布朗葡萄藻及其應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了保藏號為CGMCC?No.5149的布朗葡萄藻(Botryococcus?braunii)ENN41。本發(fā)明的布朗葡萄藻ENN41具有生物量高、含烴量高、生長速度快、培養(yǎng)密度高的優(yōu)勢，適合產業(yè)化應用。本發(fā)明還公開了布朗葡萄藻ENN41在生物燃料尤其是生物烴、生物柴油或生物煤油中的應用；在廢水處理、廢氣處理、CO2減排中的應用；以及在生產色素、動物飼料中的應用。
【專利說明】布朗葡萄藻及其應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及微生物工程領域，具體而言，本發(fā)明涉及一種布朗葡萄藻及其應用。
【背景技術】
[0002]隨著全球化石能源的短缺和其帶來的環(huán)境問題，尋找新型可替代能源勢在必行，微藻具有生物量大、生長周期短及含油脂類物質高等特點，在CO2減排和生物燃料利用上都有廣闊的開發(fā)前景。
[0003]目前利用微藻生產生物柴油主要有兩種研發(fā)思路，一種是利用微藻合成的脂肪酸通過酯化生產生物燃料，因大多數(shù)微藻通過脂肪酸合成途徑可積累大量油脂，目前開展的微藻能源研究大多采用此類研發(fā)思路來研發(fā)微藻生物燃料；另一種是利用微藻合成的烴類物質生產生物柴油，因烴類物質與石油性質相似，故可代替石油生產新的可再生能源。迄今所發(fā)現(xiàn)具有產烴能力的藻類有葡萄藻、鹽藻、小球藻、小環(huán)藻、灰色念珠藻、倒囊藻、網翼藻等，但產烴量最高、最有希望 成為工業(yè)藻種的還是葡萄藻，故葡萄藻的研究受到世界的廣泛關注。
[0004]葡萄藻又名叢粒藻，屬綠藻門、四胞藻綱、葡萄藻科、葡萄藻屬，是一種世界性分布的淡水或微咸水綠藻。烴性質也因藻株有所區(qū)別，基于合成烴的性質，可將葡萄藻分為三個化學種:A、B和L。A品系主要產奇數(shù)碳直鏈二烯烴和三烯烴，最高含烴量達到細胞干重的61% ；B品系主要產三萜類烴，由類異戊二烯單位構成，被稱為“葡萄烴”和甲基化三十碳六烯(鯊烯)，其含烴量為細胞干重的27%~86%;L品系主要產存在苯環(huán)或雜環(huán)的四萜類烯烴，其含烴量為細胞干重的2%~8%。葡萄藻的含烴量大大高于其它微生物的含烴量，但其生長緩慢，室外養(yǎng)殖容易污染，很難得到大規(guī)模的推廣應用，因此具有高生長速度的優(yōu)良葡萄藻藻種的獲得是葡萄藻工業(yè)應用的關鍵環(huán)節(jié)。
[0005]葛亞明等在標題為“Growth characteristics of Botryococcus braunii765under high CO2 concentration in photobioreactor，，的文獻中用 Botryococcusbraunii 765藻株在BGll培養(yǎng)基中，持續(xù)光照和20% CO2濃度下，培養(yǎng)第25天時，達到的最大生物量為2.31g/L，總烴含量最高僅為24.45%。
[0006]現(xiàn)有技術中的葡萄藻具有生長速度慢、生物量低、總烴含量低等缺點，限制了其在產業(yè)化中的應用。

【發(fā)明內容】

[0007]為了克服上述技術問題，一方面，本發(fā)明通過自然界藻種分離純化及篩選，提供了一株性能良好的布朗葡萄藻(Botryococcus braunii)ENN41藻株，該藻株已于2011年8月17日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC N0.5149。
[0008]本發(fā)明提供的藻株布朗葡萄藻ENN41的18S序列(SEQ ID NO:1)如序列I所示。
[0009]序列I為:
[0010]CAAGTATTATGCCATGCATGTCTAAGTATAAGCTGTTTATACTGTGAAACTGCGAATGGCTCATTCCCA
【權利要求】
1.一種保藏號為 CGMCC N0.5149 的布朗葡萄藻(Botryococcus braunii)ENN41。
2.根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其18S序列如SEQID NO:1所示。
3.根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其ITS序列如SEQID NO:2所示。
4.根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其形態(tài)特征為:細胞形狀為橢圓形或楔形，呈串狀集落生；細胞大小:長6μηι~8μηι,寬5μηι~7μηι,聚集群體達50 μ m以上；細胞顏色為綠色或黃褐色；細胞包被在不規(guī)則分枝或分葉的、半透明的膠群體膠被里；細胞分裂時常形成兩個似親孢子，群體常斷裂為小群體。
5.根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其特征在于，藻株的烴含量占藻株干重的20%~60%。
6.根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41，其特征在于，藻株中的脂肪酸含量占藻株干重的4%~8%。
7.—種培養(yǎng)根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41的培養(yǎng)方法,其特征在于,培養(yǎng)條件為:溫度為20~35°C ;光照條件為50~500 μ mol/m2.s, pH值控制在7~9，C源為含0.5%~10% CO2的氣體。
8.根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41在生產生物燃料中的應用。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于所述生物燃料為生物烴、生物柴油或生物煤油。
10.根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41在廢水處理、廢氣處理、CO2減排中的應用。
11.根據權利要求1所述的布朗葡萄藻ENN41在生產色素、動物飼料中的應用。
【文檔編號】C12N1/12GK103571752SQ201210270140
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年7月30日 優(yōu)先權日:2012年7月30日
【發(fā)明者】陳傳紅, 吳洪, 尹順吉, 馬建源 申請人:新奧科技發(fā)展有限公司