本發明屬于農業生產中果蔬防病治病技術領域，尤其是涉及一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥及其制備方法。
背景技術：
蔬菜灰霉病是一個寄主范圍很廣的蔬菜病害，主要寄主包括瓜類、茄果類、豆類、蔥蒜類以及多種葉菜類，蔬菜灰霉病發病癥狀的共同特征是：受害部位呈水浸狀腐爛，并密生灰色霉狀物，蔬菜幼苗受害時，幼苗或幼苗莖基部呈水浸狀腐爛，很快子葉腐爛，上面長滿灰色霉層，造成死苗，從而給蔬菜造成嚴重的損失。目前蔬菜灰霉病的防治主要依靠化學農藥，有苯并咪唑類的多菌靈、二甲酰亞胺類的腐霉利、農利靈、N-苯基氨基甲酸酯類的乙霉威、嘧霉胺和嘧菌胺等，但化學農藥殘留和抗藥性的問題比較嚴重。需要開發新型的環境友好的植物農藥。
中國專利申請號200910184051.3公開了一種抑制蔬菜灰霉菌植物源農藥及其應用，它以紫穗槐植物為原料，研制的一種低毒新型生物產品，以葉面噴灑的方式施藥，可應用于蔬菜。該發明以紫穗槐的提取物來抑菌，作用比較單一，抑菌效果有待改善。
中國專利申請號201410630412.3公開了一種用于防治灰霉病的組合物，所述組合物的劑型為懸浮劑，有效成分為蛇床子素和嘧霉胺，助劑為烷基芳基聚氧乙烯醚、蠶沙、硅酮類、羥乙基纖維素。本發明對大蒜灰霉病具有非常好的防治效果，本發明利用蛇床子素和嘧霉胺對大蒜灰霉病的預防和治療的作用，但是防治效果偏弱。
技術實現要素：
有鑒于此，本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，該農藥原料均來源于植物，各種原料協同抑菌，對蔬菜灰霉病的防效達到83.6-92.7%，效果顯著，而且無殘留，沒有抗藥性，綠色環保，使用方便。
為達到上述目的，本發明采用以下技術方案：
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳20-30份、黃岑20-30份、喜樹皮15-20份、香樟葉15-20份、丁香15-20份、表面活性劑4-8份、濕潤劑6-10份、填料80-100份。
進一步的，所述表面活性劑為脂肪醇聚氧乙烯醚、 烷基酚聚氧乙烯醚、 脂肪酸聚氧乙烯醚或聚山梨酯中的一種。
進一步的，所述濕潤劑為十二烷基硫酸鈉、丙二醇或甘油中的一種。
進一步的，所述填料為高嶺土、殼聚糖或幾丁質中的一種。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑和喜樹皮，粉碎至80-100目，加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量6-10倍重量體積分數為70-80%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量0.1-0.2倍重量的纖維素酶，浸泡2-3h，然后超聲波提取2-3次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至40-80目，加入香樟葉和丁香總量6-12倍重量體積分數為70-80%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，水浴回流提取3-6h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，低溫烘干，粉碎后過400-600目篩，制備得到植物源農藥。
進一步的，所述步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
進一步的，所述步驟（3）中低溫烘干的溫度為40-50℃。
本發明的有益效果是：
1、本發明制備的防治蔬菜灰霉病的植物源農藥采用的具有抑菌殺菌作用的原料包括蒼耳、黃岑、喜樹皮、香樟葉和丁香，其中蒼耳中的蒼耳甙、生物堿、亞油酸、甾醇等對灰霉病菌絲生長發育具有很強的抑制作用，作用機理主要是通過抑制孢子的形成和孢子萌發等,削減灰霉病菌孢子的形成數量、降低孢子萌發率來實現對灰霉病菌的抑制作用；黃岑中的黃酮類、酚類、萜類和揮發油等對植物病原菌均有很強的殺菌作用，作用機理為通過使細菌菌體變形、質壁分離或細胞壁破損，導致細菌內容物大量滲出，從而菌體死亡；喜樹皮中提取出的喜樹堿會導致灰霉病菌的菌絲畸形、菌絲生長點縊縮、細胞核降解，從而使病菌細胞死亡或抑制細菌生長；香樟葉中的揮發油、有機酸以及酚類等對灰霉病菌菌絲生長有較強的抑制作用，能夠提高蔬菜中防御酶的活性，從而提高蔬菜抗真菌的能力，另外也具有很強的殺菌作用；丁香中的揮發油能夠抑制孢子的產生，從而達到抑制真菌的目的。因此這幾種原料對灰霉病菌的抑制機理不同，殺菌方式不同，因此復配使用能夠優勢互補，抑菌殺菌更徹底，防治效果更顯著。
2、本發明根據植物原料抑菌活性成分不同，采用不同的提取方法。其中蒼耳中的主要活性成分為蒼耳甙、生物堿、亞油酸和甾醇，黃岑中的主要活性成分為黃酮類、酚類、萜類和揮發油，喜樹的皮中主要是喜樹堿，因此，這三種原料采用乙醇超聲提取的方法，還采用纖維素酶酶解破壞植物細胞壁，使植物細胞內的成分更易溶出，以增加提取率。丁香和香樟葉中的主要成分為揮發油，采用乙醇回流提取的方法，成分損失小，提取率高。
另外，在制備防治蔬菜灰霉病的植物源農藥時，植物原料提取后得到的提取物Ⅰ和提取物Ⅱ與填料混合后，由于填料為疏松多孔結構，且吸附作用比較強，可以將提取物中的活性成分吸附在填料中，起到保護作用，然后再低溫干燥，整個過程有效成分損失少，在實際使用的時候防治效果好。
3、制備農藥時采用的表面活性劑均為非離子表面活性劑，不會在填料的表面發生吸附，可以使活性成分分散均勻。以十二烷基硫酸鈉、丙二醇或甘油為濕潤劑，可以增加農藥的水溶性，在后續使用時農藥更容易分散均勻，抑菌效果好。
