1.一種金線蓮組培苗快速繁殖方法,其特征在于,包括以下步驟:
A、選取天湖金線蓮的健康株系,去掉根、葉片和葉鞘,取其莖條,洗凈后切成帶節莖段,消毒后接種到不定芽誘導培養基J1上,培養溫度為23±2℃,光照強度500~1000lx,光照12h/d,獲得不定芽,所述的不定芽誘導培養基J1每升含花寶1號1~2g,蛋白胨0.5~2g,肌醇80~120mg,甘氨酸1.5~2.5mg,鹽酸硫胺素0.05~0.2mg,鹽酸吡哆醇0.4~0.8mg,煙酸0.4~0.8mg,6-芐基腺嘌呤2.0~5.0mg,萘乙酸0.2~0.5mg,蔗糖15~20g,瓊脂6~7g,pH 5.4-5.6;
B、分切不定芽,將高小于3厘米的叢生芽插植于玻璃培養瓶中的增殖培養基J2上,把高大于3厘米的不定芽單株插植于生根培養基JR上,用瓶塞塞住玻璃培養瓶的瓶口,將含有不定芽的增殖培養基J2和生根培養基JR的玻璃培養瓶橫放于全自然光培養室中的培養架上,瓶口統一朝一方向,散射光能直接照射不定芽上,培養溫度23-25℃,光照強度1000-3000lx,光照時間10-16h/d下培養,當增殖培養基J2在培養下收獲增殖材料不定芽,增殖材料不定芽繼續接種至新的玻璃培養瓶中的增殖培養基J2上,用瓶塞塞住玻璃培養瓶的瓶口,將含有不定芽的增殖培養基J2的玻璃培養瓶橫放于全自然光培養室中的培養架上,瓶口統一朝一方向,散射光能直接照射不定芽上,培養條件為培養溫度23-25℃,光照強度1000-3000lx,光照時間10-16h/d下培養,當增殖材料不定芽培養一個繼代周期后進行接種轉移,高小于3厘米的叢生芽插植于增殖培養基J2中,高大于3厘米的不定芽單株插植于生根培養基JR,如此循環,生根培養基JR上的不定芽長根后成為完整植株進行出瓶移栽;
所述的增殖培養基J2每升含花寶1號2~3g,蛋白胨0.5~2g,肌醇80~120mg,甘氨酸1.5~2.5mg,鹽酸硫胺素0.05~0.2mg,鹽酸吡哆醇0.4~0.8mg,煙酸0.4~0.8mg,6-芐基腺嘌呤2.0~3.0mg,萘乙酸0.2~0.5mg,蔗糖20~30g,瓊脂6~7g,pH 5.4-5.6;
所述的生根培養基JR每升含花寶1號2~3g,蛋白胨0.5~2g,肌醇80~120mg,甘氨酸1.5~2.5mg,鹽酸硫胺素0.05~0.2mg,鹽酸吡哆醇0.4~0.8mg,煙酸0.4~0.8mg,6-芐基腺嘌呤0.2~0.5mg,萘乙酸2~5mg,活性碳500~1000mg,蔗糖20~30g,瓊脂6~7g,pH 5.4-5.6。
2.根據權利要求1所述的金線蓮組培苗快速繁殖方法,其特征在于,將步驟A的不定芽轉接到不定芽誘導培養基J1上進行繼代培養,培養溫度為23±2℃,光照度500~1000lx,光照12h/d,繼代周期為35-40天,繼代培養4-5次后可獲得大量的不定芽作為無性繁殖材料。
3.根據權利要求1所述的金線蓮組培苗快速繁殖方法,其特征在于,所述的步驟A的消毒是將帶節莖段,先用體積分數75%酒精水溶液浸泡30s,再在質量分數0.1%升汞水溶液中浸泡并搖動5~16min,無菌水沖洗3次后,用無菌紙吸干莖段表面水分,并切去兩端各1~2mm,再接種到不定芽誘導培養基J1。