專利名稱：一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法
技術領域：
本發明涉及一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，將茶多酚與脂肪酸こ烯酯在有機溶劑體系中經脂肪酶促催化反應，合成改性脂溶性茶多酚，屬于食品添加劑生物合成領域。
背景技術：
氧化是導致食品品質劣變的重要因素之一，氧化可使食品發生·退色、褐變、維生素破壞，降低食品品質和營養價值，甚至產生有害物質，引起食物中毒。油脂及含油食品在貯藏過程中容易發生氧化而酸敗，人們長期食用這種高氧化值的油脂，會破壞人體內自由基的平衡，從而引起炎癥、腫瘤、腦缺血、加速細胞衰老等病癥。抗氧化劑能阻止或延緩食品氧化，提聞食品的穩定性和延長減期。茶多酚作為ー種天然食品添加剤，具有使用安全性高，抗氧化能力強，基本無副作用等特點，該類化合物具有高效的抗癌、抗衰老、抗輻射、清除人體自由基、降血糖、降血脂等一系列藥理功能，在油脂、食品、醫藥等領域得到了愈來愈多的應用，其經濟效益和應用前景十分樂觀。我國具有豐富的茶葉資源，從茶葉中提取茶多酚的エ藝成熟，因此，茶多酚作為天然抗氧化劑對食品エ業的發展和保護人體健康具有非常重要意義。受自身分子結構限制，茶多酚易溶于水，難溶于油。對油脂性體系，茶多酚的溶解度很小，如果作為精煉食用油或含油食品的抗氧化劑，只能少量溶入，難以加至有效的抗氧化濃度閾值，或者在精煉油中產生沉淀。其優異的抗氧化活性難以發揮作用。為了解決茶多酚在油脂體系中不能均勻分散的問題，常用一些改性方法増加其脂溶性，這些方法包括溶劑法、乳化法、分子修飾法等。前兩種方法得到的產品脂溶性不穩定，引入溶劑等雜質，長久放置會使茶多酚析出。分子修飾法是利用生物或化學合成的方法，將茶多酚中幾種兒茶素分子結構的某些部位酰化或酷化，使得新生成的分子由原先的水溶性改性為脂溶性。目前分子修飾法主要有化學法和酶法。利用化學法改性茶多酚存在諸多缺點區域選擇性差，易產生大量的副產物，產物產率低；采用基團保護等措施，反應步驟多，耗時長，且引入溶劑多，分離純化困難；多用堿性催化劑，產生大量含堿廢液，污染環境等。而酶法分子修飾具有反應條件溫和，區域選擇性高，副反應少，反應步驟少、簡單可控、環境友好等優點。
發明內容
本發明的目的是克服上述不足之處，提供一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，以茶多酚和脂肪酸こ烯酯為原料，在脂肪酶的催化作用下合成脂溶性茶多酚。按照本發明提供的技術方案，一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，步驟為將茶多酚與脂肪酸こ烯酯按質量比4飛I在40(Γ500倍質量的有機溶劑中混合，加入相對茶多酚質量1°/Γ2%的脂肪酶開始反應，在35飛(TC下攪拌反應8 24h，反應結束后，反應液經過濾、5(T60°C旋轉蒸發、在真空度為O. 05、. IMPa條件下真空干燥2-4h得到產品脂溶性茶多酚產物。
所述茶多酚為多酚含量859Γ99%，其中表沒食子兒茶素沒食子酸酷含量為35% 45%的茶多酚產品。所述脂肪酸こ烯酯為こ酸こ烯酷，丙酸こ烯酷，丁酸こ烯酷，戊酸こ烯酷，己酸こ烯酯，新壬酸こ烯酯，新癸酸こ烯酯，月桂酸こ烯酯或棕櫚酸こ烯酯中的ー種。所述有機溶劑為異丙醇，こ腈，四氫呋喃，叔丁醇，叔戊醇，丙酮或甲醇中的ー種或幾種的混合物。本發明中所述脂肪酶為Novo Nordisk公司生產的脂肪酶LIP0ZYME TL IM (產品說明見實質審查參考資料I)和LPOZYME RM IM (產品說明見實質審查參考資料2)，AmanoPharmarceutial公司生產的脂肪酶Lipase AYS “Amano”(產品說明見實質審查參考資料3)。
本發明具有如下優點本發明與傳統的化學合成法相比具有反應條件溫和，副反應少，反應步驟少、簡單可控，環境友好，產品分離相對簡單等優點，從而提供一種高效、快速、符合綠色化學和環境友好發展方向的茶多酚改性方法。
圖I添加不同抗氧化劑(O. 02%)對食用精煉大豆油透光率的影響。圖2添加不同抗氧化劑(O. 02%)對食用精煉大豆油的過氧化值試驗結果。
具體實施例方式以下給出實施例，對本發明作進ー步說明。實施例I
