側孢芽孢桿菌制劑的制作方法
【專利摘要】本發明屬于微生物制劑【技術領域】，具體是指側孢芽孢桿菌制劑，本發明的制備工藝如下：側孢芽孢桿菌菌種（安瓿管）——試管斜面菌種培養——搖瓶菌種培養——種子罐深層液體發酵培養——封閉式固體發酵箱培養——側孢芽孢桿菌制劑。本發明采用先進的“深層液體發酵+封閉式固體發酵”的連續發酵工藝，利用全封閉自控式固體發酵設備，使固體發酵的整個過程都處于全封閉的自動監控之下，對發酵過程中的培養基成分、配方、溫度、濕度、通氣、PH值等環境條件進行自動化檢測、電子顯示、自動控制，不僅大幅度提高產量，而且保證了由該制劑配制的微生物葉面增效劑的質量。
【專利說明】側孢芽孢桿菌制劑
[0001]本申請是一件分案申請，是申請號為201010103139.0,申請日為2010年I月26日，發明名稱為“微生物葉面增效劑”的分案申請。
【技術領域】
[0002]本發明屬于微生物制劑【技術領域】，具體是指側孢芽孢桿菌制劑。
【背景技術】
[0003]我國微生物肥料的研發和應用始于20世紀50年代，由于研究經費匱乏，長期以來，微生物肥料產業整體水平不高、技術創新不足、產品質量不穩定、利用程度較低等問題。目前世界上已有70多個國家和地區開發應用微生物肥料，在歐美發達國家農業生產中，微生物肥料的使用已達肥料總量的20%以上，總產量以10%~20%的速度遞增。而我國年產微生物肥僅占化肥產量的0.5%。據專家測算，如果這一比例達到3%，就能減少50萬噸化肥用量，增產糧食100億公斤。
[0004]我國是一個農業大國，作物種植面積廣闊。農業是國民經濟的基礎，是“安天下的產業”。我國和世界大多數農業國家一樣，目前均面臨著因過量使用化肥、農藥、激素而造成的環境污染、土壤酸化板結、地力衰退、農產品質量下降、有毒化學物質殘留超標、危害人類健康等日趨嚴峻問題。尤其是食品安全、餐桌污染給人類帶來的危害，已引起國際社會普遍關注。因此，發展生態農業，生產綠色食品，保障人民健康，倍受各國政府重視和支持。“綠色、環保、健康”已成為當今社會發展的主題。“解決21世紀農業問題，關鍵靠生物技術”，已成為世界各國專家、政要的共同認識。利用生物技術修復土壤、降解毒害、消除污染、促進植物和動物生長、增強防病抗逆能力、提高產量改善品質，其獨特卓越的功效已為農業工作者所認識和接受。生物工 程，被喻為“21世紀的朝陽產業”。應用生物技術研制的綠色食品生產資料和環保產品，具有巨大的市場需求和發展空間。我國微生物肥料的市場前景極為廣闊。

【發明內容】

[0005]本發明的目的在于利用微生物菌種和先進的生物技術研制側孢芽孢桿菌制劑以及利用側孢芽孢桿菌制劑制備微生物肥料。
[0006]本發明是這樣實現的:
本發明的工藝流程路線如下:
1、側孢芽孢桿菌制劑的制備:菌種(安瓿管)一試管斜面菌種培養一搖瓶菌種培養一種子罐深層液體發酵培養一封閉式固體發酵箱培養一一側孢芽孢桿菌制劑。
[0007]原料菌選育:
通過對土壤中大量微生物的分離、篩選，將防病、促生長、抗逆性強的側孢芽孢桿菌iBaciIlus laterosporus)作為生產菌株之一，該菌株經中國疾病預防控制中心營養與食品安全所進行了菌種毒力試驗，證實該菌株按食品經口毒性分級標準，屬實際無毒物質。該菌株的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址:北京市海淀區中關村北一條13號，中國科學院微生物研究所)菌株保藏編號為=CGMCCN0.1755 ；
原料菌株側孢芽孢桿菌的特性:
1、菌種選育形態學特性
形狀及排列:菌體桿狀，端稍細，單生成對、成堆；芽孢呈橢圓形，(I~
1.2) X (2.5~3) μ m，附著于芽孢一側有獨木舟形體，芽孢在紡錘形孢囊中側生、中生。
[0008]運動及鞭毛:能運動。
[0009]2、生理特性
(O明膠穿刺培養:液化:陽性;液化速度:慢，弱。
[0010](2)淀粉水解:陰性。
[0011](3)與氧的關系:有氧、無氧均能生長。
[0012](4)酪蛋白水解:陽性。
[0013](5)酪氨酸水解:陰性。
[0014](6) 二羥丙酮的形成:陰性。
[0015]3、培養學特性:培養時任選一種培養基培養
【權利要求】
1.側孢芽孢桿菌制劑，其特征在于:側孢芽孢桿菌制劑的制備: a.菌種選育 (安瓿管)形狀及排列:菌體桿狀，端稍細，單生成對、成堆；芽孢呈橢圓形，(I~1.2) X(2.5~3) μ m，附著于芽孢一側有獨木舟形體，芽孢在紡錘形孢囊中側生、中生； 運動及鞭毛:能運動； b.菌種培育 斜面菌種培養:試管斜面培養基:牛肉膏一蛋白胨培養基；培養溫度:32±1°C ;培養時間:72~96小時； 搖瓶培養:培養溫度:32±1°C，培養時間:30~32小時； c.制劑生產 種子罐深層液體發酵培養:培養溫度:32土1°C,培養時間:18~20小時,通氣條件1:.0.3 ~0.5V/V ； 封閉式固體發酵培養箱培養: 培養溫度28~35°C，培養時間:96~120小時，培養濕度:60%~90% ； 側孢芽孢桿菌制劑一檢測合格； 側孢芽孢桿菌制劑檢驗指標:有效活菌> 50億/克；雜菌率< 5% ;水分< 10% ； 其中，所述的菌種為側孢芽孢桿菌菌株，已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，菌株保藏編號為=CGMCC N0.1755。
【文檔編號】C12R1/07GK103725626SQ201310592554
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2010年1月26日 優先權日:2010年1月26日
【發明者】張新雄 申請人:東莞市保得生物工程有限公司