本發(fā)明涉及水產(chǎn)品養(yǎng)殖技術領域，尤其是一種低齡鱘魚腹部側(cè)開口雌雄鑒別技術。

背景技術：

目前，國內(nèi)外常用的鱘魚性別鑒別技術主要有以下幾種：一是超聲鑒別法，如本申請人2008年前申請的專利公告號為cn101647718b，一種超聲波鱘魚雌雄鑒別方法，運用超聲波的物理學功能針對鱘魚性腺發(fā)育早期解剖學特點所顯示的不同圖像進行判別雌雄，利用電腦連接一個超聲波掃描儀來掃描性腺結(jié)構(gòu)，鱘魚性腺的超聲波檢查在正面進行，以取得不同成熟階段的卵巢超聲圖。二是血液生化及激素指標判別法，如專利公開號為cn100404553a的一種鱘科魚類卵黃磷蛋白抗體的制備方法及其應用，涉及用于鑒別鱘科魚類雌雄的卵黃磷蛋白抗體的制備方法，通過使用卵黃磷蛋白抗體鑒別鱘科魚類雌雄的方法；取鱘科魚類的卵，低溫高速勻漿和低溫離心后，經(jīng)飽和硫酸銨沉淀，凝膠柱分離純化，透析除鹽后，制備卵黃磷蛋白凍干粉；稱取凍干粉，溶于生理鹽水中，加入弗氏佐劑乳化，免疫大白兔，制備多克隆抗體。另外還有腹腔外科手術法、內(nèi)窺鏡法、基因鑒別法等。其中腹腔外科手術不需要特殊儀器設備或試劑，一次操作即可完成性別鑒定和分池培育，鑒定準確率可高達100%，是目前生產(chǎn)中最普遍采用的方法之一。腹腔外科手術鑒別包含兩種方式，即腹部穿刺手術和側(cè)部開口手術。其中側(cè)部開口手術較穿刺手術更早一年對鱘魚進行性別鑒定，可將鑒別年齡提前至3齡，甚至2.5齡即可鑒別出雌雄性別，而且對3齡鱘魚鑒別的成功率高于穿刺手術；但由于側(cè)部開口手術的創(chuàng)口較腹部穿刺手術大，因此術后愈合的時間較長，更容易造成發(fā)病死亡，且影響覓食效果導致日增重降低。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了解決鱘魚養(yǎng)殖過程中的低齡鱘魚雌雄鑒別準確率低、操作工藝過于復雜等問題，提供一種低齡鱘魚腹部側(cè)開口雌雄鑒別技術。

本發(fā)明的上述技術問題主要是通過下述技術方案得以解決的：一種低齡鱘魚腹部側(cè)開口雌雄鑒別技術，其特征是包括以下步驟：

一、鑒別前的準備：

（1）停食：待鑒別鱘魚停食7天以上；水溫在18℃以下進行鑒別。本方案整個過程的水溫都需維持在18℃以下。

（2）鑒別設施及工具準備：撈具、麻醉缸、麻醉劑、量具、魚用手術臺、手術刀、鑒別器、取卵器、顯微鏡、載玻片、消毒液、燒杯等等。

（3）集箱：觀察鱘魚單位密度，保證鱘魚不缺氧前提下，逐步縮小箱體。

（4）撈魚：撈魚過程中，頂住魚頭讓鱘魚腹部落入撈具網(wǎng)兜中，并使魚體呈“u”字型撈起，然后送至麻醉缸。

二、待鑒別鱘魚的麻醉：

（1）配置麻醉液：使用丁香油作麻醉劑，按照油水之比1:10000進行配比。

（2）麻醉：鱘魚放入麻醉缸，待進入暈睡狀態(tài)，表現(xiàn)為身體失去平衡，呈現(xiàn)腹部或背部朝上狀態(tài)，當背部朝上時進行人為翻轉(zhuǎn)，使魚體腹部朝上；待魚體腹部朝上后無反應，則說明魚體已被麻醉。

（3）抱魚：一只手握住魚尾使尾柄朝上、魚背朝外、魚腹朝下，另一只手輕托魚腹，并用肘部夾住魚頭。

三、腹部側(cè)開口：

（1）腹部取樣位置：以取樣者腹部與魚用手術臺上的鱘魚腹部相對時，鱘魚頭部在取樣人左手邊為標準，在鱘魚的腹鰭往胸鰭方向第三與第四骨板之間，距腹線1.5cm處進行取樣定位。以取樣者臉朝魚腹方向進行操作。

（2）腹部取樣開口操作：單手握住手術刀柄并伸出食指頂住手術刀片，指尖與刀片尖端距離約為1cm；找到取樣部位后將刀片朝魚體平行方向插入，開一個長為1-2cm的刀口。

