一種高純度葉黃素酯組合物及制備工藝的制作方法
【專利摘要】一種的高純度葉黃素酯組合物及制備工藝，所述制備方法包括將萬壽菊浸膏的溶劑A溶液降溫至20～30℃，保持0.5～4小時后，再降溫至5～20℃并保持0.5～4小時，過濾得濾餅I；在30～70℃條件下，溶解濾餅I于混合溶劑A中，攪拌0.5～5小時后降溫至10～28℃并保持0.5～5小時，過濾得濾餅II以及后續步驟；其中所述的混合溶劑A是醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸正丙酯或醋酸丁酯與C1-3醇的混合溶劑。使用本發明上述方法，工藝簡單易行、易于工業化，所有操作低溫進行，保證了產品的穩定性。所得產品收率高達25％以上，產品的總酯含量大于70％，反式葉黃素含量高達90～93％，大大提升了產品運用時的生物活性。
【專利說明】一種高純度葉黃素酯組合物及制備工藝

【技術領域】
[0001]本發明涉及從萬壽菊浸膏中分離高含量葉黃素酯產品、尤其是具有高反式葉黃素酯含量的組合物的方法。尤其涉及利用直接結晶法獲得上述產品的方法。
[0002]

【背景技術】
[0003]葉黃素酯是一種以脂肪酸與葉黃素結合形式存在的類胡蘿卜素脂肪酸酯。它廣泛存在于南瓜、菠菜、甘藍、萬壽菊花等植物體內。研究表明，攝入葉黃素酯可提高血液和視網膜黃斑中的葉黃素水平，從而預防年齡相關性視黃班退化和白內障，并且能夠有效抑制腫瘤生長和防止動脈粥樣硬化的發生。葉黃素和玉米黃質是唯一存在于人類視網膜黃斑區的類胡蘿卜素，人體自身不能合成葉黃素必須通過日常膳食對其進行補充。自然界中的葉黃素酯有兩種構型，分別是反式和順式，其中以全反式分子構型為主。全反式葉黃素酯又可分為:葉黃素單酯和葉黃素二酯。
[0004]在萬壽菊等植物體內，游離的葉黃素含量較少，大多被月桂酸、豆蘧酸、棕櫚酸等修飾，其中含量最高的酯為葉黃素棕櫚酸二酯(A Subag1 NMorita.FoodReasearchinternat1n,2001,34:315-320)
本項工藝提供了一種高純度葉黃素酯的制備、穩態化及其污染物脫除方法:先將萬壽菊浸膏中的丙酮不溶物脫除，再用脫除雜質的濃縮物進行異丙醇或丁醇結晶，最后再用低級醇洗滌晶體。其中兩步結晶所用溶劑不同，存在一定的溶劑交叉，異丙醇或丁醇結晶用時較長，不利于生產效率的提升。最后一步低級醇洗滌與異丙醇或丁醇存在大量溶劑交叉，并且該方法的產品收率很低，僅有11?15%。本發明借鑒了其中污染物脫除和抗氧化劑添加的方法，但對該技術方案中核心的結晶工藝進行了實質性的改進。


【發明內容】

[0005]本發明的目的在于提供一種安全、便捷、產品收率高的高純度葉黃素酯產品的制備方法及相應的葉黃素酯產品。
[0006]本發明所述的含葉黃素酯的組合物的制備方法，包括如下步驟:
a.在30?70°C條件下，將萬壽菊浸膏溶解于混合溶劑A中，加入吸附劑攪拌0.5?5小時,過濾,收集濾液；
b.將步驟a的濾液降溫至20?28°C，保持0.5?4小時后，再降溫至5?18°C并保持0.5?4小時，過濾得濾餅I ;
c.在30?70°C條件下,溶解濾餅I于混合溶劑A中，攪拌0.5?5小時后降溫至10?28°C并保持0.5?5小時，過濾得濾餅II ；
d.用C1-3醇洗滌濾餅II，然后加入抗氧化劑，再干燥除去殘留的C1-3醇，得到含葉黃素酯的組合物；
其中所述的混合溶劑A是醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸正丙酯或醋酸丁酯與C1-3醇的混合溶劑。
[0007]本發明所述的萬壽菊浸膏是萬壽菊花粒經有機溶劑萃取得到的浸膏，其中總酯質量百分含量應為18?35%。常使用的有機溶劑是丙烷或六號溶劑(GB16629-19966抽提溶劑油)。
[0008]本發明所述的C1-3醇是指甲醇、乙醇、丙醇或異丙醇。