將IOOmg 88%的茶多酚與こ酸こ烯酯按質量比4 : I置于IOOmL具塞反應瓶中，再加入50mL異丙醇混合均勻，上述反應體系移入集熱式磁力加熱攪拌器中，待反應體系溫度升至40°C時，加入I. 5mg Novo Nordisk公司生產的脂肪酶LIP0ZYME TL頂開始反應，在40°C下攪拌反應16h，反應結束后，反應液經過濾、旋轉蒸發、真空干燥得到脂溶性茶多酚產物/5. 8mg。本實施例制備的脂溶性茶多酚產物通過透光率測定結果(見圖I)表明在油脂中溶解性良好，明顯高于未改性茶多酚。油脂的過氧化值試驗結果(見圖2)表明，在食用大豆油中，當添加量同為O. 02%時，不同抗氧化劑的抗氧化效果為TBHQ >油溶性茶多酚 > 迷迭香提取物> BHT >未改性茶多酚。實施例2
將50mg 98%的茶多酚與丁酸こ烯酯按質量比5 : I置于50mL具塞反應瓶中，再加入25mLこ腈混合均勻，上述反應體系移入集熱式磁力加熱攪拌器中，待反應體系溫度升至50°C時，加入I. Omg Novo Nordisk公司生產的脂肪酶LPOZYME RM頂開始反應，在50°C下攪拌反應12h，反應結束后，反應液經過濾、旋轉蒸發、真空干燥得到脂溶性茶多酚產物32. 4mg0實施例3
將80mg 95%的茶多酚與新癸酸こ烯酯按質量比4 : I置于IOOmL具塞反應瓶中，再加入50mL叔丁醇混合均勻，上述反應體系移入集熱式磁力加熱攪拌器中，待反應體系溫度升至 50°C時，加入 I. Omg Amano Pharmarceutial 公司生產的脂肪酶 Lipase AYS “Amano” 開始反應,在50°C下攪拌反應20h,反應結束后，反應液經過濾、旋轉蒸發、真空干燥得到脂溶性茶多酚產物58. 2mg。 實施例4
將IOOmg 98%的茶多酚與月桂酸こ烯酯按質量 比6 : I置于IOOmL具塞反應瓶中，再加入50mL異丙醇甲醇為I :1混合溶劑混合均勻，上述反應體系移入集熱式磁力加熱攪拌器中，待反應體系溫度升至45°C時,加入I. 5mg Amano Pharmarceutial公司生產的脂肪酶Lipase AYS “Amano”開始反應,在45°C下攪拌反應8h,反應結束后，反應液經過濾、旋轉蒸發、真空干燥得到脂溶性茶多酚產物71. 2mg。
權利要求
1.一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是步驟為將茶多酚與脂肪酸こ烯酯按質量比4飛I在40(Γ500倍質量的有機溶劑中混合，加入相對茶多酚質量19Γ2%的脂肪酶開始反應，在35飛(TC下攪拌反應8 24h，反應結束后，反應液經過濾、5(T60°C旋轉蒸發、在真空度為O. 05、. IMPa條件下真空干燥2-4h得到產品脂溶性茶多酚產物。
2.如權利要求I所述酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是所述茶多酚為多酚含量85% 99%，其中表沒食子兒茶素沒食子酸酷含量為35% 65%的茶多酚產品。
3.如權利要求I所述酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是所述脂肪酸こ烯酯為こ酸こ烯酷，丙酸こ烯酷，丁酸こ烯酷，戊酸こ烯酷，己酸こ烯酷，新壬酸こ烯酷，新癸酸こ烯酷，月桂酸こ烯酯或棕櫚酸こ烯酯中的ー種。
4.如權利要求I所述酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是所述有機溶劑為異丙醇，こ臆，四氫呋喃，叔丁醇，叔戊醇，丙酮或甲醇中的ー種或幾種的混合物。
5.如權利要求I所述酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是所述脂肪酶為NovoNordisk公司生產的脂肪酶LIP0ZYME TL 頂和 LPOZYME RM 頂，Amano Pharmarceutial 公司生產的脂肪酶Lipase AYS “Amano”。
全文摘要
本發明涉及一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，屬于食品添加劑生物合成領域。其將茶多酚與脂肪酸乙烯酯在有機溶劑體系中經脂肪酶促催化反應，合成改性脂溶性茶多酚。本發明與傳統的化學合成法相比具有反應條件溫和，副反應少，反應步驟少、簡單可控，環境友好，產品分離相對簡單等優點，從而提供一種高效、快速、符合綠色化學和環境友好發展方向的茶多酚改性方法。
文檔編號C12P17/06GK102747117SQ20121026541
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月28日 優先權日2012年7月28日
發明者朱松, 李哲, 王洪新, 馬朝陽 申請人:江南大學