三步酶解法生產飼用釀酒酵母破壁細胞的制作方法
【專利摘要】本發明提供了一種飼用合生素的溫和的生產方法生產酵母破壁細胞，包括酵母蛋白、酵母甾體、酵母多糖、酵母核酸等酵母代謝產物。針對當前養殖動物蛋白利用低，腹瀉率高，發病率高而開發的新型飼料添加劑。本產品線采用深層液態發酵得到酵母菌體，經過三步酶解法得到破壁細胞，生產成本低廉、活菌數高，是穩定高效的綠色飼料添加劑。【專利附圖】
【附圖說明】附圖為工藝路線圖。
【專利說明】三步酶解法生產飼用釀酒酵母破壁細胞
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種飼用破壁酵母細胞的制備方法。
技術背景
[0002]酵母菌可以將劣質蛋白轉化為優質蛋白，為動物提供優質的蛋白飼料，同時，酵母細胞壁細胞含有大量酵母蛋白、酵母核酸，酵母留體等營養物質，具有調節免疫，提高動物抗病力，減少抗生素的使用，是優良的綠色的飼料添加劑。酵母細胞壁的破碎主要通過有機械法、化學法及酶法，但酶法應用較少，這是因為單一酶法裂解效果較差。而機械法噪音較大，而化學法產生大量污水，容易導致化學藥品在飼料中的殘留。
[0003]本方法是用農業部批準可用于飼料添加劑的釀酒酵母為發酵菌種，通過高密度發酵，得到大量優質酵母活菌。酵母細胞壁主要由外層的甘露聚糖，中層的葡聚糖組成交聯的多糖結構故而造成難以破壁。本方法先用β_甘露聚糖酶破壞其外層細胞壁，然后用β_葡聚糖破壞其中層細胞壁，最終通過蛋白酶酶解細胞壁及細胞膜蛋白，從而達到裂解蛋白，釋放胞內營養物質，提高營養利用率，本方法都是在溫和的條件下生產，不需要劇烈反應，故不會造成噪音。
【發明內容】
[0004]本發明目的在于針對當前 抗生素的濫用而發明的抗生素替代物，本產品無殘留，無毒害，是綠色的健康的新型飼料添加劑。
[0005]本發明提供一種用于微生態制劑的制備方法，其包括如下步驟:
[0006]1.本發明提供一種用于飼用合生素的制備方法，其包括如下步驟:
[0007]I)配制種子培養基1000ml，121°C滅菌15分鐘；
[0008]2)將菌種接種于種子培養基,搖動培養18小時；
[0009]3)配制釀酒酵母發酵培養基，121°C滅菌15分鐘；
[0010]4)將2)培養得到的種子加入0.5噸發酵罐中，發酵約24小時；
[0011 ]5)發酵結束后，轉鼓過濾，得到釀酒酵母菌泥，用磷酸緩沖液洗滌并配制成酵母懸液。
[0012]6)在反應釜中，用NaOH和醋酸調節PH值為6.0，加入β甘露聚糖酶100U/ml，處理2小時。
[0013]7)調節PH值為6.5，加入β-葡聚糖酶200U/ml，處理2小時。
[0014]8)調節PH值為7.0，加入中性蛋白酶1000U/ml，處理3小時。
[0015]9)噴霧干燥，得到飼用釀酒酵母破壁細胞。
[0016]下面對本發明的技術內容做進一步說明。
[0017]I)種子培養基為YPD，其成分為蛋白胨I %，葡萄糖2 %，酵母膏0.5%，氯化鈉0.5%
[0018]2)釀酒酵母菌發酵培養基成分如下:[0019]3)在發酵過程中，補氨水使pH值保持7.0左右。
[0020]
【權利要求】
1.本發明提供一種用三步酶解法生產飼用釀酒酵母破壁細胞，其包括如下步驟: 1)配制種子培養基1000ml，121°C滅菌15分鐘； 2)將菌種接種于種子培養基，搖動培養18小時； 3)配制釀酒酵母發酵培養基，121°C滅菌15分鐘； 4)將2)培養得到的種子加入0.5噸發酵罐中，發酵約24小時； 5)發酵結束后，轉鼓過濾，得到釀酒酵母菌泥，用磷酸緩沖液洗滌并配制成酵母懸液 6)在反應釜中，用NaOH和醋酸調節PH值為6.0，加入β甘露聚糖酶100U/ml，處理2小時。 7)調節PH值為6.5，加入β-葡聚糖酶200U/ml，處理2小時。 8)調節PH值為7.0，加入中性蛋白酶1000U/ml，處理3小時。 9)噴霧干燥，得到飼用釀酒酵母破壁細胞。
2.根據權利要求1的制備方法，其中所述的芽孢菌發酵培養基為分別為糖蜜4%，淀粉2%，蛋白胨1 %，硫酸銨1 %，硫酸鎂0.01 %，磷酸氫二鉀0.2%。
3.根據權利要求1所述的制備方法，其中所述的種子培養基其成分為蛋白胨1%，葡萄糖2%，酵母膏0.5%，氯化鈉0.5%。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其中所述的飼用釀酒酵母破壁細胞包括釀酒酵母菌、酵母蛋白、酵母細胞壁、留體及酵母核酸，消化酶等。
5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于采用此方法，反應條件溫和，不需要劇烈勻漿及超聲波破碎，酵母細胞破壁率達到98%以上。
6.一種飼用合生素的制備方法，其根據權利要求1-5的方法制備而成。
【文檔編號】C12R1/865GK103589641SQ201210292451
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2012年8月17日 優先權日:2012年8月17日
【發明者】張江, 胡祥 申請人:廣州市紐溢樂商貿有限公司