一種牡丹肽飲料及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種牡丹肽飲料及其制備方法，該飲料按照重量份數由以下原料制成：牡丹肽溶液30-40份、牡丹籽殼提取液1-3份、牡丹花露1-5份、牡丹花提取液1-3份、甜味劑1-3份、乳化劑0.1-0.3份和水47-64份；所述的牡丹肽溶液由經過炒制的牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水磨漿后水解發酵制得。本發明提供的牡丹肽飲料蛋白含量高、營養價值高、口味佳，含有多種具有較好保健功能的活性成分，且牡丹肽分子量較小，分布均勻，最大限度的保留了牡丹籽的功能，天然、高營養、易吸收，克服了植物蛋白難以消化吸收的問題，具有顯著的抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多種生物活性。
【專利說明】一種牡丹肽飲料及其制備方法

【技術領域】
[0001] 本發明屬于食品領域，主要涉及一種牡丹肽飲料及其制備方法。

【背景技術】
[0002] 牡丹是我國特有的木本名貴花卉，有數千年的自然生長和兩千多年的人工栽培歷 史，素有"國色天香"、"花中之王"的美稱。牡丹全身是寶，牡丹花可供觀賞，還可以制成牡 丹花茶、牡丹花精油；牡丹根皮是傳統中藥"丹皮";牡丹籽油含有多種不飽和脂肪酸，尤其 是罕見的奇數脂肪酸，是一種具有重要開發價值的食用油脂來源通過脫皮后牡丹籽仁不僅 含有脂肪、蛋白質等營養成分，還含有芍藥苷，白芍苷，羥基芍藥苷，羥基白芍苷等芍藥苷類 化合物。如何全發面開發利用牡丹將會是一個非常重要且任務艱巨的研究課題。


【發明內容】

[0003] 本發明的目的是提供一種牡丹肽飲料及其制備方法，該飲料蛋白含量高、營養價 值高、口味佳，含有多種具有較好保健功能的活性成分，且牡丹肽分子量較小，分布均勻，最 大限度的保留了牡丹籽的功能，天然、高營養、易吸收，克服了植物蛋白難以消化吸收的問 題，具有顯著的抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多種生物活性。
[0004] 本發明實現上述目的采用的技術方案是：一種牡丹肽飲料，按照重量份數由以下 原料制成：牡丹肽溶液30-40份、牡丹籽殼提取液1-3份、牡丹花露1-5份、牡丹花提取液 1-3份、甜味劑1-3份、乳化劑0. 1-0. 3份和水47-64份； 所述的牡丹肽溶液由經過炒制的牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水磨漿后水解發酵 制得； 所述的牡丹籽殼提取液由牡丹籽殼提取出的經過干燥的提取物加入其重量6-8倍的 水溶解制得； 所述的牡丹花露為干燥牡丹花瓣經水蒸氣蒸餾收集得到的餾出液； 所述的牡丹花提取液為經過水蒸氣蒸餾的牡丹花瓣提取得到的干燥提取物加入其重 量6-8倍的水溶解而得。
[0005] 所述的牡丹肽飲料的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽溶液的制備 1) 取油用牡丹籽原材料，脫殼后收集牡丹籽殼，并將得到的牡丹籽仁用pH值為 8. 5-9. 5的稀堿水浸泡除雜，再用清水洗滌3-4次，晾干水分后在150-180°C的炒鍋中炒制 5-8 min，得到炒牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的炒牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水，用160-220目的研磨機中研 磨2-4遍，得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為 7. 5-9. 6,然后加入培養成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為 0. 6-1. 