[0009]本法的優選的技術方案中，所述方法中的混合溶劑A是醋酸甲酯/甲醇、醋酸乙酯/乙醇或醋酸正丙酯/異丙醇的二元混合溶劑。最為優選的是醋酸甲酯/甲醇或醋酸乙酯/乙醇的混合溶劑。
[0010]上述本發明的方法中，所述的混合溶劑A中酯和醇的質量比為2: 8?9:1。
[0011]本發明的另一優選技術方案中，所述的步驟a中的萬壽菊浸膏與混合溶劑A的質量比為1: 0.5?1: 20，優選1: 0.5?1: 15，最優選1:1?1: 10 ;步驟c中濾餅I與混合溶劑A的質量比為1: 0.5?20，優選1: 0.5?1: 15，最優選1:1?I: 10。
[0012]本發明的又一優選技術方案中，所述的步驟b和步驟c的降溫速率為5?20°C/小時，更優選5?15°C /小時。
[0013]本發明的再一優選技術方案中，所述的步驟d中的醇是乙醇或異丙醇，優選乙醇；醇的用量是濾餅II質量的3?30倍，優選3?20倍，最優選4?15倍。
[0014]上述本發明的任一技術方案中，所述及的吸附劑選自活性炭、白土、硅藻土、EDTA、EDTA 二鈉鹽以及上述兩種或兩種以上的吸附劑以任意比例組成的混合物；優選以活性炭、白土、硅藻土中I?3種以任意比例組成的混合物；最優選活性炭、硅藻土或二者以任意比例組成的混合物。其中所述的活性炭是以果殼和木屑為原料，經炭化、活化、精制加工而成；硅藻土主要是90%以上的硅藻殼組成。
[0015]上述本發明的任一技術方案中，所述步驟d中的抗氧化劑選自維生素E、維C鈉、異維C鈉、維C棕櫚酸酯、茶多酚以及上述兩種或兩種以上的抗氧化劑以任意比例混合而成的混合物；優選維生素E、異維C鈉、維C棕櫚酸酯或茶多酚以及上述兩種或兩種以上的抗氧化劑以任意比例混合而成的混合物；最優選維生素E、維C棕櫚酸酯或二者以任意比例混合而成的混合物。
[0016]本發明進一步的優選技術方案中，所述步驟d中干燥溫度30?70°C，干燥至溶殘< Ippn1
[0017]本發明的又一優選的技術方案，是整個制備過程中全程N2氣保護。
[0018]本發明的另一方面的目的是提供由上述方法制備的含葉黃素酯的組合物。
[0019]使用本發明上述方法制備含葉黃素酯的組合物，整個工藝簡單易行、易于工業化， 所有操作均在低溫下進行，最大程度上保證了產品的穩定性。所得產品收率高，重量收率能達到25%以上，而且在保證收率的同時還能保證產品的總酯含量大于70%，反式葉黃素含量高達90?93%，大大提升了產品運用時的生物活性。
[0020]另外所選用的吸附劑能夠有效地脫除萬壽菊浸膏中殘留的重金屬和農藥殘留，并且混合溶劑也有脫除有害物質的效果，從而保證了最終得到的葉黃素酯產品的高品質。在低碳醇類溶劑洗滌濾餅后加入抗氧化劑，可以防止葉黃素酯產品在烘干過程中被氧化，實驗證明在葉黃素酯產品中加入適量的抗氧化劑，可以保證其在室溫真空包裝條件下，3年內不變質。并且本發明所用溶劑均為食品級溶劑，制備出的產品符合食品衛生安全。
[0021]4、

【具體實施方式】
本發明中所采用的活性炭符合GB/T 13803.4-1999標準；白土符合GB25571-2010標準，硅藻土符合GB 24265-2009標準。
[0022]本發明使用JP 2003201497 (A)中所公開的方法測算葉黃素酯總酯含量；使用 AOAC Offical Method 970.64(Carotenes and Xanthophylls in DriedPlantMaterialsand Mixed Feeds)測定葉黃素酯中全反式葉黃素和全反式玉米黃質的含量及組成。
[0023]下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。
[0024]其中所述的“總酯含量”是葉黃素酯總酯含量，按照質量百分比計。
[0025]實施例1
