專利名稱：一種草菇菌渣腐殖質化專用復合菌劑及其制作方法
技術領域：
本發明涉及一種草菇菌渣腐殖質化專用復合菌劑及其制作方法。
背景技術：
菌渣是食用菌栽培過程中收獲產品后剩下的培養基廢料。食用菌的栽培料中富含木質素、纖維素等，在食用菌的生長過程中，這些營養物質被分解為糖類和碳氮化合物等， 一部分被菌絲吸收利用，還有一部分殘留在菌渣中。食用菌栽培結束后，菌渣中還殘留大量的菌絲體，可以作為很好的花卉栽培肥料或者直接用作栽培基質。如果不做科學處理的將菌渣隨意丟棄，不僅浪費資源還容易造成霉菌和害蟲滋生，帶來嚴重的環境污染問題。隨著無公害食品、綠色食品和有機食品的迅猛發展，利用農業廢棄物生產有機肥料已成為有機肥料的發展方向。我國是食用菌生產大國，每年產生600萬噸以上的菌渣，菌渣不僅含有大量的營養物質，而且處理不當還會造成嚴重環境污染，因此食用菌渣的合理處置成為一項緊迫的問題。目前對食用菌渣的處理方法有二次種菇、無土栽培基質、加工菌糠飼料、加工生物有機肥、用作燃料等。本研究結合草菇菌渣中的營養物質和微生物的生物學特性，開發出一種能夠充降解草菇菌渣中不易被植物利用的營養物質的專用復合菌劑，從根本上解決草菇菌渣生物利用率低的缺點，縮短其無害化、資源化處理的時間，提高堆肥質量。

發明內容
本發明提供一種草菇菌渣腐殖質化專用復合菌劑及其制作方法。草菇菌渣腐殖質化專用復合菌劑，包括菌粉A、菌粉B;菌粉A用于草菇菌渣的堆慪階段，菌粉B作為輔助益生菌添加到堆慪后的草菇菌渣。菌粉A、菌粉B制作方法如下菌粉A 將培養14 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的施氏假單胞菌ACCC 01977 (ACCC，中國農業微生物菌種保藏管理中心)、枯草芽孢桿菌ACCC 11089、黃孢平革菌 ACCC 30414按體積比1 1 1混合，混合以后，按接種量10% (V/V)接入無菌液體培養基中。培養基條件(w/v) 豆粕、1.5%玉米粉糖化液&八)、2(%葡萄糖、0.3(%1^2 04、 0. 15% MgS04、pH7. 0、發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ；培養36h后菌液經80目過濾器過濾，在濾液中添加濾液重量13% 16%的多孔淀粉，濾液重量14 16%的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，經噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑。平板計數法檢測菌數，施氏假單胞菌ACCC01977、枯草芽孢桿菌ACCC11089、黃孢平革菌ACCC 30414 活菌落數分別為1. 3 3. 3X10lclCFU/g、5. 9 9. . 1 X 10lclCFU/g、1. 8 4. 5X10nCFU/g, 將所得菌粉真空包裝即為菌粉A。菌粉B由菌粉1、菌粉2組成。菌粉1 將培養12 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的蠟狀芽孢桿菌 CGMCC1. 2223 (CGMCC，中國普通微生物菌種保藏管理中心)菌液按體積比1 10比例接種于無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) 玉米粉糖化液(ν/ν)，1%蛋白胨、0.3%牛肉膏、0. 02%NaCl,pH7. 0 7. 2、發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min,溶氧20% ；培養36h后過 80目過濾器，在濾液中分別加入濾液重量13% 16%的多孔淀粉，14 16%的麥芽糊精及 0. 1 %聚乙烯吡咯酮，噴霧干燥后，添加濾液重量4 %過磷酸鈣做填充劑，即為蠟狀芽孢桿菌 CGMCC 1. 2223菌劑。平板計數法檢測菌數，得環狀芽孢桿菌活菌數為3. 7 6. 9X IOltlCFU/菌粉2 將培養12 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的褐色球形固氮菌 CGMCC1.233(CGMCC，中國普通微生物菌種保藏管理中心)菌液按體積比1 10比例接種于無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) :0. 05%酵母粉，0. 2%甘露醇、0. 02% ΚΗ2Ρ04、0. 