四、雌雄觀察鑒別：

（1）輕輕扒開切口觀察性腺，脂肪表層下埋一條邊沿褶皺且為淡黃色的粗線則為雌魚卵巢，卵巢表面質(zhì)地較軟，富有褶皺和分葉，卵粒隱約可見；脂肪層出現(xiàn)兩排由許多白色包囊組成的條帶則為雄魚的精巢，精巢為白色，表面豐滿光滑，質(zhì)地較硬，呈棒狀或塊狀。

（2）清潔與消毒：每次切口后必須將手術刀等鑒別工具放入盛有75％的酒精燒杯中涮洗；之后擦干凈。

五、鑒別后的復蘇和恢復：

（1）放魚和醒魚：將鑒別后的雄魚、雌魚或不確定雌雄的鱘魚分別抱入預備好的且具有明顯標記的空網(wǎng)箱；對蘇醒過慢的鱘魚采取輕輕晃動、按摩、清洗腮部等措施加快其蘇醒。

（2）創(chuàng)口處理：鱘魚鑒別后3天內(nèi)不予喂食；仔細觀察傷口狀況，若有發(fā)炎癥狀，及時撈出放入玻璃鋼魚池或小網(wǎng)箱中進行消炎治療；半月后傷口愈合恢復正常活動。

本技術方案根據(jù)鱘魚的生理特性，通過微創(chuàng)手術進行直觀性鑒別，可至少提前一年時間對鱘魚的雌雄進行分別，以提前處理雄魚，降低飼養(yǎng)成本；這種微創(chuàng)方法只要在后期的恢復階段進行精心管理，對鱘魚就不會產(chǎn)生任何負作用。本方案中的親魚特指鑒別過程中的個體，整個過程均嚴格遵守輕而柔、撫而快的工藝原則，保證親魚在鑒別過程中逗留時間短且避免碰撞受到傷害。

作為優(yōu)選，所述的鑒別設施及工具準備還包括空網(wǎng)箱、撈具、擔架、紙巾。

作為優(yōu)選，所述的撈具具有橢圓形撈口，且設有能容下整尾待鑒別鱘魚魚身的網(wǎng)兜，撈具上設有頂魚裝置。

作為優(yōu)選，所述的撈魚過程中，保持撈具平衡，將親魚放入麻醉缸時，在撈具接觸缸底后將親魚從撈具中倒出。

作為優(yōu)選，所述的抱魚過程，對于個體偏大的鱘魚，采取雙臂成90度的托舉方式。

作為優(yōu)選，所述的腹部取樣位置：若第四骨板太靠前，超過胸鰭與腹鰭三分之一，則在胸鰭和腹鰭三分之一處開口。

作為優(yōu)選，所述的雌雄觀察鑒別時，若有脂肪層擋住觀察的性腺組織，則用探針工具把脂肪撥開觀察。

本發(fā)明的有益效果是：通過腹部側(cè)開口微創(chuàng)手術鑒別低齡鱘魚雌雄，使技術人員更清楚地觀察到鱘魚性腺發(fā)育情況，準確判斷性別，提高鑒別準確率；本發(fā)法將鑒別魚齡提前一年及一年以上，可以更早地售出雄性鱘魚，降低飼養(yǎng)成本；縮小了開口手術創(chuàng)口長度，創(chuàng)口無需縫合，加快傷口愈合速度，提高術后存活率；能快速、準確地鑒別鱘魚性別，提高鑒別效果；操作方便、實用性強，滿足鱘魚增養(yǎng)殖、科研等工作中的性別鑒別的需求。

具體實施方式

下面通過實施例，對本發(fā)明的技術方案作進一步具體的說明。

本實施例一種低齡鱘魚腹部側(cè)開口雌雄鑒別技術，包括以下步驟：

一、鑒別前的準備工作

1.停食：待鑒別鱘魚必須停食7天以上；整個鑒別過程選擇在18℃以下水溫中進行。

2.準備以下設施及工具：空網(wǎng)箱、撈具、麻醉缸、麻醉劑、量具、擔架、魚用手術臺、紙巾、手術刀、刀片、鑒別器、取卵器、顯微鏡、載玻片、消毒液、燒杯。其中手術刀為尖頭型手術刀，撈具具有橢圓形撈口，且設有能容下整尾待鑒別鱘魚魚身的網(wǎng)兜，撈具上設有軟質(zhì)頂魚裝置。

3.集箱：將待鑒別鱘魚進行集合，集箱時應注意鱘魚的單位密度，在保證鱘魚不缺氧的前提下，逐步縮小箱體，不可集箱過緊，以免擦傷魚體。

4.撈魚：撈魚過程中，用撈具一端的軟質(zhì)頂魚裝置頂住魚頭，使魚腹部落入網(wǎng)兜中，使魚體呈“u”字型然后撈起。將鱘魚從網(wǎng)箱中撈起至麻醉缸的過程中，盡量保持撈具平衡，保證鱘魚在掙扎過程中不會掉出網(wǎng)兜外而摔傷，動作輕且快；將親魚放入麻醉缸過程中，在撈具接觸缸底時才能將親魚從撈具中倒出。

