專利名稱：一種黃原膠的發酵生產方法
技術領域：
本發明涉及一種發酵生產方法，具體是一種黃原膠的發酵生產方法。
背景技術：
黃原膠(Xanthan gum)是美國農業部北方研究室在20世紀50年代發現的一種細菌胞外多糖，由野油菜黃單胞菌(Xanthomonas campestris)以碳水化合物為主要原料經好氧發酵而產生。黃原膠為乳白、淡黃至淺褐色顆粒或粉末狀體，微臭，易溶于水，水溶液呈中性，為半透明體。1969年美國FDA批準黃原膠可用做食品添加劑，1983年世界衛生組織和國際糧農組織批準黃原膠可作為食品工業中的穩定劑、乳化劑、增稠劑。它是目前世界上生產規模最大且用途最為廣泛的微生物多糖，是一種多功能的生物高分子聚合物。目前可生產黃原膠的菌種主要有野油菜黃單胞菌菌株(Xanthomonas campestris)，野油菜黃單胞桿菌(Xanthomonas campestris) XG30-1，野油菜黃單胞菌(Xanthomonas campestris) XG-10，甘藍黑腐黃單孢菌SUB-Il (Xanthomonas campestris SUB-11)，野油菜黃單胞菌 (Xanthomonas campestris)9902,甘藍黑腐病黃單胞菌 NK-Ol (Xanthomonas Campestris NK-01)野油菜黃單胞菌(Xanthomonas campestris)QH79, Xanthomonas campestris CGMCC 1. 1781, Xanthomonas oryzae KACC10859, Xanthomonas campestris NRRL B—1459, Xanthomonas campestris TISTR 840,Xanthomonas albilineans NCPPB 887,Xanthomonas campestris ATCC13951, Xanthomonasfragaria 1822, Xanthomonas gummisudans 2182, Xanthomonas juglandis 411,Xanthomonas phaseoli 1128,Xanthomonas vasculorum 702 等。可見生產黃原膠的菌種主要屬于野油菜黃單胞菌屬，野油菜黃單胞菌野油菜致病變種 8004(Xanthomonas campestris pv. campestris 8004,Xcc 8004), 07^ ^ 外多糖，并未見以Xcc8004為出發菌株進行黃原膠生產相關文獻報道，目前黃原膠生產主要以玉米淀粉為原料，產量大多在1.5% 3.0%之間，本文以)(CC8004為出發菌株，采用廣西獨特的蔗糖資源為碳源，黃豆粉為氮源，外加少量碳酸鈣維持PH，取得了良好的效果。

發明內容
本發明的目的是提供一種廉價、生產成本低的黃原膠的發酵生產方法。本發明解決上述技術問題的技術方案如下一種黃原膠的發酵生產方法，操作包括以下步驟1. Xcc8004種子培養基的培養種子培養基組成為蔗糖1 2g，蛋白胨0. 3 0. 5g，磷酸氫二鉀0. 2 0. 3g，水 IOOml。種子液用250ml廣口三角瓶裝液量50ml，培養溫度為沈 30°C，搖床轉速為180 220rpm，培養時間為16 20h，種子檢查標準為鏡檢無雜菌。2. Xcc 8004 發酵培養發酵培養基成分為蔗糖4. 5 5. 5g，黃豆粉0. 4 0. 5g，碳酸鈣0. 2 0. 4g，水 IOOrnl，pH7. 5。發酵液用250ml廣口三角瓶裝液量50ml，接種量為發酵液體積的2 % 6 %，溫度為觀 33°C，搖床轉速220rpm，發酵時間為70 80h。3.黃原膠的分離1)將發酵完的發酵液加自來水稀釋5倍，在10000轉/分鐘條件下離心30分鐘。2)將經過步驟1)離心的上清液加入上清液體積的4%飽和氯化鉀溶液和上清液體積1倍體積百分濃度為95%的乙醇，并用NaOH或者HCl溶液調節pH到6. 0，攪拌過濾得到沉淀。3)將經過步驟2)的沉淀于60 80°C干燥，即可得到食品級的黃原膠。上述的Xcc8004種子是野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004 (Xanthomonas campestris pv. campestris 8004)。本發明的有益效果本發明采用廣西獨特的蔗糖資源為碳源，黃豆粉為氮源，外加少量碳酸鈣維持pH。 工藝簡單易行，原材料易得，生產成本低。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步描述。實施例1生產黃原膠的發酵方法步驟如下1.菌種野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004，購于英國植物病原細菌國家保藏中心(The National Collection of Plant Pathogentic Bacteria, NCPPB)，保藏號為 NCPPB No. 1145。2.培養基1)種子培養基蔴糖2g，蛋白胨0. 4g，磷酸氫二鉀0. 3g，水100ml，121°C滅菌20min2)搖瓶發酵培養基蔗糖5g，黃豆粉 0. 4g，碳酸鈣 0. 2g，水 100ml, ρΗ7· 5，121°C 滅菌 20min3.培養條件1)種子液250ml廣口三角瓶裝液量50ml，28°C搖床180rpm培養18h。