稱取10g總酯含量為28wt%的萬壽菊浸膏，與醋酸甲酯/甲醇(重量比為
2: 8) IlOOg混合,加入7g娃藻土于60°C下加熱攪拌3.5小時后過濾,得到母液I。將母液I經Ih降溫至27°C后保持3h，再經Ih降溫至9°C保持4h后過濾得到濾餅I。
[0026]在55°C下加入濾餅I質量4倍的醋酸甲酯/甲醇(重量比為2: 8)溶解濾餅I，加熱攪拌5h后緩慢降溫至11°C保持3.5h后過濾得到濾餅II，加入其質量12倍的甲醇攪拌洗滌濾餅II，甲醇洗滌后的固體中加入1.2g茶多酚和0.6g維生素C，45°C下烘干5h，得到產品27g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為67%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=91: 5。
[0027]實施例2
稱取10g總酯含量為27wt %的萬壽菊浸膏與醋酸甲酯/乙醇(重量比為
2.5: 7.5) 1800g混合，加入6.5gEDTA和0.5g白土于48°C下加熱攪拌3小時后過濾，得到母液I。將母液I緩慢降溫經Ih降溫至23.5°C后保持lh，再經Ih降溫降溫至13°C保持2.5h后過濾得到濾餅I。
[0028]在60°C下加入濾餅I質量0.5倍的醋酸甲酯/異丙醇(重量比為5: 5)溶解濾餅I，加熱攪拌2h后緩慢降溫至11.5°C保持4h后過濾得到濾餅II，加入其質量8倍的甲醇攪拌洗滌濾餅II，甲醇洗滌后的固體中加入0.5g維生素E和0.3g維C棕櫚酸酯，32°C下烘干17h，得到產品26g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為66%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=91: 6。
[0029]實施例3
稱取10g總酯含量為26wt %的萬壽菊浸膏與醋酸乙酯/甲醇(重量比為
2: 8) 1350g混合，加入15g白土于32°C下加熱攪拌4.5小時后過濾，得到母液I。將母液I緩慢降溫經Ih降溫至26.5°C后保持3h，再經Ih降溫至8.5°C保持1.5h后過濾得到濾餅I。
[0030]在65°C下加入濾餅I質量20倍的醋酸乙酯/異丙醇(重量比為6: 4)溶解濾餅I，加熱攪拌0.5h后緩慢降溫至28°C保持Ih后過濾得到濾餅II，加入其質量30倍的異丙醇攪拌洗滌濾餅II，異丙醇洗滌后的固體中加入1.5g維生素E，30°C下烘干24h，得到產品20g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為70%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=91 6。
[0031]實施例4
稱取10g總酯含量為28wt%的萬壽菊浸膏與醋酸正丙酯/丙醇(重量比為3: 7)800g混合，加入3g活性炭和2g EDTA于40°C下加熱攪拌3小時后過濾，得到母液
1
[0032]將母液I緩慢降溫經40min降溫至28°C后保持4h，再經40min降溫至18°C保持4h后過濾得到濾餅I。
[0033]在60°C下加入濾餅I質量8倍的醋酸正丙酯/丙醇(重量比為3: 7)溶解濾餅I，加熱攪拌2.5h后緩慢降溫至10°C保持0.5h后過濾得到濾餅II，加入其質量10倍的異丙醇攪拌洗滌濾餅II，異丙醇洗滌后的固體中加入1.2g維生素C棕櫚酸酯和0.6g異維C鈉，50°C下烘干lh，得到產品24g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為71 %，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=90: 5。
[0034]實施例5