2 %，保持溫度為40-50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為100-200 r/min，在無菌空氣下水 解24-48 h，水解結束后升溫至110-12(TC進行高溫滅活，過濾除渣，即制得牡丹肽溶液，備 用； 步驟二、其他原料的制備 取步驟一得到的牡丹籽殼加入提取液進行浸提，提取液濃縮干燥后加入其重量6-8倍 的水，溶解完全，即得到牡丹籽殼提取液，備用； 將牡丹花瓣進行水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集2000ml餾出液的量進行 收集，得到的餾出液即為牡丹花露，備用； 將經過水蒸氣蒸餾的牡丹花瓣加水進行提取，，提取液濃縮干燥后加入其重量6-8倍 的水，溶解完全，即得到牡丹花提取液，備用； 步驟三、牡丹肽飲料的制備 按照重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽溶液30-40份、步驟二得到的牡丹籽殼提取 液1-3份、牡丹花露1-5份和牡丹花提取液1-3份，再取甜味劑1-3份、乳化劑0. 1-0. 3份和 水47-64份，備用；先向混合釜內加入水，然后加入牡丹肽溶液，再加入乳化劑，攪拌均勻， 然后依次加入牡丹籽殼提取液、牡丹花露、牡丹花提取液和甜味劑，在溫度為50-60 °C條件 下攪拌20-30min，過180-200目篩，在壓力為20-30Mpa下均質1-2次，最后在140-160°C溫 度下采用超高溫瞬間殺菌15-20S，灌裝，即完成牡丹肽飲料的制備。
[0006] 步驟一所述的蛋白酶混合物是指重量比為1:0. 8-1.2:0. 8-1.2 :0-1.2:0-1.2的 胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、堿性2709蛋白酶和中性Neutrase蛋白酶的混合 物。
[0007] 步驟二所述的牡丹籽殼提取液的具體制備方法為：取步驟一收集的牡丹籽殼，力口 入其重量15-25倍的水，超聲提取30-50min，收集提取液并濃縮至原體積的1/4-1/5,得到 濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積4-6倍的無水乙醇，混合后靜置3-6h，過濾，將得到的 濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧干燥，得到牡丹籽殼提取物，備用；向牡丹籽殼提取物 中加入其重量6-8倍的水，充分溶解后過180-200目篩，得到的濾液即為牡丹籽殼提取液。
[0008] 步驟二所述的牡丹花露的具體制備方法為：取牡丹花瓣原材料，在室溫下干燥至 水分含量為20-30%，得到干燥牡丹花瓣，備用；然后加入干燥丹花瓣重量3-5%的食鹽，揉捻 后采用水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集2000ml餾出液的量進行收集，得到的餾 出液即為牡丹花露。
[0009] 步驟二所述的牡丹花提取液的具體制備方法為：向經過蒸餾的牡丹花中加入其 重量的10-15倍的水，超聲提取20-30min，然后將提取液濃縮至原體積的1/4-1/5,再向濃 縮液中加入體積4-6倍的無水乙醇，混合靜置3-6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的 1/3-1/4,噴霧干燥，得到牡丹花提取物，備用；向牡丹花提取物中加入其重量6-8倍的水， 充分溶解，過180-200目篩，濾液即為牡丹花提取液。
[0010] 本發明的有益效果 其一、本發明提供的牡丹肽飲料蛋白含量高、營養價值高、口味佳，含有多種具有較好 保健功能的活性成分，如芍藥苷、白芍苷、羥基芍藥苷、羥基白芍苷等芍藥苷類化合物，具有 較好的抗高血脂、抗血栓形成，擴張冠狀動脈，增加冠脈流量，對抗急性心肌缺血，降低血壓 具有較好的療效的，另外還能夠顯著提高人的增強免疫力，抗炎抗潰瘍、解熱解痙、利尿等。 而且，充分利用復合蛋白酶來水解牡丹籽餅柏蛋白，制備得到的牡丹小肽分子量較小，分布 均勻，最大限度的保留了牡丹籽的功能，天然、高營養、易吸收，克服了植物蛋白難以消化吸 收的問題，具有顯著的抗氧化、抗菌和抗腫瘤等多種生物活性。
[0011] 其二、本發明是以油用牡丹，主要是鳳丹和紫斑牡丹牡丹籽仁為主要原料，同時充 分利用牡丹籽殼、牡丹花等其它的牡丹原料資源，實現了牡丹資源的充分利用，不會造成任 何牡丹資源的浪費，且本發明在制備過程對環境不產生有毒有害排放物，制備工藝簡單，適 合規模化生產。

【具體實施方式】
