本發明屬于香蕉組織培養技術領域，尤其涉及一種添加香豆素的香蕉壯苗培養基篩選方法。
背景技術：
香蕉（學名：Musa nana Lour.）芭蕉科芭蕉屬植物，又指其果實。熱帶地區廣泛栽培食用。香蕉味香、富含營養，終年可收獲，在溫帶地區也很受重視。植株為大型草本，從根狀莖發出，由葉鞘下部形成高3～6公尺(10～20尺)的假桿；葉長圓形至橢圓形，有的長達3～3.5公尺(10～11.5尺)，寬65公分(26寸)，10～20枚簇生莖頂。穗狀花序下垂[1]，由假桿頂端抽出，花多數，淡黃色；果序彎垂，結果10～20串，約50～150個。植株結果后枯死，由根狀莖長出的吸根繼續繁殖，每一根株可活多年。原產亞洲東南部：臺灣、海南、廣東、廣西等地區均有栽培。目前香蕉是一種廣受歡迎的水果，也是部分地區的主要糧食，擁有極大市場需求量，對香蕉進行快速繁殖的研究具有一定的必要性，不僅能解決龐大的市場需求量，也能在一定程度上保存優良的香蕉品種，組織培養是香蕉快速繁殖的方法之一，選擇合適的培養基是提高組織培養效率途徑之一，然而目前的培養基篩選方法都是以科研為目的的篩選方法，不能商業工廠化生產的需求。
稀土元素是17種特殊的元素的統稱，它的得名是因為瑞典科學家在提取稀土元素時應用了稀土化合物，所以得名稀土元素。然而稀土是歷史遺留下來的名稱，稀土是從18世紀末開始陸續發現，當時人們常把不溶于水的固體氧化物稱為土，例如，將氧化鋁稱為“陶土”，氧化鈣稱為”堿土“等。稀土一般是以氧化物狀態分離出來的，當時比較稀少，因而得名為稀土（Rare Earth，簡稱RE或R），然而經過大量的科學研究，在組織培養當中添加了稀土元素會大大地提高組織培養的質量。
鑭是一種金屬元素，原子序數57，原子量138.9055，元素名來源于希臘文，原意是“隱蔽”。銀灰色光澤，質地較軟，密度6.174g/cm3，熔點921℃，沸點3457℃；化學性質活潑，暴露于空氣中很快失去金屬光澤生成一層藍色的氧化膜，但是它并不能保護金屬，繼而進一步氧化生成白色的氧化物粉末。能和冷水緩慢作用，易溶于酸，可以多種非金屬反應。金屬鑭一般保存于礦物油或稀有氣體中。鑭在地殼中的含量為0.00183%，在稀土元素中含量僅次于鈰。
技術實現要素：
基于現有技術中香蕉的組培壯苗培養基的篩選方法中偏向于科研，不適合商業工廠化生產的問題，本發明提供一種添加香豆素的香蕉壯苗培養基篩選方法，其通過單一變量法對香蕉組培苗進行壯苗培養，分析統計葉片葉綠素含量和植株平均含量，在評價當中結合葉片葉綠素含量和植株平均含量，更加符合商業工廠化的生產的標準。
一種添加香豆素的香蕉壯苗培養基篩選方法，其包括以下步驟：
步驟S10確定初步篩選范圍，檢索查閱相關文獻資料，對比其他植物物種組培壯苗過程中添加稀土元素和香豆素的量并確定稀土元素和香豆素初步篩選范圍；
步驟S20選擇外植體，選擇健康、生長環境一致并且生長狀態相似的香蕉組培幼苗；
步驟S30對照培養，使用單一變量法配制不同濃度稀土元素和香豆素添加量的培養基，分別接種相同量的香蕉組培幼苗，并進行常規壯苗組織培養；
步驟S40記錄檢測參數，培養20天后統計每個稀土元素和香豆素濃度梯度中幼苗的葉片葉綠素含量；
步驟S50生長量計算，分別將相同濃度梯度的每個平行實驗組中的香蕉組培苗取出，用清水沖洗干凈，對同一試驗組的平行樣本分別進行稱重，計算出植株平均重量；
步驟S60計算評估因數，將葉綠素含量數值加上植株平均重量數值的十分之一得出評估因數，對比不同實驗組的評估因數，選出評估因數最大的實驗組，確定最適稀土元素和香豆素的濃度；
