本發明屬于種子萌發領域，具體涉及一種梅花種子萌發方法。

背景技術：

梅花(prunusmume)是薔薇科(rosaceae)李屬(prunus)花卉，在中國栽培歷史悠久，用途廣泛，具有很高的觀賞價值和實用價值。

由于觀賞梅花自身存在結果率低、萌發率低等的問題，在觀賞梅花雜交育種過程中能夠收獲的種子數量有限。另外，由于梅花屬于核果類，硬化的內果皮(種殼)及種子各部位的抑制物成為了影響梅花種子萌發率和萌發時間的主要因素，給梅花的實生選種帶來極大的不便。目前，已有大量關于核果類果樹，如桃、杏、李等種子萌發的研究，也取得了一些成果。但是，不同物種之間種子的生理休眠時間以及打去休眠時間的條件不一致。梅花雜交育種中，多采用傳統的帶殼低溫沙藏的方法來解除休眠，種子萌發率低，萌發率多在50％以下(數據來源于本實驗室孫麗丹博士論文)，而且不同品種間雜交種子的萌發率差異較大，使得最后能獲得的雜交苗較少，嚴重制約了梅花雜交育種進程。

此外，梅花傳統的冷藏播種方法歷時較長，從采種、沙藏到出苗需歷時半年以上，無法實現當年采種當年出苗。而且，在長時間的冷藏過程中，部分種子直接腐爛在種殼中，也是造成梅花種子萌發率低的主要原因之一，這些不利因素極大的制約了梅花新品種的選育和實生選種。因此，快速解除梅花種子休眠和提高種子萌發率，對于梅花育種及生產實踐具有重要意義。

韓雪平(韓雪平,薛曉敏,王金政.赤霉素和低溫層積處理對金太陽杏種子萌發的影響[j].安徽農業科學,2017,45(8):24-25.)以金太陽杏種子為材料，經過1500-2000mg/l的ga3處理帶殼種子24h的萌發率最高，可達60％；而去殼種子容易滋生細菌而腐爛，用100mg/l的ga3處理，萌發率為20％-30％。

杜廣云(杜廣云,宋建偉,張躍武.桃、李、杏種子發芽試驗初報[j].落葉果樹,1985,1.)在李屬植物桃、李、杏的研究中，認為種子去殼后，ga3濃度在300-500mg/l之間都不會抑制種子萌發，去殼帶皮種子萌發率為30％-40％。

刁永強(刁永強,廖康,許正,等.影響野生杏種子萌發的相關因素研究初報[j].北方園藝,2008(4):27-30.)經過100-300mg/lga3處理去殼后的野生杏種子，4℃條件下，層積40d，種子萌發率為30％-70％；層積80d，種子萌發率為60％-90％。

上述三種方法，均對李屬植去殼種子的萌發，均經過了去殼、不同濃度的ga3處理以及沙藏低溫層積處理，在一定程度上提高了種子的萌發率，但是種子和基質未經消毒或消毒不徹底，會導致種子腐爛，反而使萌發率降低或萌發時間不一致，導致其無法應用于生產實踐中。

技術實現要素：

本發明的目的是提供一種梅花種子的萌發方法，包括如下步驟：

1)將梅花種子去殼；

2)用赤霉素對去殼后的梅花種子進行浸泡處理；

3)用次氯酸鈉對浸泡處理后的梅花種子進行消毒處理；

4)將消毒處理后的梅花種子播種于消毒后的蛭石基質中，在4℃條件下冷藏45～60d。

通過上述方法處理后，種子的胚根可萌發至2～5cm。

本發明的方法通過對梅花種子去殼后進行消毒和低溫處理，有效地抑制菌的生長，減少冷藏過程中的種子腐爛，且在蛭石中生長時，種子接受的水分均勻，可有效地提高種子萌發率，縮短萌發時間。

優選的，本發明所述的方法中，用赤霉素進行浸泡處理的具體操作為，用濃度為0.5～1mg/ml的赤霉素溶液，在4℃條件下浸泡去殼后的種子22～26h。在低溫條件下用赤霉素處理種子，可防止種子在常溫條件下浸泡產生腐爛，同時也有利于解除種子休眠。