[0012] 一種牡丹肽飲料，按照重量份數由以下原料制成：牡丹肽溶液30-40份、牡丹籽殼 提取液1-3份、牡丹花露1-5份、牡丹花提取液1-3份、甜味劑1-3份、乳化劑0. 1-0. 3份和 水47-64份； 所述的牡丹肽溶液由經過炒制的牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水磨漿后水解發酵 制得； 所述的牡丹籽殼提取液由牡丹籽殼提取出的經過干燥的提取物加入其重量6-8倍的 水溶解制得； 所述的牡丹花露為干燥牡丹花瓣經水蒸氣蒸餾收集得到的餾出液； 所述的牡丹花提取液為經過水蒸氣蒸餾的牡丹花瓣提取得到的干燥提取物加入其重 量6-8倍的水溶解而得。
[0013] 所述的牡丹肽飲料的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽溶液的制備 1) 取油用牡丹籽原材料，脫殼后收集牡丹籽殼，并將得到的牡丹籽仁用pH值為 8. 5-9. 5的稀堿水浸泡除雜，再用清水洗滌3-4次，晾干水分后在150-180°C的炒鍋中炒制 5-8 min，得到炒牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的炒牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水，用160-220目的研磨機中研 磨2-4遍，得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為 7. 5-9. 6,然后加入培養成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為 0. 6-1. 2 %，保持溫度為40-50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為100-200 r/min，在無菌空氣下水 解24-48 h，水解結束后升溫至110-120°C進行高溫滅活，過濾除漁，即制得牡丹肽溶液，備 用； 步驟二、其他原料的制備 取步驟一得到的牡丹籽殼加入提取液進行浸提，提取液濃縮干燥后加入其重量6-8倍 的水，溶解完全，即得到牡丹籽殼提取液，備用； 將牡丹花瓣進行水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集2000ml餾出液的量進行 收集，得到的餾出液即為牡丹花露，備用； 將經過水蒸氣蒸餾的牡丹花瓣加水進行提取，，提取液濃縮干燥后加入其重量6-8倍 的水，溶解完全，即得到牡丹花提取液，備用； 步驟三、牡丹肽飲料的制備 按照重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽溶液30-40份、步驟二得到的牡丹籽殼提取 液1-3份、牡丹花露1-5份和牡丹花提取液1-3份，再取甜味劑1-3份、乳化劑0. 1-0. 3份和 水47-64份，備用；先向混合釜內加入水，然后加入牡丹肽溶液，再加入乳化劑，攪拌均勻， 然后依次加入牡丹籽殼提取液、牡丹花露、牡丹花提取液和甜味劑，在溫度為50-60 °C條件 下攪拌20-30min，過180-200目篩，在壓力為20-30Mpa下均質1-2次，最后在140-160°C溫 度下采用超高溫瞬間殺菌15-20S，灌裝，即完成牡丹肽飲料的制備。
[0014] 步驟一所述的蛋白酶混合物是指重量比為1:0. 8-1.2:0. 8-1.2 :0-1.2:0-1.2的 胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、堿性2709蛋白酶和中性Neutrase蛋白酶的混合 物。
[0015] 步驟二所述的牡丹籽殼提取液的具體制備方法為：取步驟一收集的牡丹籽殼，力口 入其重量15-25倍的水，超聲提取30-50min，收集提取液并濃縮至原體積的1/4-1/5,得到 濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積4-6倍的無水乙醇，混合后靜置3-6h，過濾，將得到的 濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧干燥，得到牡丹籽殼提取物，備用；向牡丹籽殼提取物 中加入其重量6-8倍的水，充分溶解后過180-200目篩，得到的濾液即為牡丹籽殼提取液。