稱取10g總酯含量為28wt %的萬壽菊浸膏與醋酸乙酯/乙醇(重量比為
3: 7) 100g混合,加入7g娃藻土和Ig白土于30°C下加熱攪拌5小時后過濾,得到母液
1
[0035]將母液I緩慢降溫經40min降溫至20°C后保持4h，再經40min降溫至11 °C保持4h后過濾得到濾餅I。
[0036]在30°C下加入濾餅I質量I倍的醋酸乙酯/乙醇(重量比為3: 7)溶解濾餅I，加熱攪拌5h后緩慢降溫至10°C保持0.5h后過濾得到濾餅II，加入其質量3倍的異丙醇攪拌洗滌濾餅II，異丙醇洗滌后的固體中加入Ig異維C鈉，70°C下烘干3h，得到產品26g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為68%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=92: 6。
[0037]實施例6
稱取10g總酯含量為26wt%的萬壽菊浸膏與醋酸正丙酯/異丙醇(重量比為
3: 7)2000g混合，加入3g白土和7gEDTA于38°C下加熱攪拌4.5小時后過濾，得到母液
1。將母液I緩慢降溫經40min降溫至27.5°C后保持4h，再經40min降溫至6.5°C保持3h后過濾得到濾餅I。
[0038]在60°C下加入濾餅I質量12倍的醋酸正丙酯/異丙醇(重量比為3: 7)溶解濾餅I，加熱攪拌4.5h后緩慢降溫至25.5°C保持2.5h后過濾得到濾餅II，加入其質量30倍的甲醇攪拌洗滌濾餅II，異丙醇洗滌后的固體中加入0.2g茶多酚和Ig異維C鈉，44°C下烘干10h，得到產品22g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為70%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=92: 6。
[0039]實施例7
稱取10g總酯含量為27wt%的萬壽菊浸膏與醋酸丁酯/異丙醇(重量比為
4: 6) 1300g混合,加入3gEDTA 二鈉鹽和4g娃藻土于60°C下加熱攪拌I小時后過濾,得到母液I。將母液I緩慢降溫經Ih降溫至26°C后保持2h，再經40min降溫至12°C保持
2.5h后過濾得到濾餅I。
[0040]在45°C下加入濾餅I質量I倍的醋酸丁酯/乙醇(重量比為6: 4)溶解濾餅I，加熱攪拌1.5h后緩慢降溫至13°C保持2h后過濾得到濾餅II，加入其質量20倍的乙醇攪拌洗滌濾餅II，乙醇洗滌后的固體中加入0.4g維生素E和1.4g維生素C棕櫚酸酯，40°C下烘干12h，得到產品28g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為67%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=92: 5。
[0041]實施例8
稱取10g總酯含量為27wt %的萬壽菊浸膏與醋酸甲酯/甲醇(重量比為
4: 6) 10g混合,加入2g白土和2g娃藻土于45°C下加熱攪拌4小時后過濾,得到母液
I。將母液I緩慢降溫經40min降溫至21°C后保持0.5h，再經Ih降溫降溫至TC保持Ih后過濾得到濾餅I。
[0042]在55°C下加入濾餅I質I倍的醋酸甲酯/甲醇(重量比為4: 6)溶解濾餅I，加熱攪拌3h后緩慢降溫至17°C保持5h后過濾得到濾餅II，加入其質量8倍的異丙醇攪拌洗滌濾餅II，異丙醇洗滌后的固體中加入0.4g維C棕櫚酸酯，30°C下烘干24h，得到產品26g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為72%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=92: 5。
