專利名稱：一種利用米渣生產抗氧化多肽的方法
技術領域：
本發明涉及食品加工技術領域，特別是一種利用米渣生產抗氧化多肽的方法。
背景技術：
多肽是α -氨基酸以肽鏈連接在一起而形成的化合物，它也是蛋白質水解的中間產物，通常由10-100氨基酸分子脫水縮合而成。多肽化合物易被人體消化吸收，并具有防病、治病、調節人體生理機能的作用，特別是其具有較強的抗氧化性，因而，被稱為抗氧化多肽，是極具潛力的一種功能性食品基料，已逐漸成為21世紀的健康食品。目前，多肽的生產方法主要有酸解法、堿解法和酶法，且大多采用大豆或其副產品作為生產原料。如日本采用豆柏作為原料，用酸解法生產的“大豆多肽”，用作“食品添加劑”，主要用于生產老人和兒童食品，其目的是增強這兩種人群對食品營養的吸收；由于生產時，所用的酸性化學物質難以除盡，而且有苦味，需用活性炭吸附、脫苦，而活性炭免不了會侵入肽體。酶法生產多肽，是國內生產多肽的主流方法；酶法生產是用人體所需要的食品級植物蛋白酶，將人體平常所食的食物蛋白質酶解成小分子活性多肽；如武漢九生堂生產的“大豆多肽”，所用原料是含量在90%以上的大豆分離蛋白，水解方法是酶法，所用的酶屬食品級植物蛋白酶；所生產的“大豆多肽”無苦味，且風味芳香宜人，對人體無任何毒副作用。米渣是以早秈米、碎米、陳化米等低值米為原料，經有機酸、抗生素發酵和淀粉糖生產所得副產物，價格低廉，產量巨大，淀粉糖生產每消耗7噸大米就要產生I噸的米渣。在淀粉糖生產過程中，大米經高溫淀粉酶液化水解，板框過濾后所剩的殘渣，其蛋白質含量在40%以上，并含有大量的糊精和多聚糖。同時，在大米生產淀粉糖的過程中，蛋白質經高溫處理后變性嚴重，水溶性、起泡性、乳化性等蛋白特性基本喪失，限制了其在食品中的應用。一直以來，米渣僅被用作動物飼料，這是對蛋白質資源的極大浪費。中國專利(專利申請號為200810163917. 8) “一種利用米渣蛋白制取米蛋白多肽粉方法”，是以淀粉糖廠的副產品米渣蛋白為原料，經過洗滌、水解、脫鹽、干燥等一系列工序制得食品級的米蛋白多肽粉；所制得的米蛋白多肽粉中蛋白含量> 77%，其中分子量在1000左右的小肽占蛋白總量的67% ;米蛋白多肽粉不但保持了米蛋白本身低過敏性，高生物價等優勢，而且由于其中含有了大量的小肽，在消化吸收和保健功能方面有顯著的功能。

發明內容
本發明的目的在于提供一種工藝簡單、投入少、產品無潛在安全隱患、且能利用非水溶性米渣蛋白生產食品級抗氧化多肽的方法。為實現上述目的，本發明的解決方案是發明一種利用米渣生產抗氧化多肽的方法，其工藝過程如下Α、種曲制備將米渣蒸煮后調制成含水量為45-65%的種曲發酵料，再加入食品級發酵菌種米曲霉，其孢子接種量為2-8Χ IO6個/克，拌均后置于濕度80-95 %、溫度25-32°C條件下，發酵培養3-5天，成為種曲料，備用；
B、前發酵另取米渣蒸煮后調制成含水量為45-65%的發酵預料，再加入占發酵預料重量1-10%的種曲料，拌勻，置于濕度80-95%、溫度25-32°C條件下，發酵培養3_5天，成為前發酵料，備用；C、后發酵將備用的前發酵料投入無菌水中，其水的用量按照每IOg前發酵料加水60-100ml計算；然后，在40-42°C條件下，進行后發酵5_7天，成為后發酵料，備用；D、透析將備用的后發酵料置于20KD截留透析袋中，在3-10°C條件下透析12_24小時，取袋外透析液，備用；E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液進行冷凍干燥，條件為-30--45°C，真空度O. 4-200Pa,得凍干粉，備用；