[0016] 步驟二所述的牡丹花露的具體制備方法為：取牡丹花瓣原材料，在室溫下干燥至 水分含量為20-30%，得到干燥牡丹花瓣，備用；然后加入干燥丹花瓣重量3-5%的食鹽，揉捻 后采用水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集2000ml餾出液的量進行收集，得到的餾 出液即為牡丹花露。
[0017] 步驟二所述的牡丹花提取液的具體制備方法為：向經過蒸餾的牡丹花中加入其 重量的10-15倍的水，超聲提取20-30min，然后將提取液濃縮至原體積的1/4-1/5,再向濃 縮液中加入體積4-6倍的無水乙醇，混合靜置3-6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的 1/3-1/4,噴霧干燥，得到牡丹花提取物，備用；向牡丹花提取物中加入其重量6-8倍的水， 充分溶解，過180-200目篩，濾液即為牡丹花提取液。
[0018] 本發明中所述的牡丹籽為油用牡丹籽，主要有鳳丹牡丹和紫斑牡丹等。在制 備牡丹肽過程中，采用的過濾方法是板框過濾或者膜過濾，水解得到的牡丹肽分子量在 200-5000道爾頓之間，且該牡丹肽具有抗氧化、抗腫瘤及抗菌等多種活性。
[0019] 以下結合具體實施例對本發明做進一步說明： 實施例1 : 一種牡丹肽飲料，按照重量份數由以下原料制成：牡丹肽溶液40份、牡丹籽殼提取液3 份、牡丹花露5份、牡丹花提取液1份、甜味劑3份、乳化劑0. 3份和水47份； 所述的牡丹肽飲料的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽溶液的制備 1) 取鳳丹牡丹籽原材料，脫殼后收集牡丹籽殼，并將得到的牡丹籽仁用pH值為9. 5的 稀堿水浸泡除雜，再用清水洗滌4次，晾干水分后在150-180°C的炒鍋中炒制5 min，得到炒 牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的炒牡丹籽仁加入其重量20倍的水，用220目的研磨機中研磨4遍， 得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為9. 6， 然后加入培養成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為1.2 %，所述的 蛋白酶混合物是指重量比為1:1. 2:1. 2 :1. 2的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶和 堿性2709蛋白酶的混合物，保持溫度為50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為200 r/min，在無菌空 氣下水解48 h，水解結束后升溫至110-12(TC進行高溫滅活，過濾除渣，即制得牡丹肽溶液， 備用； 步驟二、其他原料的制備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量25倍的水，超聲提取50min，收集提取液并濃縮 至原體積的1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積6倍的無水乙醇，混合后靜置 6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/4,噴霧干燥，得到牡丹籽殼提取物，備用；向牡 丹籽殼提取物中加入其重量8倍的水，充分溶解后過200目篩，得到的濾液即為牡丹籽殼提 取液，備用； 取牡丹花瓣原材料，在室溫下干燥至水分含量為30%，得到干燥牡丹花瓣，備用；然后 加入干燥丹花瓣重量5%的食鹽，揉捻后采用水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集 2000ml餾出液的量進行收集，得到的餾出液即為牡丹花露，備用； 向經過蒸餾的牡丹花中加入其重量的15倍的水，超聲提取30min，然后將提取液濃縮 至原體積的1/5,再向濃縮液中加入體積6倍的無水乙醇，混合靜置6h，過濾，將得到的濾液 濃縮至原體積的1/4,噴霧干燥，得到牡丹花提取物，備用；向牡丹花提取物中加入其重量8 倍的水，充分溶解，過200目篩，濾液即為牡丹花提取液，備用； 步驟三、牡丹肽飲料的制備 按照上述重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽溶液、步驟二得到的牡丹籽殼提取液、 牡丹花露和牡丹花提取液，再取甜味劑、乳化劑和水，備用；先向混合釜內加入水，然后加入 牡丹肽溶液，再加入乳化劑，攪拌均勻，然后依次加入牡丹籽殼提取液、牡丹花露、牡丹花提 取液和甜味劑，在溫度為60 °C條件下攪拌30min，過200目篩，在壓力為30Mpa下均質2次， 最后在160°C溫度下采用超高溫瞬間殺菌20s，灌裝，即完成牡丹肽飲料的制備。