02% MgS04、0. 08% K2HP04/0. 01% CaSO4、微量的三氯化鐵和2水合鉬酸鈉、pH7. 0 7. 2、發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ；培養4 后過80目過濾器，在濾液中分別加入濾液重量13% 16%的多孔淀粉，14 16%的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，噴霧干燥后， 添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，即為環狀褐色球星固氮菌CGMCC1. 233菌劑。平板計數法檢測菌數，得環狀芽孢桿菌4. 5 7. 8X 101(lCFU/g。將菌粉1、2按1 1(重量)混合，經真空包裝即為菌劑B。草菇菌渣專用菌粉A和菌粉B分別用于草菇菌渣的發酵菌和作為發酵后的輔助益生菌，使用本復合菌劑可以明顯縮短菌渣的堆慪周期，加快堆慪過程中木質素、纖維素、半纖維素等難于被植物和動物利用的大分子物質降解，從而使菌渣發酵后，其營養物質能夠更加快速，更加徹底的被動植物利用。通過菌粉B的使用，增加了菌渣中固氮微生物，溶磷、 鉀微生物的數量，提高了對無機氮、磷、鉀的利用率，減少化學肥料使用，節約成本，保護環
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具體實施例方式以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。本發明中所用微生物材料均為公知常用材料，公眾都可從相關保藏機構購買。本發明提供了一種草菇菌渣微腐殖質化菌劑及其制作方法。該微生物菌劑包括菌粉A、菌粉B，其制作方法為菌粉A 將培養14 16h，菌體濃度為IO7 108CFU/mL的施氏假單胞菌ACCC 01977、IO7 l(fCFU/mL的枯草芽孢桿菌ACCC 11089、IO7 l(fCFU/mL的黃孢平革菌 ACCC30414按體積比1 1 1混合，混合以后，按接種量10 % (V/V)接入無菌液體培養基中。培養基條件(w/v) 豆粕、1.5%玉米粉糖化液&八)、2(%葡萄糖、0.3(%1^2 04、 0. 15% MgSO4, pH7. 0、發酵溫度37 °C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ；培養36h后菌液經 80目過濾器過濾，在濾液中添加濾液重量13% 16%的多孔淀粉，濾液重量14 16%的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，經噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，將所得菌粉真空包裝即為菌粉A。平板計數法檢測菌數，施氏假單胞菌ACCC01977、枯草芽孢桿菌ACCCl 1089、黃孢平革菌ACCC 30414活菌落數分別為1. 3 3. 3X 10lclCFU/g、5. 9 9. . 1 X 10lclCFU/g、1. 8 4. 5 X 10"CFU/g。菌粉B由菌粉1、菌粉2組成。菌粉1 將培養12 16h，菌體濃度為IO7 108CFU/mL的蠟狀芽孢桿菌CGMCC 1.2223菌液按體積比1 10比例接種于無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) 玉米粉糖化液(ν/ν)，蛋白胨、0. 3%牛肉膏、0. 02% NaCl、pH7. 0 7. 2、發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ；培養3 后過80目過濾器，在濾液中分別加入濾液重量13% 16%的多孔淀粉，14 16%的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，噴霧干燥后，添加濾液重量 4%過磷酸鈣做填充劑，即為蠟狀芽孢桿菌CGMCC 1.2223菌劑。平板計數法檢測菌數，得環狀芽孢桿菌3. 7 6. 9X1010CFU/go菌粉2 將培養12 16h，菌體濃度為IO7 108CFU/mL的褐色球形固氮菌 CGMCC1.233菌液按體積比1 10比例接種于無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) 0. 05%酵母粉，0. 2%甘露醇、0. 