F、層析將備用的凍干粉配成10-30mg/ml的溶液,過Sephadex G-25葡聚糖凝膠，得自動部分收集器收集的層析液，備用；G、層析液冷凍干燥將備用的層析液進行冷凍干燥，條件為-30-45°C，真空度O. 4_200Pa，所得粉末即為抗氧化多肽。本發明的利用米渣生產抗氧化多肽的方法，并采用種曲制備、前發酵和后發酵三步工序，即可將米渣蛋白水解成抗氧化多肽，因而，其工藝比較簡單，生產條件容易控制，無需任何特殊設備，故投入也比較少；同時，所選用的發酵菌種一米曲霉為傳統釀造食品所用的菌株，且在發酵過程中，既不添加酸堿，也沒有添加其它任何養分，僅利用米渣中富含的糊精和多聚糖，為微生物的生長代謝提供碳源和氮源，系生物水解，環保低碳；也不需要后續的脫酸脫堿，因而，其產品無潛在的安全隱患。據檢測，根據本發明方法生產的抗氧化多肽，其中蛋白質含量> 88%，分子量在200Da-2000Da之間，分子量低于IOOODa的比率達70 %，DPPH自由基清除力為79. 1% -83. 2%。
具體實施例方式以下結合實施例，對本發明作進一步的說明。下面的說明是采用例舉的方式，但本發明的保護范圍不應局限于此。本發明的利用米渣生產抗氧化多肽的方法，主要有以下工藝步驟A、種曲制備制成種曲料；B、前發酵制成前發酵料；C、后發酵制成后發酵料；D、透析制得袋外透析液；E、袋外透析液冷凍干燥制得凍干粉；F、層析制得層析液；G、層析液冷凍干燥制成抗氧化多肽。實施例一A、種曲制備取米渣(經有機酸、抗生素發酵和淀粉糖生產所得副產物，下同)，蒸煮后調制成含水量為55%的種曲發酵料O. 25kg，再加入食品級發酵菌種米曲霉，孢子接種量按4X IO6個/克計算，為I X IO9個孢子，拌均后置于濕度85%、溫度28°C條件下，發酵培養4天,得O. 25kg種曲料,備用；
B、前發酵另取米渣蒸煮后調制成含水量為55%的發酵預料5kg，再加入O. 25kg的種曲料，拌勻，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發酵培養4天，得5. 25kg前發酵料，備用；C、后發酵將備用的5. 25kg前發酵料投入42L水中，拌均；然后，在41°C條件下，進行后發酵6天，得47. 25kg后發酵料，備用；D、透析將備用的47. 25kg后發酵料置于20KD截留透析袋中，在TC條件下透析18小時，得150L袋外透析液，備用；E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液在_35°C，真空度IOOPa條件下，冷凍干燥，得凍干粉2. 82kg,備用。 F、層析將備用的凍干粉溶解成20mg/ml的溶液,過Sephadex G-25葡聚糖凝膠，得自動部分收集器收集的層析液30L，備用；此過程中，可以脫除所含的鹽分(下同)；G、層析液冷凍干燥將備用的層析液在_35°C、真空度IOOPa條件下進行冷凍干燥，得2. 6kg冷凍干燥粉末，即為抗氧化多肽。實施例二 A、種曲制備取米渣(經有機酸、抗生素發酵和淀粉糖生產所得副產物，下同)，蒸煮后調制成含水量為45%的種曲發酵料O. 25kg，再加入食品級發酵菌種米曲霉，孢子接種量按2X IO6個/克計算，為5X IO8個孢子，拌均，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發酵培養4天,得O. 25kg種曲料,備用；B、前發酵另取米渣蒸煮后調制成含水量為45%的發酵預料5kg，再加入O. 25kg的種曲料，拌勻，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發酵培養4天，得5. 25kg前發酵料，備用；C、后發酵將備用的5. 25kg前發酵料投入31. 5L水中，拌均；然后，在41 °C條件下，進行后發酵6天，得36. 75kg后發酵料，備用；D、透析將備用的36. 75kg后發酵料置于20KD截留透析袋中，在TC條件下透析18小時，得100L袋外透析液，備用；E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液在_30°C，真空度O. 4Pa條件下，冷凍干燥，得凍干粉2. 