[0020] 實施例2 : 一種牡丹肽飲料，按照重量份數由以下原料制成：牡丹肽溶液30份、牡丹籽殼提取液1 份、牡丹花露1份、牡丹花提取液3份、甜味劑1份、乳化劑0. 1份和水64份； 所述的牡丹肽飲料的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽溶液的制備 1) 取紫斑牡丹籽原材料，脫殼后收集牡丹籽殼，并將得到的牡丹籽仁用pH值為8. 5的 稀堿水浸泡除雜，再用清水洗滌3次，晾干水分后在150-180°C的炒鍋中炒制5 min，得到炒 牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的炒牡丹籽仁加入其重量10倍的水，用160目的研磨機中研磨2遍， 得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為7. 5， 然后加入培養成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為0. 6 %，所述的 蛋白酶混合物是指重量比為1:0. 8:0. 8 :1. 2的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶和 中性Neutrase蛋白酶的混合物，保持溫度為40 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為100 r/min，在無 菌空氣下水解24 h，水解結束后升溫至110-12(TC進行高溫滅活，過濾除渣，即制得牡丹肽 溶液，備用； 步驟二、其他原料的制備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量15倍的水，超聲提取30min，收集提取液并濃縮 至原體積的1/4,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積4倍的無水乙醇，混合后靜置 3h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3,噴霧干燥，得到牡丹籽殼提取物，備用；向牡 丹籽殼提取物中加入其重量6倍的水，充分溶解后過180目篩，得到的濾液即為牡丹籽殼提 取液，備用； 取牡丹花瓣原材料，在室溫下干燥至水分含量為20%，得到干燥牡丹花瓣，備用；然后 加入干燥丹花瓣重量3%的食鹽，揉捻后采用水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集 2000ml餾出液的量進行收集，得到的餾出液即為牡丹花露，備用； 向經過蒸餾的牡丹花中加入其重量的10倍的水，超聲提取20min，然后將提取液濃縮 至原體積的1/4,再向濃縮液中加入體積4倍的無水乙醇，混合靜置3h，過濾，將得到的濾液 濃縮至原體積的1/3,噴霧干燥，得到牡丹花提取物，備用；向牡丹花提取物中加入其重量6 倍的水，充分溶解，過180目篩，濾液即為牡丹花提取液，備用； 步驟三、牡丹肽飲料的制備 按照上述重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽溶液、步驟二得到的牡丹籽殼提取液、 牡丹花露和牡丹花提取液，再取甜味劑、乳化劑和水，備用；先向混合釜內加入水，然后加入 牡丹肽溶液，再加入乳化劑，攪拌均勻，然后依次加入牡丹籽殼提取液、牡丹花露、牡丹花提 取液和甜味劑，在溫度為50 °C條件下攪拌20min，過180目篩，在壓力為20Mpa下均質1次， 最后在140°C溫度下采用超高溫瞬間殺菌15s，灌裝，即完成牡丹肽飲料的制備。