2)搖瓶發酵250ml廣口三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養70h，在此條件下黃原膠含量達到沈g/Ι以上。4.發酵過程檢查1)種子檢查鏡檢無雜菌，無莢膜，菌種數量多。2)發酵液鏡檢菌體老化分裂，變小，發酵液不再變粘稠。5.儀器設備搖床ZHWY-200B型恒溫培養振蕩器滅菌鍋JXQ-LS-50SII型立式壓力蒸汽滅菌器干燥箱101-2_BS型電熱恒溫鼓風干燥箱6.測定方法1)粘度測定NDJ_5S型粘度計，3號轉子，60轉/min。2)黃原膠含量測定取IOg發酵液加自來水稀釋到50ml，IOOOOrpm離心30min，取上清，加入飽和氯化鉀溶液anl，溶解后加入95% (ν/ν)乙醇50ml并調節pH到6. 0，攪拌濾紙過濾得黃原膠沉淀，取沉淀60°C干燥至恒重。產品符合GB 13886-2007食品添加劑黃原膠相關標準。實施例2生產黃原膠的發酵方法步驟如下1.菌種野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004，購于英國植物病原細菌國家保藏中心 (The National Collection of Plant Pathogentic Bacteria，NCPPB)，保藏號為 NCPPB No.1145。2.培養基1)種子培養基蔗糖2g，蛋白胨 0. 5g，磷酸氫二鉀 0. 3g，水 100ml, 121°C滅菌 20min。2)搖瓶發酵培養基蔗糖4. 66g，黃豆粉 0. 5g，碳酸鈣 0. 33g，水 100ml, ρΗ7· 5，121°C滅菌 20min。3.培養條件1)種子液250ml廣口三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養18h。2)搖瓶發酵250ml廣口三角瓶裝液量50mlJ8°C搖床220rpm培養70h，在此條件下黃原膠含量達到沈g/Ι以上。4.發酵過程檢查與實施例1相同。5.儀器設備與實施例1相同。6.測定方法與實施例1相同。(1)粘度測定與實施例1相同。(2)黃原膠含量測定與實施例1相同。測定結果產品符合GB 13886-2007食品添加劑黃原膠相關標準。實施例3生產黃原膠的的發酵方法步驟如下1.菌種野油菜黃單胞菌野油菜致病變種8004，購于英國植物病原細菌國家保藏中心 (The National Collection of Plant Pathogentic Bacteria，NCPPB)，保藏號為 NCPPB No.1145。2.培養基1)種子培養基蔗糖2g，蛋白胨 0. 5g，磷酸氫二鉀 0. 3g，水 100ml, 121°C滅菌 20min。2)搖瓶發酵培養基蔗糖5. 5g，黃豆粉 0. 4g，碳酸鈣 0. 2g，水 100ml, ρΗ7· 5，121°C 滅菌 20min。3.培養條件(1)種子液250ml廣口三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養18h。(2)搖瓶發酵250ml廣口三角瓶裝液量50ml，30°C搖床220rpm培養70h，在此條件下黃原膠含量達到26g/l以上。
4.發酵過程檢查與實施例1相同。5.儀器設備與實施例1相同。6.測定方法與實施例1相同。1)粘度測定與實施例1相同。2)黃原膠含量測定與實施例1相同。 ] 加劑黃原膠相關標準。
g結果產品符合GB 13886-2007食品添
權利要求
1.一種黃原膠的發酵生產方法，其特征在于，操作包括以下步驟1)Xcc8004種子培養基的培養種子培養基組成為蔗糖1 2g，蛋白胨0. 3 0. 5g，磷酸氫二鉀0. 2 0. 3g，水 IOOml。種子液用250ml廣口三角瓶裝液量50ml，培養溫度為沈 30°C，搖床轉速為180 220rpm，培養時間為16 20h，種子檢查標準為鏡檢無雜菌；2)Xcc 8004發酵培養發酵培養基成分為蔗糖4. 5 5. 5g，黃豆粉0. 4 0. 5g，碳酸鈣0. 2 0. 3g，水 IOOml，pH7. 5 ；發酵液用250ml廣口三角瓶裝液量50ml，接種量為發酵液體積的2 % 6 %， 溫度為28 30°C，搖床轉速220rpm，發酵時間為70 80h ；3)黃原膠的分離(1)將發酵完的發酵液加自來水稀釋5倍，在10000轉/分鐘條件下離心30分鐘；(2)將經過步驟(1)離心的上清液加入上清液體積的4%飽和氯化鉀溶液和上清液體積1倍體積百分濃度為95%的乙醇，并調節pH到6. 0，攪拌過濾得到沉淀；(3)將經過步驟O)的沉淀于60 80°C干燥，得到食品級的黃原膠。
2.根據權利要求書1所述的黃原膠的發酵生產方法，其特征在于，所述的)(CC80048004(Xanthomonas campestris pv. campestris8004)。
全文摘要
本發明公開了一種黃原膠的發酵生產方法。方法通過Xcc8004種子培養基的培養、Xcc 8004發酵培養和黃原膠的分離得到食品級的黃原膠。本發明的有益效果本發明采用廣西獨特的蔗糖資源為碳源，黃豆粉為氮源，外加少量碳酸鈣維持pH。工藝簡單易行，原材料易得，生產成本低。
文檔編號C12R1/64GK102559803SQ20121005575
公開日2012年7月11日 申請日期2012年3月6日 優先權日2012年3月6日
發明者嚴偉, 唐紀良, 孫果宋, 文衍宣, 李群良, 楊克迪, 葛利, 黃科林, 龍云飛 申請人:廣西大學, 廣西新晶科技有限公司