二、待鑒別鱘魚的麻醉

1.配置麻醉液：使用丁香油作麻醉劑，按照油水之比為1:10000進行配比，即100升的水配10毫升的丁香油。

2.麻醉：鱘魚放入麻醉缸后，受麻醉液的刺激會激烈游動1分鐘左右，之后緩慢游動，大約2-3分鐘后進入暈睡狀態(tài)；鱘魚進入麻醉狀態(tài)后表現(xiàn)為身體失去平衡，呈現(xiàn)腹部朝上或背部朝上狀態(tài)。當背部朝上時可人為翻轉(zhuǎn)，使魚體腹部朝上，若魚體腹部朝上后沒有反應，則說明魚體已被麻醉，反之，則需繼續(xù)麻醉；麻醉后的魚體一般可持續(xù)沉睡15分鐘，因此鑒別操作過程也應在15分鐘內(nèi)完成。

3.抱魚：因鱘魚是軟骨魚類，已麻醉或是未麻醉的鱘魚由于掙扎會導致?lián)p傷甚至發(fā)生畸形。抱魚時必須遵守一個原則就是使鱘魚不受任何損傷的姿勢。常用的正確抱魚姿勢為：右手握住魚尾使尾柄朝上，魚背朝外，魚腹朝下，左手輕托魚腹，并用肘部夾住魚頭。對于個體偏大的鱘魚，可以采取雙臂成90度的托舉方式。

三、腹部側(cè)開口

1.腹部取樣位置：取樣者腹部與魚用手術臺上的鱘魚腹部相對時，鱘魚頭部在取樣者左手邊為腹部取樣標準姿勢，在鱘魚的腹鰭往胸鰭方向第三與第四骨板之間進行取樣，如果第四骨板太靠前，超過胸鰭與腹鰭三分之一，則在胸鰭和腹鰭三分之一處開口，而不管是否在第三和第四骨板之間。

2.腹部開口操作：右手握住手術刀柄并伸出食指頂住手術刀片，指尖與刀片尖端距離約為1cm作為深度定位操作，找到取樣部位后將刀片沿魚體平行的方向插入，開一個長為1-2cm的刀口。由于鱘魚肉厚，初插入時不一定穿透，右手用力插的同時要細心感覺，當有忽然穿空的感覺時，證明已穿透魚體壁進入體腔。

四、雌雄鑒別觀察

1.用鑷子輕輕扒開切口觀察性腺，若脂肪表層下埋一條邊沿褶皺且為淡黃色的粗線則為雌魚的卵巢，卵巢表面質(zhì)地較軟，富有褶皺和分葉，卵粒隱約可見。若脂肪層出現(xiàn)兩排由許多白色包囊組成的條帶則為雄魚的精巢，精巢為白色，表面豐滿光滑，質(zhì)地較硬，呈棒狀或塊狀。此過程中，如果有脂肪層擋住觀察的性腺組織，則用探針等工具把脂肪撥開觀察。

2.清潔與消毒：每次切口后必須將手術刀等鑒別工具放入盛有75％酒精的燒杯中涮洗，進行清潔與消毒，避免相互感染；之后用紙巾擦干凈以避免遺留上一尾鱘魚的性腺殘留物而影響下一尾取樣檢查與判斷。

五、鑒別后的復蘇及恢復

1.放魚與醒魚：將鑒別后的雄魚、雌魚或少量不確定雌雄的鱘魚分別抱入預備好的且具有明顯標記的空網(wǎng)箱；放魚時使魚體盡量貼近空網(wǎng)箱的水面，慢慢將魚體放入水中；密切觀察鱘魚蘇醒狀況，完全復蘇所需時間一般在3-4分鐘，對蘇醒過慢的鱘魚采取輕輕晃動、按摩、清洗腮部等措施加快其蘇醒。

2.創(chuàng)口處理：創(chuàng)口無需縫合，直接放歸養(yǎng)殖池中，鱘魚鑒別后3天內(nèi)不予喂食。同時派專人護理，仔細觀察有無傷口發(fā)炎癥狀，如發(fā)現(xiàn)應撈出放入玻璃鋼魚池或小網(wǎng)箱中進行特別消炎治療，直至半月后傷口愈合良好，恢復正常活動這止。

上述實施例是對本發(fā)明的說明，不是對本發(fā)明的限定，任何對本發(fā)明的簡單變換后的結(jié)構(gòu)、方法等均屬于本發(fā)明的保護范圍。