[0021] 實施例3: 一種牡丹肽飲料，按照重量份數由以下原料制成：牡丹肽溶液35份、牡丹籽殼提取液2 份、牡丹花露3份、牡丹花提取液2份、甜味劑2份、乳化劑0. 2份和水56份； 所述的牡丹肽飲料的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽溶液的制備 1) 取油用牡丹籽原材料，脫殼后收集牡丹籽殼，并將得到的牡丹籽仁用pH值為9. 0的 稀堿水浸泡除雜，再用清水洗滌3次，晾干水分后在150-180°C的炒鍋中炒制8 min，得到炒 牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的炒牡丹籽仁加入其重量20倍的水，用220目的研磨機中研磨2遍， 得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為8. 5， 然后加入培養成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為0. 9 %，所述的 蛋白酶混合物是指重量比為1:1. 0:1. 〇 :〇. 8的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶和 堿性2709蛋白酶的混合物，保持溫度為40-50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為150 r/min，在無 菌空氣下水解36h，水解結束后升溫至110-12(TC進行高溫滅活，過濾除渣，即制得牡丹肽 溶液，備用； 步驟二、其他原料的制備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量20倍的水，超聲提取40min，收集提取液并濃縮 至原體積的1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積5倍的無水乙醇，混合后靜置 5h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3,噴霧干燥，得到牡丹籽殼提取物，備用；向牡 丹籽殼提取物中加入其重量6倍的水，充分溶解后過200目篩，得到的濾液即為牡丹籽殼提 取液，備用； 取牡丹花瓣原材料，在室溫下干燥至水分含量為30%，得到干燥牡丹花瓣，備用；然后 加入干燥丹花瓣重量3%的食鹽，揉捻后采用水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集 2000ml餾出液的量進行收集，得到的餾出液即為牡丹花露，備用； 向經過蒸餾的牡丹花中加入其重量的10倍的水，超聲提取30min，然后將提取液濃縮 至原體積的1/4,再向濃縮液中加入體積4倍的無水乙醇，混合靜置6h，過濾，將得到的濾液 濃縮至原體積的1/3,噴霧干燥，得到牡丹花提取物，備用；向牡丹花提取物中加入其重量6 倍的水，充分溶解，過200目篩，濾液即為牡丹花提取液，備用； 步驟三、牡丹肽飲料的制備 按照上述重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽溶液、步驟二得到的牡丹籽殼提取液、 牡丹花露和牡丹花提取液，再取甜味劑、乳化劑和水，備用；先向混合釜內加入水，然后加入 牡丹肽溶液，再加入乳化劑，攪拌均勻，然后依次加入牡丹籽殼提取液、牡丹花露、牡丹花提 取液和甜味劑，在溫度為55 °C條件下攪拌25min，過190目篩，在壓力為25Mpa下均質2次， 最后在150°C溫度下采用超高溫瞬間殺菌20s，灌裝，即完成牡丹肽飲料的制備。
[0022] 實施例4 : 一種牡丹肽飲料，按照重量份數由以下原料制成：牡丹肽溶液36份、牡丹籽殼提取液2 份、牡丹花露3份、牡丹花提取液2份、甜味劑1份、乳化劑0. 2份和水56份； 所述的牡丹肽飲料的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽溶液的制備 1) 取鳳丹牡丹籽原材料，脫殼后收集牡丹籽殼，并將得到的牡丹籽仁用pH值為9. 5的 稀堿水浸泡除雜，再用清水洗滌4次，晾干水分后在150-180°C的炒鍋中炒制5 min，得到炒 牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的炒牡丹籽仁加入其重量18倍的水，用220目的研磨機中研磨4遍， 得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為9. 6， 然后加入培養成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為1. 2 %，所述的 蛋白酶混合物是指重量比為1:1. 2:0. 8 :1. 