優選的，本發明所述的方法中，消毒處理的具體操作為，將赤霉素浸泡處理后的種子浸于濃度為3％的次氯酸鈉溶液中12～18min。

在實際操作中，處理完成后需用無菌水洗滌去除種子表面的殘留的次氯酸鈉。這種操作可防止種子冷藏過程中因染菌而腐爛。

優選的，本發明所述的方法，所述蛭石基質中的含水量為75～80％。現有的培養基質種類眾多，如砂土、草炭和珍珠巖等，但是不同的基質的持水能力和通氣能力不同。選擇蛭石作為基質，并調節上述的含水量，可為種子萌發長出胚根后提供生長所需的適宜水分和氧氣，也不會因上下層水分分布不均勻可能造成的種子萌發不一致和種子腐爛提高后期的出苗率。

優選的，所述蛭石基質的厚度為3～5cm。調節上述的厚度可保證基質的良好通氣效果。

所述蛭石基質的具體制備和消毒方法為：

1)基質處理：將蛭石噴灑蒸餾水調節含水量為75～80％，然后將基質裝于組培瓶或播種盤中，厚度為3-5cm；

2)基質消毒：將裝有基質的組培瓶或播種盤，利用高壓蒸汽滅菌(121℃，20min)后，放置于組培間中待其自然冷卻至室溫，為下一步種子冷藏萌發做準備。

優選的，所述種子在蛭石基質中播種的過程中，控制種子間距為1～2cm，播種深度為1.5～2cm。這種操作可防止種子離得太近而導致腐爛，同時可減少個別種子染菌而感染其他種子，還可為種子的生長提供足夠的氧氣。

優選的，冷藏過程中用保鮮膜對盛有蛭石基質的培養容器進行封口。該步驟有益效果在于保障瓶內含水量穩定，同時防止外部環境中的菌進入瓶內而引起種子腐爛。

優選的，所述梅花種子由如下方法制備得到：將成熟果實去除果肉，得到鮮種子，將鮮種子在室內晾3～5d。這樣操作可讓種子失水收縮，方便破殼處理。

優選的，本發明所述的方法包括如下步驟：

1)將梅花種子進行去殼處理；

2)用濃度為0.5～1mg/ml的赤霉素溶液，在4℃條件下浸泡的述去殼后的種子24h；

3)將赤霉素浸泡處理后的種子浸于濃度為3％的次氯酸鈉溶液中15min，進行消毒處理，用蒸餾水洗滌去除種子表面殘留的次氯酸鈉；

4)將消毒處理后的梅花種子播種于消毒后的蛭石基質中，在4℃條件下冷藏45～60d；所述蛭石基質中的含水量為75～80％，厚度為3～5cm；所述播種的過程中，控制種子間距為1～2cm，播種深度為1.5～2cm；冷藏過程中用保鮮膜對盛有蛭石基質的培養容器進行封口。

采用本發明的方法萌發后的種子，可在后期繼續接種于育苗基質或大田中，具體操作為：

待種子胚根萌發至3-5cm，將育種容器移至人工氣候室(溫度23℃，濕度60-70％)，將種子定植于育苗盆中，繼續正常出苗培養。

或者進行大田播種，種子胚根萌發至2-3cm，開種植溝，溝深15-20cm，播種間距20cm×20cm，覆土厚度5-7cm，用水漫灌，澆透。

本發明具有以下優點及有益效果：

(1)從單個的步驟來看，無論是破殼處理、赤霉素處理還是消毒處理，均是本領域在育種過程中可進行的選擇。但是針對于不同的種子，不同的處理方式和處理條件最終的萌發效果差別非常大，如某些植物的種子若進行破殼育種，其腐爛率非常高。針對于梅花種子，本申請提出了破殼處理，赤霉素和消毒處理相結合的前處理方式，并且用蛭石來替代萌發過程中常用的基質砂土，可滿足梅花在生長過程中對氧氣和水分的需求，可有效地降低腐爛率，最終提高種子的萌發率。

(2)本發明方法具有種子萌發率高(95％以上)、種苗移栽成活率高(100％)、萌發周期短(2個月左右)和萌發整齊，無論后期將萌發的種子接種于培養基質中還是大田中，均具有較好效果。

