅菌20-30min備用；
步驟2：用對折過的硫酸紙收集適量開裂的虎頭蘭種子，去除果莢碎片等雜質(zhì)后，沿著折痕將種子倒入已滅菌的吸附柱中，蓋好蓋子。把吸附柱放入收集管，在吸附柱上做好標(biāo)記，然后置于離心管架上；
步驟3：在無菌操作臺上，打開吸附柱蓋，用1ml移液槍加入600μl 75％乙醇，蓋好蓋子消毒30s，期間倒立1-2次純化柱，在種子消毒的同時，吸附柱內(nèi)部也得到滅菌，加乙醇，倒立純化柱，上離心機(jī)都在消毒30s之內(nèi)完成，然后200-300rpm離心20s；
步驟4：取出吸附柱，倒棄收集管中廢液。吸附柱放回收集管中，放置于離心管架上。在無菌操作臺中，打開吸附柱蓋，用1ml移液槍加入600μl 0.2％氯化汞滅菌4-6min，反復(fù)吸打溶液使種子懸浮得到充分滅菌，然后200-300rpm離心20s；
步驟5：取出吸附柱，倒棄收集管中廢液。吸附柱放回收集管中，放置于離心管架上。在無菌操作臺中，打開吸附柱蓋，此時吸附柱及種子已經(jīng)過乙醇、氯化汞消毒處于無菌狀態(tài)，用1ml移液槍加入600μl無菌水，反復(fù)吸打無菌水使種子懸浮，充分漂洗種子，然后200-300rpm離心20s；
步驟6：重復(fù)步驟5，3-4次；
步驟7：用1ml移液槍取600μl無菌水加入吸附柱中，然后用槍頭前部長約1.5cm的部分被剪去的200μl的移液槍，反復(fù)吸打使之呈種子懸濁液，吸取50μl種子懸濁液到載玻片上，在體視鏡下統(tǒng)計種子量，以便于計算后期種子萌發(fā)率，吸取150μl種子懸濁液接到培養(yǎng)基上；
步驟8：把培養(yǎng)物移到溫度23±2℃暗培養(yǎng)一周后，再移至光照條件下培養(yǎng)一個月后種子膨大開始萌發(fā)。
7.權(quán)利要求1所述的一種蘭科植物微量種子的滅菌及接種方法用于離體保存過程中微量蘭科植物種子的滅菌及接種。