2的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶和 堿性2709蛋白酶的混合物，保持溫度為50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為200 r/min，在無菌空 氣下水解48 h，水解結束后升溫至110-12(TC進行高溫滅活，過濾除渣，即制得牡丹肽溶液， 備用； 步驟二、其他原料的制備 取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量25倍的水，超聲提取50min，收集提取液并濃縮 至原體積的1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液中加入其體積6倍的無水乙醇，混合后靜置 6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/4,噴霧干燥，得到牡丹籽殼提取物，備用；向牡 丹籽殼提取物中加入其重量8倍的水，充分溶解后過200目篩，得到的濾液即為牡丹籽殼提 取液，備用； 取牡丹花瓣原材料，在室溫下干燥至水分含量為30%，得到干燥牡丹花瓣，備用；然后 加入干燥丹花瓣重量5%的食鹽，揉捻后采用水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集 2000ml餾出液的量進行收集，得到的餾出液即為牡丹花露，備用； 向經過蒸餾的牡丹花中加入其重量的15倍的水，超聲提取30min，然后將提取液濃縮 至原體積的1/5,再向濃縮液中加入體積6倍的無水乙醇，混合靜置6h，過濾，將得到的濾液 濃縮至原體積的1/4,噴霧干燥，得到牡丹花提取物，備用；向牡丹花提取物中加入其重量8 倍的水，充分溶解，過200目篩，濾液即為牡丹花提取液，備用； 步驟三、牡丹肽飲料的制備 按照上述重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽溶液、步驟二得到的牡丹籽殼提取液、 牡丹花露和牡丹花提取液，再取甜味劑、乳化劑和水，備用；先向混合釜內加入水，然后加入 牡丹肽溶液，再加入乳化劑，攪拌均勻，然后依次加入牡丹籽殼提取液、牡丹花露、牡丹花提 取液和甜味劑，在溫度為60 °C條件下攪拌30min，過200目篩，在壓力為30Mpa下均質2次， 最后在160°C溫度下采用超高溫瞬間殺菌20s，灌裝，即完成牡丹肽飲料的制備。
[0023] 活性測試試驗 1.抗腫瘤活性研究 1)試驗材料 胎牛血清，96孔培養板，恒溫箱，RPM1640培養液。
[0024] 2)方法 對上述實施例中得到的牡丹肽進行細胞毒活性測試，采用的方法為MTT法。
[0025] 3)試驗步驟 ⑴取對數生長期細胞，用含10%胎牛血清的RPM1640培養液，制成單細胞懸液5X 104 個/mL，將該懸液加到96孔培養板中，每孔加入1 X 104個細胞。培養24 h后，加入受試牡 丹肽濃度分別為30 μ g/mL、10 μ g/mL。
[0026] (2)將平板在37 °C，含5%C02空氣及100%濕度的恒溫箱中孵育3天，去除培養液。
[0027] (3) MTT用無血清的RPM1640培養液配成1 mg/mL溶液，每孔加100 μ L，37°C溫育 4 h，使MTT還原為甲臢。
[0028] (4)吸出上層清液，加入150 μ L DMS0使甲臢溶解，于ELISA儀570 nm處測0D值。
[0029] 4)試驗結果 表1牡丹肽細胞毒活性實驗數據（n=3)

【權利要求】
1. 一種牡丹肽飲料，其特征在于：按照重量份數由以下原料制成：牡丹肽溶液30-40 份、牡丹籽殼提取液1-3份、牡丹花露1-5份、牡丹花提取液1-3份、甜味劑1-3份、乳化劑 0. 1-0. 3 份和水 47-64 份； 所述的牡丹肽溶液由經過炒制的牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水磨漿后水解發酵 制得； 所述的牡丹籽殼提取液由牡丹籽殼提取出的經過干燥的提取物加入其重量6-8倍的 水溶解制得； 所述的牡丹花露為干燥牡丹花瓣經水蒸氣蒸餾收集得到的餾出液； 所述的牡丹花提取液為經過水蒸氣蒸餾的牡丹花瓣提取得到的干燥提取物加入其重 量6-8倍的水溶解而得。