步驟S70縮小篩選范圍，使用步驟S60中挑選出的濃度梯度范圍重復進行步驟S10-S60縮小篩選范圍或者確定最適濃度；
步驟S80反向篩選基礎培養基，使用步驟S70確定的最適濃度搭配不同基礎培養基，重復步驟S40和步驟S50，并使用步驟S60的計算方法計算評估因數，確定最適基礎培養基。
其中，所述的步驟S30中配制不同濃度是設置5-15個濃度梯度。
其中，所述的步驟S30中接種的培養基的數量為每個濃度梯度的培養基設置10-20組平行實驗組。
其中，所述的稀土元素是鑭元素。
其中，所述的步驟S70中重復的次數是2-3次。
其中，所述的步驟S80中不同的基礎培養基包括1/2MS培養基、MS培養基、N6培養基、B5培養基、Nitsh培養基、White培養基和Miller培養基。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發明作進一步的描述。
一種添加香豆素的香蕉壯苗培養基篩選方法，其包括以下步驟：
步驟S10確定初步篩選范圍，檢索查閱相關文獻資料，對比其他植物物種組培壯苗過程中添加稀土元素和香豆素的量并確定稀土元素和香豆素初步篩選范圍；
步驟S20選擇外植體，選擇健康、生長環境一致并且生長狀態相似的香蕉組培幼苗；
步驟S30對照培養，使用單一變量法配制不同濃度稀土元素和香豆素添加量的培養基，分別接種相同量的香蕉組培幼苗，并進行常規壯苗組織培養；
步驟S40記錄檢測參數，培養20天后統計每個稀土元素和香豆素濃度梯度中幼苗的葉片葉綠素含量；
步驟S50生長量計算，分別將相同濃度梯度的每個平行實驗組中的香蕉組培苗取出，用清水沖洗干凈，對同一試驗組的平行樣本分別進行稱重，計算出植株平均重量；
步驟S60計算評估因數，將葉綠素含量數值加上植株平均重量數值的十分之一得出評估因數，對比不同實驗組的評估因數，選出評估因數最大的實驗組，確定最適稀土元素和香豆素的濃度；
步驟S70縮小篩選范圍，使用步驟S60中挑選出的濃度梯度范圍重復進行步驟S10-S60縮小篩選范圍或者確定最適濃度；
步驟S80反向篩選基礎培養基，使用步驟S70確定的最適濃度搭配不同基礎培養基，重復步驟S40和步驟S50，并使用步驟S60的計算方法計算評估因數，確定最適基礎培養基。
其中，所述的步驟S30中配制不同濃度是設置5-15個濃度梯度。
其中，所述的步驟S30中接種的培養基的數量為每個濃度梯度的培養基設置10-20組平行實驗組。
其中，所述的稀土元素是鑭元素。
其中，所述的步驟S70中重復的次數是2-3次。
其中，所述的步驟S80中不同的基礎培養基包括1/2MS培養基、MS培養基、N6培養基、B5培養基、Nitsh培養基、White培養基和Miller培養基。
經過篩選出以B5培養基為基礎培養基，添加香豆素的濃度是為50mg/L、NAA（萘乙酸）的濃度為1mg/L、硝酸鑭的濃度為3g/L，瓊脂粉的濃度為10g/L、白砂糖的濃度為30g/L，最適合香蕉叢生芽工廠化出根培養生產。
以上所述實施例僅表達了本發明的一種實施方式，其描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對本發明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發明的保護范圍。因此，本發明專利的保護范圍應以所附權利要求為準。