(3)本發明對材料和設備要求低，操作簡單易行，能夠為梅花雜交育種和實生選育服務，可加快梅花新品種選育，縮短育種周期；同時，本技術發明也有望成為工廠化大規模生產實生苗的簡便、快捷技術體系，為李屬果樹和李屬觀賞樹木提供大量的嫁接砧木。

附圖說明

圖1為本發明實施例1處理組梅花種子萌發。

圖2為本發明實施例1處理組萌發種子煉苗定植。

圖3為本發明對比例1常規方法種子萌發情況。

圖4為本發明實施例1與對比例1種苗株高(a)、地徑(b)生長指標比較。

圖5為本發明實施例1與對比例1種苗生長狀況比較。

圖6為本發明實施例2處理組梅花種子萌發。

圖7為本發明實施例2大田播種開溝漫灌方式。

圖8為本發明實施例2大田播種中處理組與常規方法比較。

具體實施方式

以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。

實施例1

種子來源：‘單粉垂枝’梅自然授粉種子。

采集地：北京鷲峰國際梅園

試驗種子數量：100粒

試驗地點：北京林業大學國家花卉工程技術研究中心實驗室

種子處理方法：

(1)收獲成熟果實，去除果肉，室內晾5d，去殼，取出種子

(2)經0.5mg/ml的ga3溶液于4℃條件下處理24h；

(3)將種子用3％的次氯酸鈉消毒15min，用蒸餾水洗滌3次，每次洗滌2～3min。

(4)將消毒后的種子，點播在組培瓶中，種子間隔約為1-2cm；用保鮮膜包將育苗瓶口包緊，置于4℃條件下冷藏，冷藏時間為45d～60d，種子胚根萌發至3-5cm(圖1)，將組培瓶移至溫室(溫度23℃，濕度60-70％)，將種子定植于育苗盆中(圖2)。后期進行常規的水肥管理。

對比例1

將收獲后的種子置于4℃條件下處理沙藏3個月以上，然后播種于育苗盆中，生長和管理條件同處理組相同。

結果分析：實施例1的種子萌發率達到95％以上，且萌發種子的出苗率為100％，出苗整齊壯實；而對比例1的方法，種子萌發率低，萌發率在50％以下，出苗時間不整齊(圖3)。對后期種苗生長狀況進行跟蹤觀察，兩種方法種苗的株高和地徑，二者差異顯著(圖4、圖5)。

實施例2

本發明方法和常規播種方法的田間對比

種子來源：‘六瓣梅’(♀)ב粉臺垂枝’(♂)f1自然結果種子。

采集地：浙江德清

試驗種子數量：500粒

試驗地點：河北雄縣基地

種子處理方法：

(1)收獲成熟果實，去除果肉，果核室內晾5d，去除梅花種殼，取出種子；

(2)經1mg/ml的ga3溶液于4℃條件下處理24h；

(3)將種子用3％的次氯酸鈉消毒15min，用蒸餾水洗滌3次，每次洗滌2～3min。

(4)將消毒后的種子，點播在組培瓶中，種子間隔約為1-2cm；用保鮮膜包將育苗瓶口包緊，置于4℃條件下冷藏，冷藏時間為45d～60d，種子胚根萌發2-3cm如圖6，取出種子播種于田間，溝深15-20cm，播種間距20cm×20cm，覆土厚度5-7cm，用水漫灌，澆透。之后進行常規管理。

對比例2

將收獲后的種子置于4℃條件下沙藏3個月以上，取出種子播種于田間，溝深15-20cm，播種間距20cm×20cm，覆土厚度5-7cm，用水漫灌，澆透(圖7)。之后進行常規管理。

結果分析：實施例2和對比例2結果對比發現，實施例1種子萌發率高，萌發率約為96％，出苗整齊，苗生長健壯(圖8b)；而傳統冷藏處理方法萌發率低，出苗不整齊。(圖8a)。

雖然，上文中已經用一般性說明、具體實施方式及試驗，對本發明作了詳盡的描述，但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發明要求保護的范圍。