2. 如權利要求1所述的一種牡丹肽飲料的制備方法，其特征在于：包括以下步驟： 步驟一、牡丹肽溶液的制備 1) 取油用牡丹籽原材料，脫殼后收集牡丹籽殼，并將得到的牡丹籽仁用pH值為 8. 5-9. 5的稀堿水浸泡除雜，再用清水洗滌3-4次，晾干水分后在150-180°C的炒鍋中炒制 5-8 min，得到炒牡丹籽仁，備用； 2) 將步驟1)得到的炒牡丹籽仁加入其重量10-20倍的水，用160-220目的研磨機中研 磨2-4遍，得到牡丹籽漿液，備用； 3) 用質量濃度為20%的氫氧化鈉溶液調節步驟2)得到的牡丹籽漿液的PH值為 7. 5-9. 6,然后加入培養成熟的混合蛋白酶，并使牡丹籽漿液中蛋白酶的質量百分數為 0. 6-1. 2 %，保持溫度為40-50 °C，控制攪拌槳攪拌轉數為100-200 r/min，在無菌空氣下水 解24-48 h，水解結束后升溫至110-120°C進行高溫滅活，過濾除漁，即制得牡丹肽溶液，備 用； 步驟二、其他原料的制備 取步驟一得到的牡丹籽殼加入提取液進行浸提，提取物濃縮干燥后加入其重量6-8倍 的水，溶解完全，即得到牡丹籽殼提取液，備用； 將牡丹花瓣進行水蒸氣蒸餾，按照每千克干燥牡丹花瓣收集2000ml餾出液的量進行 收集，得到的餾出液即為牡丹花露，備用； 將經過水蒸氣蒸餾的牡丹花瓣加水進行提取，提取液濃縮干燥后加入其重量6-8倍的 水，溶解完全，即得到牡丹花提取液，備用； 步驟三、牡丹肽飲料的制備 按照重量份數分別取步驟一得到的牡丹肽溶液30-40份、步驟二得到的牡丹籽殼提取 液1-3份、牡丹花露1-5份和牡丹花提取液1-3份，再取甜味劑1-3份、乳化劑0. 1-0. 3份和 水47-64份，備用；先向混合釜內加入水，然后加入牡丹肽溶液，再加入乳化劑，攪拌均勻， 然后依次加入牡丹籽殼提取液、牡丹花露、牡丹花提取液和甜味劑，在溫度為50-60 °C條件 下攪拌20-30min，過180-200目篩，在壓力為20-30Mpa下均質1-2次，最后在140-160°C溫 度下采用超高溫瞬間殺菌15-20S，灌裝，即完成牡丹肽飲料的制備。
3. 如權利要求2所述的一種牡丹肽飲料的制備方法，其特征在于：步驟一所述的混合 蛋白酶是指重量比為1:0. 8-1. 2:0. 8-1. 2 :0-1. 2:0-1. 2的胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、枯草桿 菌蛋白酶、堿性2709蛋白酶和中性Neutrase蛋白酶的混合物。
4. 如權利要求2所述的一種牡丹肽飲料的制備方法，其特征在于：步驟二所述的牡 丹籽殼提取液的具體制備方法為：取步驟一收集的牡丹籽殼，加入其重量15-25倍的水， 超聲提取30-50min，收集提取液并濃縮至原體積的1/4-1/5,得到濃縮液，備用；向濃縮液 中加入其體積4-6倍的無水乙醇，混合后靜置3-6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的 1/3-1/4,噴霧干燥，得到牡丹籽殼提取物，備用；向牡丹籽殼提取物中加入其重量6-8倍的 水，充分溶解后過180-200目篩，得到的濾液即為牡丹籽殼提取液。
5. 如權利要求2所述的一種牡丹肽飲料的制備方法，其特征在于：步驟二所述的牡丹 花露的具體制備方法為：取牡丹花瓣原材料，在室溫下干燥至水分含量為20-30%，得到干 燥牡丹花瓣，備用；然后加入干燥丹花瓣重量3-5%的食鹽，揉捻后采用水蒸氣蒸餾，按照每 千克干燥牡丹花瓣收集2000ml餾出液的量進行收集，得到的餾出液即為牡丹花露。
6. 如權利要求2所述的一種牡丹肽飲料的制備方法，其特征在于：步驟二所述的牡丹 花提取液的具體制備方法為：向經過蒸餾的牡丹花中加入其重量的10-15倍的水，超聲提 取20-30min，然后將提取液濃縮至原體積的1/4-1/5,再向濃縮液中加入體積4-6倍的無水 乙醇，混合靜置3-6h，過濾，將得到的濾液濃縮至原體積的1/3-1/4,噴霧干燥，得到牡丹花 提取物，備用；向牡丹花提取物中加入其重量6-8倍的水，充分溶解，過180-200目篩，濾液 即為牡丹花提取液。
【文檔編號】A23L1/305GK104041901SQ201410292815
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年6月26日 優先權日:2014年6月26日
【發明者】劉普, 鄧瑞雪, 易軍鵬, 尹衛平, 李小方, 高嘉嶼, 田軼, 段文錄, 梁菊, 曹輝 申請人:河南科技大學