4、，本發明制備的防治蔬菜灰霉病的植物源農藥在施藥10d后，對蔬菜灰霉病的防效達到83.6-92.7%，效果顯著，而且無污染，無殘留，無抗藥性。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作進一步描述，其中本發明各個實施例中采用的原料蒼耳、黃岑、喜樹皮、香樟葉和丁香均為新鮮的經過干燥的原料。
實施例1
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳20份、黃岑30份、喜樹皮15份、香樟葉15份、丁香20份、表面活性劑4份、濕潤劑6份、填料80份。
其中表面活性劑為脂肪醇聚氧乙烯醚。
其中濕潤劑為十二烷基硫酸鈉。
其中填料為高嶺土。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑和喜樹皮，粉碎至80目，加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量6倍重量體積分數為70%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量0.1倍重量的纖維素酶，浸泡2h，然后超聲波提取2次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至40目，加入香樟葉和丁香總量6倍重量體積分數為70%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，100℃水浴回流提取3h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，40℃低溫烘干，粉碎后過400目篩，制備得到植物源農藥。
其中步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
實施例2
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳22份、黃岑28份、喜樹皮16份、香樟葉16份、丁香19份、表面活性劑5份、濕潤劑7份、填料85份。
其中表面活性劑為烷基酚聚氧乙烯醚。
其中濕潤劑為丙二醇。
其中填料為殼聚糖。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑和喜樹皮，粉碎至90目，加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量7倍重量體積分數為72%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量0.2倍重量的纖維素酶，浸泡2.5h，然后超聲波提取3次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至50目，加入香樟葉和丁香總量7倍重量體積分數為72%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，100℃水浴回流提取4h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，45℃低溫烘干，粉碎后過500目篩，制備得到植物源農藥。
其中步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
實施例3
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳24份、黃岑26份、喜樹皮17份、香樟葉17份、丁香18份、表面活性劑6份、濕潤劑8份、填料90份。
其中表面活性劑為脂肪酸聚氧乙烯醚。
其中濕潤劑為甘油。
其中填料為幾丁質。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑和喜樹皮，粉碎至100目，加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量8倍重量體積分數為75%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量0.15倍重量的纖維素酶，浸泡3h，然后超聲波提取2次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至60目，加入香樟葉和丁香總量8倍重量體積分數為75%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，100℃水浴回流提取5h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，50℃低溫烘干，粉碎后過600目篩，制備得到植物源農藥。
其中步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
實施例4
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳25份、黃岑25份、喜樹皮18份、香樟葉18份、丁香17份、表面活性劑7份、濕潤劑9份、填料95份。
其中表面活性劑為聚山梨酯。
其中濕潤劑為十二烷基硫酸鈉。
其中填料為高嶺土。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑和喜樹皮，粉碎至90目，加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量9倍重量體積分數為75%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量0.15倍重量的纖維素酶，浸泡2.5h，然后超聲波提取3次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至70目，加入香樟葉和丁香總量9倍重量體積分數為80%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，100℃水浴回流提取5h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，45℃低溫烘干，粉碎后過500目篩，制備得到植物源農藥。