02% ΚΗ2Ρ04、0· 02% MgS04、0. 08% Κ2ΗΡ04/0. 01% CaSO4、微量的三氯化鐵和2水合鉬酸鈉、pH7. 0 7. 2、發酵溫度37 °C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ； 培養4 后過80目過濾器，在濾液中分別加入濾液重量13% 16%的多孔淀粉，14 16% 的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，即為環狀褐色球星固氮菌CGMCC1. 233菌劑。平板計數法檢測菌數，得環狀芽孢桿菌4. 5 7. 8X10lclCFU/g。將菌粉1、菌粉2按1 1(重量)混合，經真空包裝即為菌劑B。使用時，第一階段，按照菌粉A 菌渣=1 500的質量比例將菌粉A接入菌渣， 混勻，補水至濕度為60%。然后將處理后的菌渣堆砌成高50cm，寬70cm，長120cm的梯形堆體，并在堆肥的第5d、15d、25d、35d、45d進行人工翻堆。并在堆置過程中每天觀察水分的散失情況，如果水分過低，立即補水，堆置時間為45天。第二階段，將菌粉B和經第一階段堆慪后的菌渣按照質量比1 500混勻，補水至濕度為60%。然后將處理后的菌渣堆砌成高50cm，寬70cm，長120cm的梯形堆體，并在堆肥的第5d、10d、15d進行人工翻堆。并在堆置過程中每天觀察水分的散失情況，如果水分過低，立即補水，堆置時間為15天。堆肥后的有機菌肥全N含量比堆肥初期增加了 71. 30%，全P含量比堆肥初期增加了 125. 53%，全K含量比堆肥初期增加了 57.37%。將該菌肥應用到栽培玫瑰花、百合花， 均表現出葉色濃綠，葉片厚而挺拔，植株生長矮壯；玫瑰單株每批開花量增加34. 15%，花期延長1. 6d，病株率減少6. 28% ；百合花的單株每批開花量增加31. 03%，花期延長2. 2d， 病株率減少4. 40%。因此，可以作為可很好的花卉栽培肥料或者直接用作栽培基質。應當理解的是，對本領域普通技術人員來說，可以根據上述說明加以改進或變換， 而所有這些改進和變換都應屬于本發明所附權利要求的保護范圍。
權利要求
1.一種草菇菌渣腐殖質化專用復合菌劑，其特征在于，包括菌粉A、菌粉B ；菌粉A用于草菇菌渣的堆慪階段，菌粉B作為輔助益生菌添加到堆慪后的草菇菌渣；菌粉A 將培養 14 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的施氏假單胞菌、枯草芽孢桿菌、黃孢平革菌按體積比1 1 1混合，混合以后，按接種量10% (V/V)接入無菌液體培養基中，培養基條件 (w/v) 豆粕、1. 5%玉米粉糖化液(v/v)、2%葡萄糖、0. 3% ΚΗ2Ρ04、0· 15% MgS04、pH7. 0、 發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ；培養3 后菌液經80目過濾器過濾，在濾液中添加濾液重量13% 16%的多孔淀粉，濾液重量14 16%的麥芽糊精及0. 1%聚乙烯吡咯酮，經噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，即為菌粉A ；菌粉B由菌粉1、菌粉2組成；菌粉1 將培養12 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的蠟狀芽孢桿菌菌液按體積比1 10比例接種于無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) 玉米粉糖化液(ν/ν)，1% 蛋白胨、0. 3%牛肉膏、0. 02% NaCl、ρΗ7· 0 7. 2、發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min，溶氧20%;培養3 后過80目過濾器，在濾液中分別加入濾液重量13% 16%的多孔淀粉， 14 16%的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，即為菌粉1 ；菌粉2 將培養12 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的褐色球形固氮菌菌液按體積比1 10比例接種于無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) :0. 05%酵母粉，0.2%甘露醇、0. 02% KH2PO4^O. 02% MgSO4^O. 0g% K2HP04/0. 01 % CaS04、微量的三氯化鐵和 2 水合鉬酸鈉、PH7.0 7. 2、發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ；培養4 后過80目過濾器，在濾液中分別加入濾液重量13% 16%的多孔淀粉，14 16%的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，即為菌粉2 ；將菌粉1、2按 1 1的重量比例混合，經真空包裝即為菌劑B。