[0043]實施例9
稱取10g總酯含量為27wt%的萬壽菊浸膏與醋酸正丙酯/異丙醇(重量比為
4.5: 5.5) 1600g混合,加入Ig娃藻土和12g活性炭于65°C下加熱攪拌1.5小時后過濾，得到母液I。將母液I緩慢降溫經Ih降溫至25°C后保持1.5h，再經Ih降溫降溫至6°C保持Ih后過濾得到濾餅I。
[0044]在30°C下加入濾餅I質量17倍的醋酸正丙酯/異丙醇(重量比為4.5: 5.5)溶解濾餅I，加熱攪拌4.5h后緩慢降溫至14°C保持3.5h后過濾得到濾餅II，加入其質量8倍的異丙醇攪拌洗滌濾餅II，甲醇洗滌后的固體中加入0.5g維C棕櫚酸酯和Ig維生素C，54°C下烘干llh，得到產品25g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為73%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=91: 6。
[0045]實施例10
稱取10g總酯含量為28wt%的萬壽菊浸膏與醋酸甲酯/乙醇(重量比為5: 5) 100g混合，加入1g白土于701:下加熱攪拌0.5小時后過濾，得到母液I。將母液I緩慢降溫經Ih降溫至20°C后保持3h，再經40min降溫降溫至I (TC保持1.5h后過濾得到濾餅I。
[0046]在60°C下加入濾餅I質量10倍的醋酸甲酯/乙醇(重量比為5: 5)溶解濾餅I，加熱攪拌2h后緩慢降溫至22°C保持5h后過濾得到濾餅II，加入其質量15倍的甲醇攪拌洗滌濾餅II，甲醇洗滌后的固體中加入0.5g維生素C鈉鹽，70°C下烘干4h，得到產品26g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為74%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=93: 6。
[0047]實施例11
稱取10g總酯含量為28wt %的萬壽菊浸膏與醋酸甲酯/甲醇(重量比為
5: 5)700g混合，加入Ig硅藻土和8gEDTA于70°C下加熱攪拌0.5小時后過濾，得到母液I。將母液I緩慢降溫經Ih降溫至23°C后保持3.5h，再經40min降溫降溫至13°C保持2h后過濾得到濾餅I。
[0048]在70°C下加入濾餅I質量20倍的醋酸甲酯/甲醇(重量比為2: 8)溶解濾餅I，加熱攪拌2h后緩慢降溫至5.5°C保持3.5h后過濾得到濾餅II，加入其質量4倍的甲醇攪拌洗滌濾餅II，甲醇洗滌后的固體中加入1.2g茶多酚和0.4g維C鈉鹽，63°C下烘干lh，得到產品27g，經檢測含葉黃素酯的質量百分含量為68%，其中全反式葉黃素:玉米黃質(摩爾比)=91: 5。
【權利要求】
1.高純度葉黃素酯組合物及制備工藝，包括如下步驟: a.在30?70°C條件下，將萬壽菊浸膏溶解于混合溶劑A中，加入吸附劑攪拌0.5?5小時，過濾，收集濾液； b.將步驟a的濾液降溫至20?30°C，保持0.5?4小時后，再降溫至5?20°C并保持0.5?4小時，過濾得濾餅I ; c.在30?70°C條件下，溶解濾餅I于混合溶劑A中，攪拌0.5?5小時后降溫至10?28°C并保持0.5?5小時，過濾得濾餅II ； d.用C1-3醇洗滌濾餅II，然后加入抗氧化劑，再干燥除去殘留的C1-3醇，得到含葉黃素酯的組合物； 其中所述的混合溶劑A是醋酸甲酯、醋酸乙酯、醋酸正丙酯或醋酸丁酯與C1-3醇的混合溶劑。
【文檔編號】A23L1/29GK104432003SQ201310431363
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2013年9月22日 優先權日:2013年9月22日
【發明者】譚超智 申請人:青島中人智業生物科技有限公司