其中步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
實施例5
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳25份、黃岑25份、喜樹皮18份、瑞香狼毒15份、香樟葉18份、丁香17份、表面活性劑7份、濕潤劑9份、填料95份。
其中表面活性劑為聚山梨酯。
其中濕潤劑為十二烷基硫酸鈉。
其中填料為高嶺土。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑、喜樹皮和瑞香狼毒，粉碎至90目，加入蒼耳、黃岑、喜樹皮和瑞香狼毒總量9倍重量體積分數為75%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑、喜樹皮和瑞香狼毒總量0.15倍重量的纖維素酶，浸泡2.5h，然后超聲波提取3次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至70目，加入香樟葉和丁香總量9倍重量體積分數為80%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，100℃水浴回流提取5h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，45℃低溫烘干，粉碎后過500目篩，制備得到植物源農藥。
其中步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
實施例6
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳26份、黃岑24份、喜樹皮19份、香樟葉19份、丁香16份、表面活性劑8份、濕潤劑10份、填料100份。
其中表面活性劑為脂肪醇聚氧乙烯醚。
其中濕潤劑為丙二醇。
其中填料為殼聚糖。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑和喜樹皮，粉碎至80目，加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量10倍重量體積分數為80%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量0.1倍重量的纖維素酶，浸泡2h，然后超聲波提取2次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至80目，加入香樟葉和丁香總量10倍重量體積分數為70%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，100℃水浴回流提取6h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，50℃低溫烘干，粉碎后過400目篩，制備得到植物源農藥。
其中步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
實施例7
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳28份、黃岑22份、喜樹皮20份、香樟葉20份、丁香15份、表面活性劑5份、濕潤劑7份、填料85份。
其中表面活性劑為烷基酚聚氧乙烯醚。
其中濕潤劑為甘油。
其中填料為幾丁質。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑和喜樹皮，粉碎至90目，加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量6倍重量體積分數為80%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量0.2倍重量的纖維素酶，浸泡3h，然后超聲波提取3次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至40目，加入香樟葉和丁香總量11倍重量體積分數為72%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，100℃水浴回流提取4h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，40℃低溫烘干，粉碎后過600目篩，制備得到植物源農藥。
其中步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
實施例8
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳30份、黃岑20份、喜樹皮19份、香樟葉18份、丁香16份、表面活性劑6份、濕潤劑8份、填料90份。
其中表面活性劑為脂肪酸聚氧乙烯醚。
其中濕潤劑為丙二醇。
其中填料為高嶺土。
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑和喜樹皮，粉碎至100目，加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量7倍重量體積分數為70%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑和喜樹皮總量0.1倍重量的纖維素酶，浸泡2.5h，然后超聲波提取2次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅰ；