56kg,備用；F、層析將備用的凍干粉溶解成10mg/ml的溶液,過Sephadex G-25葡聚糖凝膠，得自動部分收集器收集的層析液20L，備用；G、層析液冷凍干燥將備用的層析液在_30°C、真空度O. 4Pa條件下進行冷凍干燥，得2. 4kg冷凍干燥粉末，即為抗氧化多肽。實施例三A、種曲制備取米渣(經有機酸、抗生素發酵和淀粉糖生產所得副產物，下同)，蒸煮后調制成含水量為65%的種曲發酵料O. 25kg，再加入食品級發酵菌種米曲霉，孢子接種量按8X IO6個/克計算，為2X IO9個孢子，拌均，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發酵培養4天,得O. 25kg種曲料,備用；B、前發酵另取米渣蒸煮后調制成含水量為65%的發酵預料5kg，再加入O. 25kg的種曲料，拌勻，置于濕度85%、溫度28°C條件下，發酵培養4天，得5. 25kg前發酵料，備用；
C、后發酵將備用的5. 25kg前發酵料投入52. 5L水中，拌均；然后，在41 °C條件下，進行后發酵6天，得57. 75kg后發酵料，備用；D、透析將備用的57. 75kg后發酵料置于20KD截留透析袋中，在TC條件下透析18小時，得160L袋外透析液，備用；
E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液在_45°C，真空度200Pa條件下，冷凍干燥，得凍干粉2. 66kg,備用；F、層析將備用的凍干粉溶解成30mg/ml的溶液,過Sephadex G-25葡聚糖凝膠，得自動部分收集器收集的層析液35L，備用；G、層析液冷凍干燥將備用的層析液在_45°C、真空度200Pa條件下進行冷凍干燥，得2. 5kg冷凍干燥粉末，即為抗氧化多肽。下表是三個實施例生產時的指標值和抗氧化多肽的主要檢測指標
權利要求
1.ー種利用米渣生產抗氧化多肽的方法，其特征在于エ藝過程如下 A、種曲制備將米渣蒸煮后調制成含水量為45-65%的種曲發酵料，再加入食品級發酵菌種米曲霉，其孢子接種量為2-8X106個/克，拌均后置于濕度80-95%、溫度25_32°C條件下，發酵培養3-5天，成為種曲料，備用； B、前發酵另取米渣蒸煮后調制成含水量為45-65%的發酵預料，再加入占發酵預料重量1-10%的種曲料，拌勻，置于濕度80-95%、溫度25-32°C條件下，發酵培養3_5天，成為前發酵料，備用； C、后發酵將備用的前發酵料投入無菌水中，其水的用量按照每IOg前發酵料加水60-100ml計算；然后，在40-42°C條件下，進行后發酵5_7天，成為后發酵料，備用； D、透析將備用的后發酵料置于20KD截留透析袋中，在3-10°C條件下透析12-24小時，取袋外透析液，備用； E、袋外透析液冷凍干燥將備用的袋外透析液進行冷凍干燥，條件為-30--45°C，真空度O. 4-200Pa,得凍干粉，備用； F、層析將備用的凍干粉配成10-30mg/ml的溶液,過SephadexG-25葡聚糖凝膠,得自動部分收集器收集的層析液，備用； G、層析液冷凍干燥將備用的層析液進行冷凍干燥，條件為-30-45で，真空度O.4-200Pa，所得粉末即為抗氧化多肽。
全文摘要
本發明公開的一種利用米渣生產抗氧化多肽的方法，涉及食品加工技術領域，利用經有機酸、抗生素發酵和淀粉糖生產所得副產物米渣作為原料，其主要工藝步驟包括A、種曲制備；B、前發酵；C、后發酵；D、透析；E、袋外透析液冷凍干燥；F、層析；G、層析液冷凍干燥。具有工藝簡單、投入少、產品無潛在安全隱患、且能利用非水溶性米渣蛋白生產等特點，既可適用米渣作原料，也可適用其它的非水溶性蛋白作原料，進行抗氧化多肽生產。
文檔編號C12P21/06GK102864199SQ20121033648
公開日2013年1月9日 申請日期2012年9月8日 優先權日2012年9月8日
發明者楊秀華, 隆前進, 周江, 李珍 申請人:長沙幫得生物科技有限公司