2.草菇菌渣腐殖質化專用復合菌劑的制作方法，其特征在于，包括菌粉A、菌粉B；菌粉 A用于草菇菌渣的堆慪階段，菌粉B作為輔助益生菌添加到堆慪后的草菇菌渣；菌粉A 將培養14 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的施氏假單胞菌、枯草芽孢桿菌、黃孢平革菌按體積比1 1 1混合，混合以后，按接種量10% (V/V)接入無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) 豆粕、1. 5%玉米粉糖化液(v/v)、2%葡萄糖、0. 3% ΚΗ2Ρ04、0· 15% MgS04、 pH7. 0、發酵溫度37 °C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ；培養3 后菌液經80目過濾器過濾， 在濾液中添加濾液重量13% 16%的多孔淀粉，濾液重量14 16%的麥芽糊精及0. 1% 聚乙烯吡咯酮，經噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，即為菌粉A ；菌粉B由菌粉1、菌粉2組成；菌粉1 將培養12 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的蠟狀芽孢桿菌菌液按體積比1 10比例接種于無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) 玉米粉糖化液(ν/ν)，1% 蛋白胨、0. 3%牛肉膏、0. 02% NaCl、ρΗ7· 0 7. 2、發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min，溶氧20%;培養3 后過80目過濾器，在濾液中分別加入濾液重量13% 16%的多孔淀粉， 14 16%的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，即為菌粉1 ；菌粉2 將培養12 16h，菌體濃度為IO7 108CFU//mL的褐色球形固氮菌菌液按體積比1 10比例接種于無菌液體培養基中，培養基條件(w/v) :0. 05%酵母粉，0.2%甘露醇、0. 02% KH2PO4^O. 02% MgSO4^O. 08% K2HP04/0. 01 % CaS04、微量的三氯化鐵和 2 水合鉬酸鈉、PH7.0 7. 2、發酵溫度37°C，攪拌轉速120r/min，溶氧20% ；培養4 后過80目過濾器，在濾液中分別加入濾液重量13% 16%的多孔淀粉，14 16%的麥芽糊精及0. 聚乙烯吡咯酮，噴霧干燥后，添加濾液重量4%過磷酸鈣做填充劑，即為菌粉2 ；將菌粉1、2按 1 1的重量比例混合，經真空包裝即為菌劑B。
全文摘要
本發明公開了一種草菇菌渣腐殖質化專用復合菌劑，包括菌粉A、菌粉B；菌粉A用于草菇菌渣的堆漚階段，菌粉B作為輔助益生菌添加到堆漚后的草菇菌渣；草菇菌渣專用菌粉A和菌粉B分別用于草菇菌渣的發酵菌和作為發酵后的輔助益生菌，使用本復合菌劑可以明顯縮短菌渣的堆漚周期，加快堆漚過程中木質素、纖維素、半纖維素等難于被植物和動物利用的大分子物質降解，從而使菌渣發酵后，其營養物質能夠更加快速，更加徹底的被動植物利用。通過菌粉B的使用，增加了菌渣中固氮微生物，溶磷、鉀微生物的數量，提高了對無機氮、磷、鉀的利用率，減少化學肥料使用，節約成本，保護環境。
文檔編號C12N1/14GK102557767SQ20111042471
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月19日 優先權日2011年12月19日
發明者向文良, 張良, 李可, 李宗堂, 李明元, 田偉, 肖奎, 車振明, 邢亞閣 申請人:成都榕珍菌業有限公司, 西華大學