（2）稱取香樟葉和丁香，粉碎至50目，加入香樟葉和丁香總量12倍重量體積分數為75%的乙醇溶液，然后在索氏提取器中，100℃水浴回流提取5h，濾液減壓濃縮至無醇味，得提取物Ⅱ；
（3）將所述提取物Ⅰ、提取物Ⅱ、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，45℃低溫烘干，粉碎后過500目篩，制備得到植物源農藥。
其中步驟（1）中纖維素酶酶活力為3×104U/g。
對比例1
對比例1與實施例4基本相同，不同之處在于：原料做了相應的調整，將原料中的蒼耳去掉，相應的增加黃岑的量，即：
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：黃岑50份、喜樹皮18份、香樟葉18份、丁香17份、表面活性劑7份、濕潤劑9份、填料95份。
其制備方法與實施例4相同。
對比例2
對比例2與實施例4基本相同，不同之處在于：原料做了相應的調整，將原料中的黃岑去掉，相應的增加蒼耳的量，即：
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳50份、喜樹皮18份、香樟葉18份、丁香17份、表面活性劑7份、濕潤劑9份、填料95份。
其制備方法與實施例4相同。
對比例3
對比例3與實施例4基本相同，不同之處在于：原料做了相應的調整，將原料中的喜樹皮去掉，相應的增加黃岑的量，即：
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳25份、黃岑43份、香樟葉18份、丁香17份、表面活性劑7份、濕潤劑9份、填料95份。
其制備方法與實施例4相同。
對比例4
對比例4與實施例4基本相同，不同之處在于：原料做了相應的調整，將原料中的香樟葉和丁香去掉，相應的增加蒼耳和黃岑的量，即：
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥，包括以下重量份數的原料：蒼耳43份、黃岑42份、喜樹皮18份、表面活性劑7份、濕潤劑9份、填料95份。
其制備方法與實施例4相同。
對比例5
對比例5與實施例4采用的原料相同，不同之處在于：制備方法有所調整，只采用超聲波提取的方法，即：
一種防治蔬菜灰霉病的植物源農藥的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取蒼耳、黃岑、喜樹皮、香樟葉和丁香，粉碎至90目，加入蒼耳、黃岑、喜樹皮、香樟葉和丁香總量9倍重量體積分數為75%的乙醇溶液，同時加入蒼耳、黃岑、喜樹皮、香樟葉和丁香總量0.15倍重量的纖維素酶，浸泡2.5h，然后超聲波提取3次，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得提取物；
（2）將所述提取物、表面活性劑、濕潤劑和填料混合均勻后，45℃低溫烘干，粉碎后過500目篩，制備得到植物源農藥。
蔬菜灰霉病的田間防效試驗
試驗用地為南陽市某一蠶豆地，面積為2000m2，均分為14個小區，其中1個小區為空白對照組，另外13個為試驗組，將實施例1-8以及對比例1-5制備的防治蔬菜灰霉病的植物源農藥用1000倍清水溶解后噴灑于試驗組，而空白對照組噴灑清水。
調查方法為：每小區隨機選10株，掛牌標記，每株自上而下（上、中、下三部）共取10片葉子調查，以每片葉片上病斑面積占整個葉片面積百分率分級。
葉片分級方法：0級，無病斑；1級，病斑面積占整個葉面積的5%以下；3級，病斑面積占整個葉面積的6-15%；5級，病斑面積占整個葉面積的16-25%；7級，病斑面積占整個葉面積的26-50%；9級，病斑面積占整個葉面積的50%以上。
第一次噴藥前調查病情指數，于施藥前和施藥后10d調查防治效果。計算番茄灰霉病葉片病情指數以及防治效果。
病情指數=［∑（各級病葉數×相對級數值）/（調查總葉數×9）］×100%
防治效果=［1-（CK0×PT1）/（CK1×PT0）］×100%
其中：CK0-空白組施藥前病情指數；CK1-空白組施藥后病情指數；
PT0-試驗區施藥前病情指數；PT1-試驗區施藥后病情指數。
表1 蔬菜灰霉病田間防效試驗數據
由表1可以看出，本發明實施例1-8制備的防治蔬菜灰霉病的植物源農藥在施藥10d后，對蠶豆葉上的灰霉病的防效達到83.6-92.7%，效果顯著，而且無污染，無殘留，無抗藥性。
實施例5與實施例4基本相同，不同之處在于實施例5是在實施例4基礎上增加了一種原料瑞香狼毒，而瑞香狼毒中的萜類和黃酮類對植物病原菌具有很強的抑制作用，因此增加瑞香狼毒的實施例5的效果要優于實施例4，說明瑞香狼毒也具有協同抑菌的作用，但是毒性會偏大。
對比例1-4均是在實施例4的基礎上對原料做調整，而原料總量不變，制備方法相同。其中對比例1將原料中的蒼耳去掉，相應的增加黃岑的量；對比例2將原料中的黃岑去掉，相應的增加蒼耳的量；對比例3將將原料中的喜樹皮去掉，相應的增加黃岑的量；對比例4將原料中的香樟葉和丁香去掉，相應的增加蒼耳和黃岑的量，而對比例1-4制備的農藥對灰霉病的防效比實施例4低，說明本發明選擇的這幾種原料，優勢互補，相互之間具有協同增效的作用，缺少任何一種，抑菌效果就會相應減弱。
對比例5與實施例4采用的原料相同，不同之處在與制備方法有所調整，只采用超聲波法提取，而對比例5的產品對灰霉病的防效比實施例4要差一點，說明根據原料中活性分類的特點進行提取，能增強抑菌成分的提取率，減少損失，從而增強防效效果。最后說明的是，以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非限制，本領域普通技術人員對本發明的技術方案所做的其他修改或者等同替換，只要不脫離本發明技術方案的精神和范圍，均應涵蓋在本發明的權利要求范圍當中。