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一種廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基和體外培養(yǎng)方法與流程

文檔序號:11072623閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基,其特征在于,所述培養(yǎng)基包括蟲卵培養(yǎng)基、I期幼蟲培養(yǎng)基、III期幼蟲培養(yǎng)基、IV期幼蟲培養(yǎng)基和V期幼蟲培養(yǎng)基,所述蟲卵培養(yǎng)基、I期幼蟲培養(yǎng)基、III期幼蟲培養(yǎng)基、IV期幼蟲培養(yǎng)基和V期幼蟲培養(yǎng)基中均含有兩性霉素B。

2.根據(jù)權利要求1所述的廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基,其特征在于,所述兩性霉素B分別在蟲卵培養(yǎng)基、I期幼蟲培養(yǎng)基、III期幼蟲培養(yǎng)基、IV期幼蟲培養(yǎng)基和V期幼蟲培養(yǎng)基中的終濃度為0.5μg/mL。

3.根據(jù)權利要求1所述的廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基,其特征在于,所述蟲卵培養(yǎng)基包含Ham’s F-12培養(yǎng)基和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B。

4.根據(jù)權利要求1所述的廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基,其特征在于,所述I期幼蟲培養(yǎng)基包含DMEM 基礎培養(yǎng)基、膽固醇乙醇溶液、胎牛血清、螺組織提取液和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B。

5.根據(jù)權利要求4所述的廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基,其特征在于,所述I期幼蟲培養(yǎng)基包含DMEM 基礎培養(yǎng)基、0.1%的5 mg/ml膽固醇乙醇溶液、20%胎牛血清、1%螺組織提取液和0.1%復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B。

6.根據(jù)權利要求1所述的廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基,其特征在于,所述III期幼蟲培養(yǎng)基、IV期幼蟲培養(yǎng)基、V期幼蟲培養(yǎng)基均包含Waymouth’s 培養(yǎng)基、胎牛血清和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B。

7.根據(jù)權利要求6所述的廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基,其特征在于,所述III期幼蟲培養(yǎng)基、IV期幼蟲培養(yǎng)基、V期幼蟲培養(yǎng)基均包含Waymouth’s 培養(yǎng)基、20%胎牛血清和0.1%復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B。

8.根據(jù)權利要求4或5所述的廣州管圓線蟲體外培養(yǎng)基,其特征在于,所述螺組織提取液的制備方法為:將螺清洗后,加入氯化鈉等滲溶液,經(jīng)組織破碎、離心后取上清,過濾即得。

9.一種廣州管圓線蟲蟲卵的分離培養(yǎng)方法,其特征在于,將已感染廣州管圓線蟲60d的大鼠進行解剖處理,挑出血管內(nèi)的成蟲,將成蟲清洗后放入蟲卵培養(yǎng)基中孵育,孵育一段時間后,挑出成蟲,剩余的蟲卵置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7~10d即可;所述蟲卵培養(yǎng)基包含Ham’s F-12培養(yǎng)基和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B。

10.一種廣州管圓線蟲體外的分離培養(yǎng)方法,其特征在于,包括以下步驟:

(1)蟲卵的分離培養(yǎng):將已感染廣州管圓線蟲60d的大鼠進行解剖處理,挑出血管內(nèi)的成蟲,將成蟲清洗后放入蟲卵培養(yǎng)基中孵育,孵育一段時間后,挑出成蟲,剩余的蟲卵置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7~10d即可;所述蟲卵培養(yǎng)基包含Ham’s F-12培養(yǎng)基和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B;

(2)I期幼蟲的分離培養(yǎng):按常規(guī)方法分離出I期幼蟲,并置于I期幼蟲培養(yǎng)基中培養(yǎng)即可;所述I期幼蟲培養(yǎng)基包含DMEM 基礎培養(yǎng)基、膽固醇乙醇溶液、胎牛血清、螺組織提取液和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B;

(3)III期幼蟲的分離培養(yǎng):按常規(guī)方法分離出III期幼蟲,并置于III期幼蟲培養(yǎng)基中培養(yǎng)即可;所述III期幼蟲培養(yǎng)基包含Waymouth’s 培養(yǎng)基、胎牛血清和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B;

(4)IV期幼蟲的分離培養(yǎng):按常規(guī)方法分離出IV期幼蟲,并置于IV期幼蟲培養(yǎng)基中培養(yǎng)即可;所述IV期幼蟲培養(yǎng)基包含Waymouth’s 培養(yǎng)基、胎牛血清和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B;

(5)V期幼蟲的分離培養(yǎng):按常規(guī)方法分離出V期幼蟲,并置于V期幼蟲培養(yǎng)基中培養(yǎng)即可;所述V期幼蟲培養(yǎng)基包含Waymouth’s 培養(yǎng)基、胎牛血清和復合抗生素,所述復合抗生素含有青霉素G鉀、硫酸鏈霉素和兩性霉素B。

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